辽宁省博士科研启动基金(2001102061)
- 作品数：8 被引量：101H指数：6
- 相关作者：钟鸣张丽刘少霞徐正进陈罡更多>>
- 相关机构：沈阳农业大学辽宁省林业科学研究院更多>>
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- 一种水稻幼苗单株DNA的快速提取及PAGE银染改良法被引量：5
- 2006年
- 目的:为了提高SSR分子标记技术在水稻遗传育种中的研究效率,介绍一种快速的适于SSR-PCR扩增的水稻幼苗单株DNA提取法及PAGE银染法。方法:在常温下加入少量SDS提取液将单株叶片迅速捣碎,再加入300μLSDS提取液,65℃水浴10min后离心,取上清用乙醇沉淀后离心,超净工作台吹干后用100μLTE回溶即可。改进的PAGE银染法只需染色、冲洗、显影等3步,用乙醇和硝酸银作为染色液,去离子水快速冲洗1次后置显影液中即可显影。结果:本法可快速提取DNA,不须液氮研磨、氯仿抽提,提取的DNA经0.8%琼脂糖凝胶电泳检测表明质量较好,且扩增结果稳定可靠,满足了SSR-PCR的需要。改良的银染法与常规银染法的检出结果相同,但快速方便,整个过程只需10min,且背景较浅,灵敏度高。结论:快速提取法及PAGE银染改良法结合SSR分子标记技术,可有效地用于杂种后代的遗传连锁分析和分子标记辅助育种时的单株检测。
- 陈罡钟鸣徐正进张丽刘少霞李敏
- 关键词：水稻DNA提取聚丙烯酰胺凝胶电泳银染
- SSR标记及其在水稻抗稻瘟病研究中的应用被引量：6
- 2005年
- 稻瘟病是水稻的主要病害之一,抗病品种的选育是防治稻瘟病的主要途径。微卫星DNA分子标记(SSR)为辅助选育抗稻瘟病水稻新品种和抗性鉴定提供了新的思路。本研究介绍了SSR的原理和方法,并对其在水稻抗稻瘟病研究中的应用作了阐述,为揭示稻瘟病的分子遗传机理奠定了基础。
- 陈罡钟鸣徐正进
- 关键词：SSR分子标记稻瘟病
- 基于RAPD标记进行水稻籼粳分类研究被引量：32
- 2006年
- 应用RAPD标记方法对30个水稻栽培品种进行了籼粳分类研究。从80个随机引物中筛选出了扩增出具有多态性的谱带的18个引物,并从中选出重复性高、稳定性好的S1004,S1012,S1019,S1048,S1049,S1053,S1063,S1070,S1075共9个引物进行反应。依据随机引物对不同品种水稻总DNA扩增出的特异性扩增条带,用Ne i’s公式计算30个水稻品种间的相似系数,并以UPMGA法进行聚类分析,其结果与品种系谱基本吻合,证明RAPD标记可应用于水稻的分类。
- 姜树坤钟鸣徐正进张丽马慧刘少霞
- 关键词：水稻籼粳分类随机扩增多态性DNA
- 水稻相关序列扩增多态性反应体系的建立及其多态性位点在F_2群体中的分离分析被引量：7
- 2007年
- 建立了一套完整、稳定、高效的水稻相关序列扩增多态性(SRAP)反应体系,同时利用110对SRAP引物对水稻品种沈农606和丽江新团黑谷进行比较扩增,其中35对引物可以检测到多态性,约占所用引物的31.82%。用该35对引物进一步对上述两个品种配制的杂交后代的F2进行检测,共扩增出1683条带,平均每对引物48条带,其中多态性条带143条,平均每对引物4.09条多态性条带。有24个多态性位点在F2群体中的分离显著或极显著地偏离了理论比值而表现异常分离,比率为16.78%。这些偏分离位点中偏向沈农606基因型的有11个;偏向丽江新团黑谷基因型的有12个;仅有1个偏杂合体类型。卡方检验说明,标记位点的偏分离是配子体和合子体选择共同作用的结果。
- 姜树坤钟鸣徐正进张丽张喜娟马慧陈丽静郭志富
- 关键词：水稻相关序列扩增多态性扩增体系偏分离
- 甜菜碱合成途径及其在基因工程育种中的应用被引量：5
- 2006年
- 在不良的环境胁迫条件下许多生物体内大量积累甜菜碱,甜菜碱是一种小分子渗透调节物质,它可以调节细胞渗透势,保护蛋白质结构和代谢酶类。由于甜菜碱的合成途径相对简单,通过基因工程技术将甜菜碱生物合成途径导入到不能自身合成渗透调节物并对胁迫条件敏感的重要农作物中,赋予其合成甜菜碱的能力,最终提高其抗性,已经成为当今抗逆育种的重要手段之一,并取得了一定的成绩。不同生物体内甜菜碱的合成途径、催化酶类、反应底物有所不同。在高等植物体、大肠杆菌和土壤细菌中,甜菜碱以胆碱为直接底物,经一或两步氧化而成。其底物胆碱来自于生物体内丝氨酸衍生物的甲基化。反应涉及的相关酶类和基因已经获得,该途径的基因工程研究也在一定程度上提高了转化株的抗性,但底物限制问题没有得到解决。嗜盐隐杆藻中存在另一条完全不同的途径,以甘氨酸为底物由2个不同的甲基转移酶催化完成几个连续的甲基化反应生成甜菜碱,该途径不存在底物限制。本文全面地介绍了不同生物体中甜菜碱合成途径、相关酶类基因及各途径在植物抗逆育种中的应用现状的同时总结了个别途径应用中存在的问题,并提出了可行的解决方案。
- 杨铮钟鸣张丽
- 关键词：甜菜碱胁迫基因工程
- SSR标记及其在水稻抗稻瘟病研究中的应用
- 稻瘟病是水稻的主要病害之一,抗病品种的选育是防治稻瘟病的主要途径。微卫星DNA分子标记（SSR）为辅助选育抗稻瘟病水稻新品种和抗性鉴定提供了新的思路。本研究介绍了SSR的原理和方法,并对其在水稻抗稻瘟病研究中的应用作了阐...
- 陈罡钟鸣徐正进
- 关键词：SSR分子标记稻瘟病
- 文献传递
- 辽宁省近15年的部分水稻主栽品种的简单重复序列(SSR)多态性分析被引量：27
- 2007年
- 应用简单重复序列(SSR)标记方法对辽宁省近15年的14个大面积种植的水稻品种进行遗传多样性分析的结果表明,17对引物共产生43个位点,其中多态性位点17个,平均每对SSR引物检测到2.53个,占位点总数的39.53%。用Nei’s公式计算水稻品种间的遗传距离,并以算术平均非加权聚类(UPGMA)法进行聚类分析并结合系谱分析结果表明,辽宁省近15年的水稻主栽品种遗传多样性不够丰富,多数品种间的亲缘关系较近,欲进一步提高产量还需拓宽遗传基础。
- 姜树坤王政海钟鸣张丽徐正进刘少霞
- 关键词：水稻SSR标记多态性
- 盐胁迫下朝鲜碱茅的甜菜碱醛脱氢酶活性变化及其基因保守区的克隆被引量：8
- 2007年
- 文章探讨了朝鲜碱茅甜菜碱醛脱氢酶活性在盐胁迫下的变化,用简并引物扩增了甜菜碱醛脱氢酶基因保守区序列的结果表明,该保守区段长438 bp,推测编码145个氨基酸,包括醛脱氢酶高度保守序列V[T/S]LELGGKSP和其后29位与酶功能有关的Cys。此序列Genbank登录号为EF095710。
- 杨铮钟鸣郭志富李丽陈罡
- 关键词：朝鲜碱茅盐胁迫
- 稻瘟病菌粗毒素的致病力测定及其对水稻幼苗生理生化的影响被引量：16
- 2006年
- 本实验用不同浓度的稻瘟病菌粗毒素处理沈农265和辽粳294幼苗,分别对其进行致病力测定,并对其防御酶系、可溶性蛋白、同工酶标记进行了测定分析。结果表明在山口富夫培养液中培养12 d时提取的粗毒素毒性最强,并且对水稻种子萌发,种子胚根、胚芽都有明显的抑制作用;不同浓度毒素对水稻幼苗的POD、SOD,可溶性蛋白均具有一定的诱导作用;同工酶检测表明,粗毒素处理的幼苗POD酶带有明显的变化,而EST没有明显的改变。
- 陈罡钟鸣侯玉柱刘志恒马惠刘少霞
- 关键词：水稻防御酶系可溶性蛋白同工酶
