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人骨形成蛋白-7真核表达质粒的构建及其在骨髓基质细胞的表达被引量：4: 2007年; 目的利用基因工程原理构建pIRES2-EGFP-hBMP-7真核表达质粒并检测其在Beagle犬骨髓基质细胞(BMSC)的表达。方法利用DNA重组技术,将hBMP-7片段克隆到真核表达载体pIRES2-EGFP中,EcoRⅠ单酶切、PCR及序列分析鉴定获得的重组质粒;脂质体介导的方法转染Beagle犬BMSC;免疫组织化学染色检测hBMP-7基因的表达。结果hBMP-7被定向插入到真核表达载体pIRES2-EGFP中,转染BMSC 24 h后可观察到转染的BMSC表达绿色荧光蛋白,48 h后转染效率达到31%。免疫组织化学染色证实重组pIRES2-EGFP-hBMP-7在BMSC中的表达。结论利用基因工程原理成功构建真核表达质粒pIRES2-EGFP-hBMP-7,并可在BMSC中表达。; 李艳芬闫福华江一平骆凯赵欣; 关键词：骨形态发生蛋白质类真核细胞骨髓细胞

冻存骨髓基质细胞和胶原膜在裸鼠体内的成骨研究被引量：1: 2007年; 目的:研究经超低温冻存后的骨髓基质细胞(bone marrow stromal cells,BMSCs)和支架材料胶原膜BME-10X复合体植入裸鼠体内的成骨情况。方法:体外分离培养Beagle犬BMSCs,冻存二代生长状况良好的BMSCs。12个月后,复苏冻存的BMSCs,并在体外构建BMSCs和0.5cm×0.5cm大小的BME-10X复合体。将胶原膜+BMSCs+矿化诱导培养液、胶原膜+BMSCs+基础培养液、单纯胶原膜+矿化诱导培养液培养5d后,植入裸鼠体内,并于术后第4、8、12周取出标本,进行大体观察和组织病理学分析。结果:单纯胶原膜+诱导培养液组在植入胶原膜后,胶原膜边界清晰,膜边缘及内部基本没有细胞生长;在胶原膜+BMSCs+基础培养液组,术后第4周可见,胶原膜内有细胞长入,并有细小的条索状新生胶原形成,随着时间的延长,支架胶原逐渐分解,新形成的条索状胶原纤维变粗大;在胶原膜+BMSCs+矿化诱导培养液组,植入后也可见支架胶原的分解和更多的细胞生长,大量新生的胶原形成类骨质样组织。结论:冻存BMSCs复苏后进行体外培养扩增与诱导分化,并在在体内环境下复合胶原支架材料,仍然具有较强成骨能力。; 袁芳闫福华郑瑜谦李厚轩赵欣林敏魁; 关键词：胶原膜骨形成裸鼠

冻存骨髓基质细胞体外成骨潜能的实验研究被引量：4: 2006年; 目的观察冻存骨髓基质细胞(BMSC)的体外生长特点及诱导与非诱导条件下的成骨能力。方法取冻存11个月犬BMSC复苏后进行体外扩增培养,传代培养中加入10-8mol/L地塞米松、50 mg/L Vit C和10mmol/Lβ-甘油磷酸钠进行诱导分化,观察细胞形态、细胞诱导前后增殖情况、细胞碱性磷酸酶(ALP)含量以及形成矿化结节能力的改变。结果冻存BMSC复苏后呈成纤维样表现,增殖力强。在诱导液的作用下冻存BMSC增殖性能降低,ALP活性增加,诱导5 d后可见矿化结节。结论冻存BMSC增殖能力强,经诱导后表现出明显的成骨活性,可作为骨组织工程的种子细胞。; 袁芳闫福华李厚轩赵欣林敏魁; 关键词：骨生成细胞增殖间质细胞

人骨形成蛋白-7基因转染犬骨髓基质细胞促进牙周组织再生的实验研究被引量：5: 2010年; 目的探讨人骨形成蛋白-7（Hbmp-7）基因修饰的骨髓基质细胞（BMSC）在牙周组织再生中的作用,为基因治疗与组织工程联合应用于牙周组织缺损再生治疗奠定基础.方法人工构建5只Beagle犬慢性Ⅱ度根分叉病变模型,将转染Hbmp-7基因的BMSCs与未转染BMSCs分别以1×107个/ml接种于胶原膜BME-10X,植入牙周缺损内,对照组仅植入胶原膜,12周后HE染色观察牙周组织再生情况.结果各实验组和对照组均可见不同程度的牙周组织再生,实验组新生牙槽骨面积百分比和新生牙骨质长度百分比与对照相比有明显增加（P〈0.05）;转染细胞复合胶原膜组新生牙槽骨面积百分比（81.8%±7.8%）与未转染细胞复合胶原膜组（67.3%±10.3%）相互比较差异有统计学意义（P〈0.05）;而其新生牙骨质长度百分比（79.1%±8.6%与75.6%±7.3%）比较差异无统计学意义（P〉0.05）.结论 Hbmp-7基因强化的组织工程技术是修复牙周组织缺损的一种较好的方法,有很好的临床应用前景.; 李艳芬闫福华钟泉赵欣; 关键词：牙周组织骨髓细胞基因疗法骨形成蛋白-7

hBMP-7基因转染的骨髓基质细胞与BME-10X胶原膜复合物的体外构建被引量：2: 2007年; 目的:观察人骨形成蛋白-7(hBMP-7)基因转染的骨髓基质细胞(BMSCs)与胶原膜BME-10X复合后,BMSCs在BME-10X上的生长状态。方法:利用脂质体介导法将hBMP-7基因转染Beagle犬BMSCs,传代与胶原膜BME-10X复合,荧光显微镜、扫描电镜、透射电镜观察。结果:转染细胞复合胶原膜后生长良好,24h细胞已贴附、伸展。透射电镜可见细胞与材料表面连接紧密,包膜部分增厚,形成类似半桥粒样结构。结论:hBMP-7基因转染BMSCs在胶原膜BME-10X上生长良好,hBMP-7基因转染的BMSCs与胶原膜复合物有望应用于牙周组织工程。; 闫福华江俊李艳芬赵欣钟泉骆凯; 关键词：骨形成蛋白-7 骨髓基质细胞胶原膜

含锶磷酸钙骨水门汀的理化性能和水化产物被引量：1: 2007年; 目的探讨用碳酸锶对α-磷酸钙骨水门汀系统进行改性后的理化性能和水化产物分析。方法在α-磷酸钙骨水门汀粉末中加入碳酸锶改性,考察其凝固时间、压缩强度、溶解率及pH值的变化,采用X射线衍射、红外光谱、扫描电镜分析其水化产物及表面形貌。结果添加适量的碳酸锶不会妨碍α-磷酸三钙(-αTCP)的水化进程,凝固时间适于临床操作,压缩强度和溶解率增大,水化反应后呈弱碱性,水化产物为含锶的缺钙型碳酸基HA。结论适量的碳酸锶可改善α-磷酸钙骨水门汀系统的理化性能,水化产物与天然骨组织的矿物相成分接近,可能有利于植入材料与骨的结合。; 郭永锦陈治清曾泉; 关键词：磷酸钙碳酸锶

转染人骨形成蛋白-7基因对骨髓基质细胞体外生物学活性的影响被引量：5: 2007年; 目的:观察hBMP-7基因转染对Beagle犬骨髓基质细胞(BMSC)生物学特性的影响。方法:利用脂质体介导法将hBMP-7基因转染Beagle犬BMSC,观察细胞形态及生长情况,检测碱性磷酸酶、骨钙素及钙化结节等成骨细胞表型。结果:目的基因转染后细胞形态略有变化,增殖能力无明显改变,凋亡率无明显变化,碱性磷酸酶活性明显增高,骨钙素表达增强,钙化结节增大。结论:hBMP-7基因转染可以加速BMSC向成骨细胞表型转化。hBMP-7基因转染的BMSC有望成为牙周组织工程理想的种子细胞。; 李艳芬闫福华赵欣; 关键词：骨形成蛋白-7 基因治疗骨髓基质细胞

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福建省自然科学基金(C0410024)