国家自然科学基金(39800164)
- 作品数：7 被引量：9H指数：2
- 相关作者：吴京于健胡志民王小宁林华洪更多>>
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- IL-2-PE40体外抑制γ-干扰素诱导的角膜内皮细胞MHC抗原表达的研究被引量：2
- 2007年
- 目的了解正常大鼠角膜内皮细胞在体外经γ-干扰素诱导后,主要组织相容性复合体(major histocompatibility complex,MHC)-Ⅰ、Ⅱ类抗原异常表达的情况,并观察比较白细胞介素-2-绿脓杆菌外毒素(interleukin-2-pseudomonas exotoxin40,IL-2-PE40)、环胞霉素A(cyclosporineA,CsA)对角膜内皮细胞MHC-Ⅰ、Ⅱ类抗原异常表达的免疫抑制作用。方法采用ACAS-570黏附式细胞分析仪和免疫荧光技术,对体外原代培养经γ-干扰素诱导后的正常大鼠角膜内皮细胞分成A、B2组进行MHC-Ⅰ、Ⅱ类抗原表达的相对量测定,并在培养液中加入新型免疫抑制剂IL-2-PE40和CsA,进一步测定角膜内皮细胞MHC-Ⅰ、Ⅱ类抗原的表达量。结果未加入γ-干扰素前,MHC-Ⅰ类抗原的表达量为97.8±8.1,MHC-Ⅱ类抗原无表达;经γ-干扰素诱导后,MHC-Ⅰ类抗原的表达量为1006.3±13.2,MHC-Ⅱ类抗原表达量为406.5±10.5,γ-干扰素加入前后MHC-Ⅰ、Ⅱ类抗原比较均有统计学意义(P<0.05)。IL-2-PE40组MHC-Ⅰ类抗原的表达量为618.2±13.5,MHC-Ⅱ类抗原表达量为204.5±7.8,CsA组MHC-Ⅰ类抗原的表达量为609.5±12.9,MHC-Ⅱ类抗原表达量为198.5±6.9,IL-2-PE40组、CsA组分别与注射用水比较,MHC-Ⅰ、Ⅱ类抗原间均有统计学意义(P<0.05)。IL-2-PE40组与CsA组比较,MHC-Ⅰ、Ⅱ类抗原间差异无统计学意义(P>0.05)。结论在体外,γ-干扰素可诱导角膜内皮细胞MHC-Ⅰ、Ⅱ类抗原异常表达;IL-2-PE40及CsA均能不同程度的抑制这种表达。
- 吴京于健胡志民
- 关键词：角膜移植组织相容性复合体免疫毒素
- IL-2-PE40抑制大鼠角膜上皮细胞MHC抗原表达的研究被引量：1
- 2002年
- 目的 了解正常大鼠角膜细胞在体外经 γ-干扰素诱导后 ,M HC- 、 类抗原异常表达的情况 ,并观察比较 IL- 2 -PE4 0、Cs A对角膜细胞 M HC- 、 类抗原异常表达的免疫抑制作用。方法 采用 ACA S- 570粘附式细胞分析仪和免疫荧光技术 ,对体外原代培养经γ-干扰素诱导后的正常大鼠角膜上皮细胞 M H C- 、 类抗原表达的相对量进行测定 ,并在培养液中加入新型免疫抑制剂 IL- 2 - PE4 0及 Cs A,进一步测定角膜细胞 MH C- 、 类抗原的表达量。结果 未加入 γ-干扰素 ,MH C- 类抗原的表达量为 98.1± 13 .9,MH C- 类抗原无表达 ,经 γ-干扰素诱导后 MH C- 类抗原的表达量为 10 0 6.1±2 6.2 ,MH C- 类抗原的表达量为 997.2± 2 3 .1,有显著性差异。 IL - 2 - PE4 0组 MH C- 类抗原表达量为 618.9± 2 1.3 ,M HC- 类抗原表达量为 691.3± 2 2 .1,Cs A组 MH C- 类抗原表达量为 62 3 .6± 2 2 .1,M HC- 类抗原表达量为 689.3± 2 5.0 ,两者分别与注射用水组比较 ,有显著性差异 ,两者之间比较差异不显著。结论 在体外 ,γ-干扰素可诱导角膜上皮细胞 MH C- 、 类抗原的异常表达 ;IL- 2 - PE4 0及 Cs A均能不同程度地抑制这种表达。
- 吴京黄发明王小宁
- 关键词：角膜移植
- 重组人白细胞介素2-绿脓杆菌外毒素融合蛋白的纯化及复性被引量：8
- 2002年
- 目的探讨该所发明的新方法对重组人白细胞介素2-绿脓杆菌外毒素(IL2-PE664Glu)融合蛋白进行纯化与复性的效果。方法采用该所发明的新方法提纯包涵体,包涵体复性后,样品经DEAE-SepharoseFF离子交换层析,获得融合蛋白纯品。结果获得的具有生物学活性的融合蛋白纯度达到95%,复性回收率为80%。结论此包涵体分离纯化技术简便、实用,可为中试研究和规模化生产提供基础。
- 胡志明林来兴妹周明乾陈泽洪王小宁
- 关键词：重组人白细胞介素-2绿脓杆菌外毒素融合蛋白纯化复性
- 两种免疫毒素抑制大鼠角膜内皮细胞MHC抗原表达的疗效比较被引量：2
- 2007年
- 目的了解正常大鼠角膜内皮细胞在体外经γ-干扰素诱导后,MHC-Ⅰ、Ⅱ类抗原异常表达的情况,并观察比较IL-2-PE66、IL-2-PE40对这种异常表达的免疫抑制作用。方法采用ACAS-570黏附式细胞分析仪和免疫荧光技术,对体外原代培养经γ-干扰素诱导的大鼠角膜内皮细胞进行MHC-Ⅰ、Ⅱ类抗原表达量的测定,并观察加入IL-2-PE66、IL-2-PE40后,MHC-Ⅰ、Ⅱ类抗原表达量的变化。结果未加入γ-干扰素前,MHC-Ⅰ类抗原的表达量为97.8±8.1、MHC-Ⅱ类抗原无表达;经γ-干扰素诱导后,MHC-Ⅰ类抗原的表达量为1006.3±13.2、MHC-Ⅱ类抗原表达量为406.5±10.5,γ-干扰素加入前后MHC-Ⅰ、Ⅱ类抗原比较差异均有统计学意义(P<0.01)。IL-2-PE66组MHC-Ⅰ类抗原的表达量为598.2±12.5、MHC-Ⅱ类抗原表达量为197.5±6.8,IL-2-PE40组MHC-Ⅰ类抗原的表达量为618.2±13.5、MHC-Ⅱ类抗原表达量为204.5±7.8,IL-2-PE66组、IL-2-PE40组分别与注射用水比较,MHC-Ⅰ、Ⅱ类抗原间差异均有统计学意义(P<0.05),IL-2-PE66组与IL-2-PE40组比较,MHC-Ⅰ、Ⅱ类抗原间差异无统计学意义(P>0.05)。结论IL-2-PE66及IL-2-PE40均能明显抑制大鼠角膜内皮细胞在体外经γ-干扰素诱导后,MHC-Ⅰ、Ⅱ类抗原的异常表达。提示2种免疫毒素IL-2-PE66、IL-2-PE40均是高特异性的强效免疫毒素,是未来抗角膜移植排斥的新型基因药物。
- 吴京于健林华洪胡志民
- 关键词：角膜移植组织相容性复合体免疫毒素
- 免疫毒素IL-2-PE66抑制小鼠角膜移植免疫排斥反应的研究
- 2009年
- 目的观察新型免疫抑制毒素白细胞介素-2-绿脓杆菌外毒素(interleukin-2-pseudomonas exotoxin 66,IL-2-PE66)对小鼠角膜移植排斥反应的免疫抑制疗效。方法建立小鼠同种异体穿透性角膜移植模型。36只鼠随机分为IL-2-PE66治疗组及生理盐水对照组,临床观察两组角膜植片免疫排斥反应发生的时间和程度,并在术前及术后第10、15、25、35天分别取出鼠眼行组织病理学检查,同时收集外周血行T淋巴细胞亚群及T淋巴细胞集落形成数分析。结果治疗组与对照组植片存活时间分别为(31.2±2.9)d和(15.8±2.1)d,术后第15天治疗组与对照组T淋巴细胞亚群CD4+/CD8+比率分别为(1.26±0.23)和(2.01±0.23),T淋巴细胞集落形成数分别为(201±18.2)和(286±16.8)。结论IL-2-PE66可推迟角膜移植排斥反应的发生时间;有明显减少外周血中辅助T淋巴细胞百分率的作用;并能减弱小鼠外周血T淋巴细胞集落形成能力。提示IL-2-PE66是一种高特异性的免疫抑制剂。
- 吴京于健
- 关键词：角膜移植免疫毒素移植物排斥小鼠
- IL-2-PE66(4GLU)抑制大鼠穿透性角膜移植排斥反应的研究
- [目的]以Wistar,SD大鼠正位穿透性角膜移植为动物模型,观察高特异性免疫抑制剂白细胞介素-2- 绿脓杆菌外毒素IL-2-PE66(4GLU)结膜下注射对角膜移植排斥反应的防治效果。
- 吴京于健陈钧胡志民王小宁
- 文献传递
- IL-2-PE66抑制大鼠角膜内皮细胞MHC抗原表达的研究被引量：3
- 2007年
- 目的了解正常大鼠角膜内皮细胞在体外经γ-干扰素诱导后,组织相容性复合体(MHC)-Ⅰ、Ⅱ类抗原异常表达的情况,并观察比较IL-2-PE66、环孢素A(CsA)对这种异常表达的免疫抑制作用。方法采用ACAS-570黏附式细胞分析仪和免疫荧光技术,对体外原代培养经γ-干扰素诱导的大鼠角膜内皮细胞进行MHC-Ⅰ、Ⅱ类抗原表达量的测定,并观察加入白细胞介素-2(IL-2)-PE66、CsA后,MHC-Ⅰ、Ⅱ类抗原表达量的变化。结果γ-干扰素能明显诱导大鼠角膜内皮细胞MHC-Ⅰ、Ⅱ类抗原异常表达,而IL-2-PE66、CsA能明显抑制这种异常表达,二者之间的免疫抑制效果无明显差异。结论IL-2-PE66及CsA均能明显抑制大鼠角膜内皮细胞在体外经γ-干扰素诱导后,MHC-Ⅰ、Ⅱ类抗原的异常表达。提示IL-2-PE66是一种高特异性的强效免疫毒素,是未来抗角膜移植排斥的新型基因药物。
- 吴京于健林华洪胡志民
- 关键词：角膜移植组织相容性复合体免疫毒素
- 白细胞介素2-绿脓杆菌外毒素抑制小鼠角膜移植后的排斥反应
- 2010年
- 目的观察白细胞介素2-绿脓杆菌外毒素（IL-2-PE40）对小鼠角膜移植排斥反应的抑制作用。方法以C57BL／6小鼠为供者，Balb／c小鼠为受者，制备小鼠同种异体穿透性角膜移植模型，治疗组受者于手术当天起腹腔注射IL2-PE40。用量为0．6ug／g，每12h1次，直至排斥反应发生；对照组相应时间点腹腔注射等体积生理盐水。术后每周在裂隙灯下观察移植角膜2次，根据Hori等的分级标准，对移植角膜混浊和新生血管进行分级，判断排斥反应发生情况，发生排斥反应时判定为移植角膜存活终止；并在术后第10、15、25、35天分别取术跟，行组织学观察，同时收集外周血，测定T淋巴细胞亚群及T淋巴细胞集落形成数。结果治疗组与对照组移植角膜存活时间分别为（30．2±2．9）d和（15．1±2．1）d，对照组于术后第15天出现排斥反应；术后对照组CD4^＋细胞开始升高，于第15天升高最为明显，达（63．9±4．0）％，随后下降，而治疗组CD4^＋细胞仅轻微上升，第15天为（42．6±4．0）％，明显低于对照组（P〈0．01）；术后2个组CD8^＋细胞变化不大；术后对照组T淋巴细胞集落形成数呈先升后降趋势，第15天上升最为明显，为（296±17）个，随后下降，而治疗组的变化不明显，第15天为（201±16）个，明显低于对照组（P〈（1．01）。结论IL-2-PF40可推迟角膜移植排斥反应的发生时间；能明显减少外周血中辅助性T淋巴细胞的作用，并能减弱小鼠外周血T淋巴细胞集落形成能力。
- 吴京于健
- 关键词：角膜移植免疫毒素移植物排斥小鼠
