广东省科技攻关计划([2001]382)
- 作品数：2 被引量：16H指数：2
- 相关作者：鄢志强陈庆华王林川王春霞王政更多>>
- 相关机构：华南农业大学更多>>
- 发文基金：广东省科技攻关计划更多>>
- 相关领域：农业科学生物学化学工程更多>>
- 番鸭IFN-α基因在毕赤酵母中的分泌表达被引量：7
- 2003年
- 利用PCR从质粒pGEM TEasy/MDIFN扩增出番鸭IFN α基因cDNA ,将其插入到含AOX1启动子和α分泌信号肽序列的Pichiapastoris表达载体pPICZαC 3.6kb中 ,测序 ,待其结果正确后 ,将重组质粒转化至酵母X 33,PCR法筛选出Mut+ 表型的转化子置于BMMY培养基中培养。用 5mL/L甲醇诱导表达 4d后 ,经SDS PAGE分析可见 1条约 2 5ku的清晰蛋白条带。试验结果表明pPICZαC3.6kb/MDIFN质粒构建成功 。
- 王春霞王林川鄢志强陈庆华王政
- 关键词：番鸭毕赤酵母基因表达干扰素基因工程
- 番鸭IFN-α基因的克隆与序列分析被引量：10
- 2002年
- 从经免疫的番鸭外周血分离淋巴细胞 ,经PHA刺激培养后提取总RNA ,采用RT PCR的方法 ,按照GenBank中序列号为X84 76 4鸭I型IFN(DIFN1)基因设计引物 ,成功扩增出番鸭IFN基因 ,命名为MDIFN α ,包含编码MDIFN α成熟蛋白全部核苷酸序列 .DIFN1开放阅读框架 (ORF)有 5 76个核苷酸 ,编码 191个氨基酸 ,其中切除信号肽的IFN α为成熟DIFN1,共有 4 86个核苷酸组成 ,编码 16 1个氨基酸 .MDIFN α(含有不完整的信号肽 )与X84 76 4的核苷酸同源性为 97 7% ,推导氨基酸同源性为 95 7% .结果显示 ,MDIFN α可能为鸭I型IFN一个新的亚型 .
- 王春霞王林川黄爱芳王庆鄢志强陈庆华
- 关键词：番鸭克隆
