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盐胁迫下海马齿叶片结构变化被引量：17: 2010年; 用石蜡切片法制片、光学显微镜观察了海马齿植物营养器官———叶片的盐适应结构变化,以明确盐生植物对盐渍生境适应的叶片结构变化特征,为盐生植物的耐盐机理研究提供依据。结果表明：（1）海马齿植物叶片表现出许多适应干旱和盐渍环境的特点,其基本特征为：叶片肉质化,为典型的等面叶;栅栏组织发达,且含有大量叶绿体;叶表皮气孔微下陷,叶表皮细胞外壁的角质层较薄,表皮细胞大小不等,外切向壁外凸,参差不齐,有些表皮细胞特化为泡状细胞,其数量与盐胁迫的浓度呈正相关。（2）叶的海绵组织中含有大量的薄壁细胞,幼叶海绵组织的薄壁细胞在0.5%-2.5%NaCl胁迫下均变大,且数量也增加;而老叶海绵组织的薄壁细胞只有在低浓度（0.5%NaCl）的盐胁迫下变大,而在高浓度下其薄壁细胞反而变小或成不规则形状。（3）盐晶广泛分布在海马齿的叶肉组织细胞内,且其数量随着盐胁迫浓度增加而增加。; 李瑞梅周广奇符少萍胡新文郭建春; 关键词：海马齿盐生植物叶片解剖结构

盐生植物海马齿离体再生被引量：5: 2010年; 建立盐生植物海马齿(Sesuvium portulacastrum)的离体再生体系,为其生物技术改良奠定基础。以海马齿叶片、茎和腋芽为外植体,在不同激素配比的培养基上进行愈伤组织诱导、继代培养以及不定芽的分化和生根培养。结果表明:最适愈伤组织诱导的外植体为叶片,其次为幼嫩的茎段和腋芽。以叶片为外植体,愈伤组织诱导率最高的培养基为MS+2.0mg·L-12,4-D+0.5mg·L-16-BA+3%sucrose;芽分化最适培养基为MS+1.0mg·L-12,4-D+0.2mg·L-16-BA+3%su-crose;生根最适培养基为MS+3%sucrose+0.1%AC。炼苗移栽后,成活率可达80%。; 申龙斌段瑞军郭建春符少萍; 关键词：植株再生海马齿

海马齿再生体系的优化及GUS基因的转化被引量：1: 2009年; 以海马齿无菌实生小苗的叶片为外植体,对不同激素浓度和组合以及不同pH值等培养条件进行实验比较。结果表明:适于愈伤组织诱导的培养基为MS+2,4-D2.0mg/L+6-BA0.5mg/L+蔗糖3%,诱导率达100%;适于芽分化的培养基为MS+NAA3.0mg/L+6-BA0.5mg/L,分化率达到77.4%;诱导愈伤组织形成培养基的最适pH值为4.5,而诱导愈伤组织分化培养基的最适pH值为5.0。以小苗叶片为外植体材料和农杆菌介导的方法进行GUS基因的转化,组织化学染色检测发现共培养2d后的外植体中有蓝色斑点产生,在转化2个月后的外植体上形成的愈伤组织也存在点状的蓝色斑点,说明GUS基因已转入海马齿外植体中。; 申龙斌段瑞军郭建春符少萍; 关键词：海马齿离体再生 GUS基因

不同柱花草品种沙地种植适应性的比较被引量：2: 2010年; 在沙地种植柱花草,以生物产量、叶绿素含量、可溶性糖含量等9个指标为评定标准,评价10个柱化草品种对沙地、贫瘠环境的适应性。通过聚类分析,将10个柱花草品种在沙地种植的适应性初步分为强、中、弱3类,进而依据主成分分析,得出它们对沙地种植的适应性,由强到弱依次为:格拉姆柱花草>热研13号柱花草>热研7号柱花草>热研10号柱花草>西卡柱花草>有钩柱花草>热研5号柱花草>思柯非柱花草>热研2号柱花草>库克柱花草。; 刘旃麟段瑞军刘国道符少萍郭建春

盐生植物海马齿盐胁迫全长cDNA文库的构建与分析被引量：3: 2010年; 为了研究盐生植物耐盐基因表达调控,本实验以海水浇灌的海马齿植株为供试材料,构建了盐胁迫下的全长cDNA文库。构建方法如下:采用改良的CTAB法提取总RNA,SMART法反转录合成cDNA,LD-PCR方法合成双链cDNA。LD-PCR产物经蛋白酶K消化和SfiⅠ酶切后,经CHROMA SPIN+TE-1000分离柱子除去小片段DNA后,回收0.5kb以上的片段,按照适当的比例连接λTripIEX2载体。连接产物利用MaxPlaxTMLambda Packaging Extracts进行体外包装,得到海马齿初级cDNA文库。初始文库的独立克隆数为2.4×106pfu,初级文库滴度大于4.80×106pfu/mL,重组率为93.75%,插入片段为0.5～5kb,扩增文库的滴度为1.21×109pfu/mL,所得文库质量较高。本研究表明该cDNA文库适合于盐生植物海马齿相关基因的克隆和分析。; 郑善清段瑞军郭建春; 关键词：海马齿盐胁迫全长CDNA文库

盐生肉质草本植物海马齿叶片石蜡切片简易方法被引量：1: 2009年; 海马齿是海边盐生肉质草本植物,由于叶片的肉质化,传统石蜡切片制作路线不能制作出结构完整,效果较好的切片。本实验以传统的石蜡切片方法为基础,在固定方法选择,脱水时间控制,包埋温度,染色等方面做了适合海马齿叶片特点的改良,固定方法采用戊二醛固定液固定24h,并洗脱;脱水每级梯度时间为1h,包埋温度在100℃,染色方法采用固绿染色法。结果表明:采用这种改良的方法可以制作出染色清晰,组织结构完整的海马齿叶片切片。这对其它肉质化植物的石蜡切片制作有着借鉴作用。; 周广奇胡新文郭建春; 关键词：肉质草本植物海马齿石蜡切片

盐生植物海马齿中与K^＋离子胁迫有关的基因功能初步鉴定被引量：5: 2009年; 盐生植物海马齿常年生长在海边沙地,能忍耐高盐干旱。本研究对从海马齿植物盐胁迫下的差减文库(SSH文库)中分离的3个全长基因SRTG152-Ⅰ、SRTG152-Ⅱ和SRTG152-Ⅲ(GenBank:FJ457924,FJ457925和FJ457926)进行了微生物表达和耐盐分析。3个全长基因分别插入pET-22b(+)表达载体,经过1mmol/L的IPTG在37℃下诱导3h,它们均获得了成功表达。耐盐性功能分析表明,3个基因对Ca2+、Mg2+和Na+离子没有抗性,而在900mmol/L高浓度K+离子的胁迫下与对照相比赋予菌株一定的K+离子抗性。所以,我们初步推测这3个全长基因SRTG152-Ⅰ、SRTG152-Ⅱ和SRTG152-Ⅲ是一类与K+离子的抗性相关的基因。; 刘钢段瑞军郭建春

北美海蓬子SbNHX1基因耐盐性及功能结构域分析被引量：3: 2009年; 对从北美海蓬子中分离的Na+/H+逆向转运蛋白基因SbNHX1进行了耐盐性及功能结构域分析.利用套叠PCR技术去除SbNHX1基因C末端162个核苷酸,得到SbNHX1-C基因,然后将SbNHX1、SbNHX1-C和拟南芥Na+/H+逆向转运蛋白基因AtNHX1分别插入pET22b(+)表达载体,转化大肠杆菌B菌株,进行各种金属盐离子胁迫分析.结果表明,北美海蓬子Na+/H+逆向转运蛋白基因SbNHX1只对Na+、K+离子有抗性,且耐盐性强于拟南芥Na+/H+逆向转运蛋白基因AtNHX1.缺失C末端的SbNHX1-C基因对Na+、K+离子胁迫无抗性,说明北美海蓬子Na+/H+逆向转运蛋白基因SbNHX1的耐盐作用与该基因C末端1353bp至1514bp的序列密切相关.; 刘钢肖前谷段瑞军郭建春; 关键词：北美海蓬子盐胁迫大肠杆菌

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