国家自然科学基金(39800151)
- 作品数：27 被引量：226H指数：10
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- 相关机构：吉林大学第一医院吉林大学中日联谊医院中国医科大学更多>>
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- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 转染BMP-2基因的兔BMSCs种植PLA/PCL支架体外构建组织工程骨被引量：13
- 2004年
- 目的 :用腺病毒载体将人骨形态发生蛋白 2 (BMP 2 )基因导入兔骨髓基质干细胞 (BMSCs) ,种植PLA/PCL (聚乳酸 /聚己内酯 )支架体外构建组织工程骨。方法 :蛋白印迹法检测转染后细胞BMP 2的表达 ,流式细胞仪和ALP活性检测分析基因转染对细胞增殖分化的影响。然后将转染后细胞接种到PLA/PCL支架上 ,扫描电镜观察细胞贴附、生长状况。结果 :转染后 ,BMSCs表达BMP 2 ,S期细胞比例和ALP活性明显增高。扫描电镜见转染细胞分布均匀 ,伸展良好。结论 :BMP 2基因转染BMSCs ,可促进细胞增殖分化。转染后细胞在PLA/PCL支架上生长良好 ,BMP 2基因治疗的组织工程骨构建成功。
- 卜丽莎李建军高申杨绍娟张文岚崔亚南刘建国徐莘香
- 关键词：骨髓基质干细胞组织工程骨
- 腺病毒介导的骨形态发生蛋白2基因转染对成骨及血管化的影响被引量：21
- 2004年
- 目的 观察骨形态发生蛋白 2 (BMP 2 )基因转染人骨髓基质干细胞 (hBMSC)对诱导成骨及血管化的影响 方法 基因转染后 ,检则骨钙素、Ⅰ型胶原和血管内皮生长因子 (VEGF)的表达。并利用转染后的培养液上清诱导小鼠成纤维细胞 (L92 9)。然后将转染后细胞接种到PLA/PCL(聚乳酸 /聚己内酯 )支架上 ,然后扫描电镜观察。 结果 BMP 2基因转染后 ,可诱导hBMSC有L92 9骨钙素、Ⅰ型胶原呈阳性表达 ,VEGF的表达明显增高。转染细胞在支架中上生长良好 ,能量谱仪测得钙质分泌。蛋白印迹法检测到培养液中有BMP 2蛋白产生。 结论 BMP 2基因转染可诱导hBMSC成骨转化 ,且通过上调VEGF表达促进血管化 ,复合转染后细胞构建的组织工程骨对治疗骨缺损具有重要意义。
- 李建军韩冬刘建国孙鸿斌景元海卜丽莎张文岚王宏徐莘香
- 关键词：基因转染血管化成骨骨形态发生蛋白2BMSC鼠成纤维细胞
- 生物可降解活性材料修复兔桡骨缺损的实验研究被引量：13
- 2001年
- 目的 探讨用可降解多孔块状聚己内酯 (PCL )作为骨形态发生蛋白 (BMP)的载体 ,修复骨缺损的可行性。方法 采用兔桡骨骨缺损模型 ,用上述具有生物活性复合材料修复骨缺损 ,同时对照单纯 PCL及同种异体脱钙骨 ,经不同时间的 X线片、X线计量学、组织形态学及电镜观察 ,了解 PCL / BMP复合物的成骨作用。结果 PCL / BMP组不同时间新骨形成的量均优于单纯 PCL组 ,其骨缺损修复的方式和速度与同种异体脱钙骨较相似。电镜观察表明 ,PCL的降解过程与单纯 PCL组相比较 ,PCL / BMP组的降解速度较快 ,更符合骨缺损愈合的需要。结论 PCL是 BMP的良好载体 。
- 齐欣刘建国黄岚峰崔林徐莘香
- 关键词：骨缺损骨形态发生蛋白桡骨缺损修复术
- 骨形态发生蛋白2基因治疗与缓释载体修复骨缺损的比较研究被引量：8
- 2005年
- [目的]比较骨形态发生蛋白2(BMP-2)基因治疗与生长因子缓释方法修复节段性骨缺损效果。[方法]于兔双侧桡骨中段造成1·5cm骨缺损,采用4种方法修复:A组植入转基因骨髓间质干细胞(MSCs)与PLA/PCL(聚乳酸/聚己内酯)支架的复合物;B组植入单纯MSCs与含重组BMP-2的PLA/PCL缓释载体的复合物;C组植入单纯MSCs与PLA/PCL复合物;D组植入单纯PLA/PCL。术后4、8、12周行X线、组织学、生物力学和骨密度等检测。[结果]A组体内植入4周后,成骨细胞和间质细胞呈BMP-2强阳性表达;其成骨速度及成骨质量均明显优于B组,12周时骨缺损完全修复。C组成骨能力较弱,而D组则无新骨形成,残留骨缺损。[结论]BMP-2基因治疗是修复节段性骨缺损的好方法。
- 李建军傅永慧孙鸿斌韩冬王海义徐莘香
- 关键词：基因治疗骨形态发生蛋白2节段性骨缺损缓释载体体内植入
- 生物可降解支架协同纤维蛋白凝胶运载BMP-2基因修复节段性骨缺损被引量：1
- 2007年
- 将BMP-2腺病毒载体(Ad-BMP-2)与纤维蛋白凝胶混合后复合PLA／PCL(聚乳酸／聚己内酯)支架,移植修复骨缺损。于新西兰大耳白兔双侧桡骨中段造成1．5 cm骨缺损,采用四种方法进行处理:A组:Ad-BMP-2+纤维蛋白凝胶+PLA／PCL;B组:重组BMP-2+纤维蛋白凝胶+PLA／PCL;C组:对照基因(Ad-Lacz)+纤维蛋白凝胶+PLA／PCL;D组:纤维蛋白凝胶+PLA／PCL。结果表明,术后12周A组缺损区在成骨活跃程度、骨再生量和再生髓腔结构等方面均显著优于B组,其骨缺损得到了较彻底的修复。C、D两组均不能产生骨性愈合。PLA／PCL协同纤维蛋白凝胶运载BMP-2基因修复节段性骨缺损可达到较好的效果。
- 李建军王恩波孙鸿斌韩冬王欢白伦浩李雷刘学勇徐莘香
- 关键词：骨形态发生蛋白2
- 基因修饰的组织工程骨修复节段性骨缺损及相关免疫学研究被引量：3
- 2005年
- 目的观察骨形态发生蛋白-2(BMP-2)基因修饰的组织工程骨修复节段性骨缺损效果及异种骨支架体内应用的安全性。方法①制备去抗原牛松质骨块(BCB),植入小鼠股四头肌袋内,术后行淋巴细胞转化试验和组织学观察。②在腺病毒载体介导下将BMP-2基因导入兔骨髓间质干细胞后,种植到BCB支架中,构建基因修饰的组织工程骨。于兔双侧桡骨中段造成15mm骨缺损,采用5种方法进行处理BMP-2基因转染细胞+BCB(A组);未转染细胞+重组BMP-2+BCB(B组);对照基因转染细胞+BCB(C组);未转染细胞+BCB(D组);单纯BCB(E组)。术后4、8、12周行X线、组织学和生物力学检测。结果①BCB具有较低的抗原性和良好的组织相容性;②A组术后4周诱导生成软骨组织并向编织骨转化,12周骨缺损修复,髓腔再通,新骨强度明显优于其他各组(P<0.01)。结论BMP-2基因修饰的组织工程骨是修复节段性骨缺损的好方法。
- 李建军白伦浩王欢徐莘香
- 关键词：骨形态发生蛋白质类骨再生免疫学
- 转基因人骨髓间质干细胞在支架中增殖及矿化的研究被引量：1
- 2005年
- 目的:观察携带骨形态发生蛋白2基因(BMP-2)的人骨髓间质干细胞(hMSCs)在生物衍生骨支架环境中的增殖及矿化。方法:利用BMP-2腺病毒载体转染hMSCs后种植生物衍生骨支架中,扫描电镜观察细胞生长增殖,能量谱仪测定钙质分泌,RTPCR检测培养液上清中BMP-2表达。结果:转染后,hBMSC呈ALP、Ⅰ和Ⅱ型胶原阳性表达;细胞在支架中伸展良好,生长旺盛,并产生钙盐沉积;RTPCR显示培养液上清中存在BMP-2基因表达。结论:转染BMP2基因的hMSCs在生物衍生骨支架中能够立体生长、增殖,并继续表达目的基因,为基因修饰的组织工程骨修复骨缺损奠定了基础。
- 王欢李建军白伦浩徐莘香
- 关键词：腺病毒骨形态发生蛋白骨髓间质干细胞
- 转染骨形态发生蛋白-2基因的人骨髓间质干细胞复合异种骨支架异位成骨的效果被引量：26
- 2004年
- 目的 观察骨形态发生蛋白 - 2 (BMP - 2 )基因转染的人骨髓间质干细胞复合异种骨支架异位成骨效果。 方法 分组 :(1)BMP - 2基因转染细胞 +异种骨支架 [去抗原牛松质骨 (BCB) ];(2 )对照基因转染细胞 +BCB ;(3)未转染细胞 +重组BMP - 2 +BCB ;(4)未转染细胞+BCB ;(5 )BCB。分别将各组人工骨植入裸鼠皮下 ,于术后 4 ,8周行组织学观察。 结果 体内植入后 3d ,细胞持续表达外源基因。BMP - 2基因转染组 8周时完全由新形成的编织骨构成 ,血管丰富。 结论 BMP - 2基因转染后细胞复合BCB支架 ,可以在异位形成骨组织并诱导毛细血管长入。
- 李建军王文军韩冬景元海王宏王玲徐莘香
- 关键词：骨形态发生蛋白-2骨髓间质干细胞异位成骨骨生成BMP-2
- 三维多孔生物降解活性支架材料在骺软骨组织工程中的应用被引量：5
- 2001年
- 目的:探讨以生物活性可降解吸收材料聚己内酯/聚乳酸共聚物(PCL/PLA)为载体的兔骺软骨细胞体外培养的可行性,从而为开辟治疗骨骺早闭的新方法奠定基础。方法:应用具有三维多孔立体结构的生物活性可降解吸收支架材料为细胞外基质替代物,进行单纯骺软骨细胞体外培养及以生物材料为载体的体外降解实验,检测细胞生长情况。结果:兔骺软骨细胞生长良好,增殖活跃,合成大量软骨基质,并与材料形成细胞-材料复合体,细胞充满于材料孔隙内。结论:生物活性可降解吸收材料具有良好的组织相容性及表面活性,它所提供的三维立体空间结构有利于细胞生长繁殖。
- 刘建国徐执扬齐欣黄岚峰崔林徐莘香
- 关键词：细胞外基质骨形态发生蛋白
- 重组PCA13-hBMP2质粒构建Ad5-hBMP2腺病毒载体
- 2007年
- 目的:通过重组PCA13-hBMP2质粒构建Ad5-hBMP2腺病毒载体,并将其扩增纯化。方法:通过PCR技术获得hBMP2基因,酶切PCA13-MCMV质粒,连接PCA13-MCMV/EcoRⅠ+HindⅢ与hBMP2,获得PCA13-hBMP2质粒。将质粒PCA13-hBMP2与含有5型腺病毒右臂的质粒pBHGE3通过脂质体共转染至293细胞,提取腺病毒DNA,应用PCR、双酶切进行鉴定,扩增Ad5-hBMP2腺病毒载体,测定病毒滴度。Adv-hBMP2转染大鼠骨髓基质干细胞(BMSCs),测定不同时间hBMP2蛋白表达量。结果:成功构建PCA13-hBMP2质粒,通过同源重组成功获得Ad5-hBMP2腺病毒载体,扩增后测得病毒滴度为1.669×1010pfu.mL-1。Adv-hBMP2转染大鼠BMSCs后hBMP2蛋白表达量随时间延长明显增加(P<0.01)。结论:获得可表达hBMP-2的Ad5-hBMP2腺病毒载体,为基因辅助的骨组织工程技术提供安全有效的转基因载体。
- 姜涛李叔强刘建国
- 关键词：骨形态发生蛋白2腺病毒
