国家质检总局科技计划项目(2013IK029)
- 作品数：2 被引量：6H指数：2
- 相关作者：于晓璐薛春宜陈茹宋长绪邱杨更多>>
- 相关机构：广东出入境检验检疫局中山大学广东省农业科学院更多>>
- 发文基金：广东省农业攻关项目国家质检总局科技计划项目更多>>
- 相关领域：生物学农业科学更多>>
- 3种从猪精液中提取病毒核酸方法的比较被引量：3
- 2014年
- 试验分别以猪伪狂犬病病毒(PRV)和猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)作为猪DNA、RNA病毒的代表,通过添加法制备带毒精液,采用样品前处理联合试剂盒硅基质柱纯化法(简称柱纯化法)、优化TRIzol方法(简称TRIzol法)和国外文献方法(简称文献法)分别对带毒精液进行核酸提取,用实时荧光定量RT-PCR或PCR比较不同核酸提取方法的效率。结果显示,柱纯化法提取的病毒核酸的检测灵敏度达到最高,对PRRSV及PRV带毒自然精液、商品化稀释精液的检测低限分别可达1.26和0.13TCID50/mL。柱纯化法全程包括精液的前处理和核酸提取可在1h内完成,与文献法所用时间相当,比优化TRIzol法缩短0.5h。本试验优化了适用于从猪自然精液和商品化稀释精液中高效提取病毒核酸的方法。
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- 关键词：猪精液实时荧光定量PCR
- 建立修饰碱基共有序列引物扩增方法同步检测三种猪病毒
- 引言猪的繁殖障碍问题是制约我国生猪产业蓬勃发展的重要因素,猪细小病毒(PPV)、猪圆环病毒Ⅱ型(PCV-2)、猪伪狂犬病毒(PRV)是引起猪繁殖障碍疾病的重要病原。临床已发现2种甚至多种病毒混合感染的情况,常规多重PCR...
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- 高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒双重液相基因芯片检测方法的建立被引量：3
- 2016年
- 为了实现快速检测猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)并同步鉴别高致病性PRRSV毒株(HPPRRSV),根据PRRSV囊膜蛋白GP2基因保守序列和HP-PRRSV特有的Nsp2基因区保守序列设计特异扩增引物和杂交探针,通过双重一步法RT-PCR不对称扩增和双重微球杂交反应,建立了双重液相基因芯片方法。对12株PRRSV以及其他12种猪病原体的检测显示,该法能特异性检测12株PRRSV毒株并准确鉴别其中7株HP-PRRSV,与其他病原体无交叉反应;对PRRSV、HP-PRRSV病毒液的检测低限均小于每个反应0.5TCID_(50);其组内、组间检测变异系数均<10%;检测55份疑似临床样品并与商品化荧光RTPCR试剂盒比较检测结果,符合率达98.2%(54/55)。研究结果为适应临床快速检测PRRSV提供了一种新的分子生物学检测方法。
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- 关键词：猪繁殖与呼吸综合征病毒高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒
