公共文化服务平台

共 2 条记录，以下是 1-2

全选清除导出

排序方式：

B型流感病毒B/Guangzhou/01/2007株HA基因重组3型腺病毒的构建: 2009年; 目的:构建包含有B型流感病毒B/Guangzhou/01/2007株血凝素(HA)基因的重组3型腺病毒。方法:用PCR方法扩增得到HA基因,酶切后克隆至3型腺病毒穿梭质粒pSK-CMV,构建重组穿梭质粒pSK-CMV-HA,然后在大肠杆菌BJ5183内进行经NotI和EcoRV线性化的pSK-CMV-HA和经RsrⅡ线性化的骨架质粒pBRAdV3△E3的同源重组,AsiSI酶切线性化重组腺病毒质粒pBRAdV3△E3-HA后脂质体法转染HEp-2细胞,进行病毒包装和增殖后得到重组腺病毒rAdV3△E3-HA,并且通过病变观察、扫描电镜、RT-PCR、免疫细胞化学方法对基因组的包装和HA基因的表达进行检测。结果:将HA基因克隆入pSK-CMV获得重组穿梭质粒pSK-CMV-HA,线性化的pSK-CMV-HA与pBRAdV3△E3同源重组后获得pBRAdV3△E3-HA,线性化的pBRAdV3△E3-HA转染HEp-2细胞观察到细胞病变和HA基因的表达。结论:成功构建了带有HA基因的重组腺病毒rAdV3△E3-HA,为B型流感病毒-3型腺病毒二联活苗的研究提供了依据。; 鲁俊鹏田新贵罗满林李海涛周志超周荣; 关键词：B型流感病毒 HA基因重组腺病毒

诺如病毒衣壳蛋白重组人3型腺病毒的构建: 2008年; 目的制备表达诺如病毒衣壳蛋白的重组人3型腺病毒。方法将诺如病毒衣壳蛋白基因（Noro-orf2）克隆到腺病毒穿梭载体pBSE3CMV-esfp上，与线性化人3型腺病毒骨架质粒pBRAdv3共电转化感受态大肠杆菌BJ5183，使其在细菌内发生同源重组，带Noro—orf2基因的表达框置换腺病毒E3区，PCR及酶切筛选得到重组腺病毒质粒，将重组腺病毒质粒转染Hep-2细胞进行包装，获得感染性的重组腺病毒粒子，免疫组化分析重组腺病毒中诺如病毒衣壳蛋白的表达。结果同源重组后经酶切和PCR鉴定证明插入Noro—orf2基因的重组腺病毒质粒pBRAdv3E3dNor成功构建，并经转染包装得到高滴度的重组腺病毒Adv3E3dNor，免疫组化证明诺如病毒衣壳蛋白得到表达。结论成功构建表达诺如病毒衣壳蛋白的重组3型腺病毒Adv3E3dNor，为研制人3型腺病毒-诺如病毒双价疫苗奠定了基础。; 田新贵周荣李海涛龚四堂张其威朱冰盛慧英钟家禹; 关键词：同源重组

全选清除导出

共1页<1>

国家自然科学基金(30770102)