国家自然科学基金(81072120)
- 作品数：6 被引量：11H指数：2
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- 相关机构：重庆医科大学附属第一医院重庆医科大学附属永川医院重庆医科大学更多>>
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- Rap1蛋白在卵巢浆液性癌组织中的表达及抑制细胞增殖的研究
- 2013年
- 目的探讨卵巢浆液性癌组织中Rap1蛋白表达及其在浆液性癌细胞增殖中的作用。方法 Western blot检测并比较Rap1在浆液性卵巢癌组织、卵巢良性组织和正常卵巢组织中的表达;应用RNA干扰技术构建3个Rapl shRNA真核表达载体,将3个重组质粒、空质粒、阴性质粒分别转染进卵巢癌细胞株SKOV3,通过Western blot对重组质粒进行有效性筛选,G418筛选建立SKOV3-Rap1-RNAi稳定转染细胞株;MTT法检测Rap1表达缺失的SKOV3细胞增殖能力的变化。结果与卵巢良性组织和正常卵巢组织相比,浆液性卵巢癌组织中Rap1呈现高表达(P<0.05)。经双酶切和DNA测序证实成功构建了3个重组质粒pSUPER.retro.neo/GFP-Rap1i-#1,-Rap1i-#2及-Rap1i-#3;瞬时转染提示上述3个质粒的Rap1抑制效率分别是50%、66%、19%,遂最终采用pSUPER.retro.neo/GFP-Rap1i-#2转染并用G418筛选出单克隆细胞Rap1i-1和Rap1i-2,其Rap1蛋白抑制率分别为70%和48%,选取Rap1i-1细胞进一步检测Rap1表达缺失的SKOV3细胞增殖能力的变化,发现其增殖能力较对照组更强(P<0.05)。结论 Rap1蛋白在卵巢浆液性癌组织中呈高表达并抑制细胞增殖。
- 肖正华高一萌彭慧娟张瑜罗淑娟令狐华
- 关键词：浆液性卵巢癌肿瘤增殖
- 顺铂联合紫杉醇分次给药抑制卵巢癌细胞SKOV3的种群恢复
- 2014年
- 目的:比较顺铂(cisplatin,CDDP)与紫杉醇(paclitaxel,PTX)不同的给药方案对卵巢癌细胞种群恢复的影响。方法:(1)CDDP、PTX或CDDP联合PTX分别于第1天(D1)或D1及D8处理卵巢癌SKOV3细胞;(2)倒置显微镜观察不同处理组中,SKOV3细胞凋亡与种群恢复的情况;(3)CCK-8法分别测定不同处理组在D7和D21时SKOV3细胞的吸光度(absorbance,A)值。结果:(1)单用CDDP组中,单次给药组与分次给药组相比较,二者对SKOV3细胞的凋亡与种群恢复的影响无明显差异(P=0.970);(2)单用PTX组中,与单次给药组相比,分次给药组明显抑制了SKOV3细胞的种群恢复(P=0.000);(3)CDDP联合PTX组中,分次给药组较单次给药组对SKOV3细胞的种群恢复明显抑制(P=0.000),并且在分次给药组中,CDDP联合PTX组较单用PTX组明显抑制SKOV3细胞的种群恢复(P=0.000)。结论:CDDP联合PTX分次给药较单次给药可能通过抑制卵巢癌细胞的种群恢复从而抑制卵巢癌的耐药或复发。
- 何欢李雪梅成敏令狐华
- 关键词：紫杉醇单次给药分次给药SKOV3
- Rap1酶激动剂C3G对Ⅰ型卵巢癌细胞增殖和侵袭的影响被引量：2
- 2015年
- 目的探讨Rap1酶激动剂鸟苷酸交换因子(Crk SH3-domain-binding guanine nucleotidereleasing factor,C3G)对Ⅰ型卵巢癌恶性增殖及侵袭能力的影响。方法 Western blot分别检测Ⅰ型和Ⅱ型人卵巢癌组织中C3G蛋白的表达水平;利用Ⅰ型卵巢癌细胞株OVAR3,构建外源性过表达C3G蛋白的细胞株,通过MTT、平板克隆、流式细胞学实验检测细胞的增殖和凋亡情况;Transwell检测细胞迁移、侵袭能力;Western blot检测细胞MMP-2、MMP-9的表达。结果Ⅰ型卵巢癌组织中C3G表达(0.377 6±0.083 1)与良性卵巢肿瘤(0.351 1±0.071 3)及正常对照类似,明显低于Ⅱ型卵巢癌组织[(0.873 5±0.174 6),P<0.05]。低转移潜能卵巢癌细胞株OVAR3在外源表达C3G后表现出增殖减慢(P<0.05,P<0.01),凋亡增加(P<0.05),但迁移和侵袭能力增强(P<0.05),MMP-2、MMP-9表达增高(P<0.05)。结论 C3G蛋白有抑制增殖和促进侵袭作用,其在Ⅰ型卵巢癌组织中的低表达与其低转移潜能和膨胀型生长模式相关。
- 李雪梅罗淑娟车亚玲令狐华
- 关键词：OVCAR3增殖
- Ras和Sos1蛋白在上皮性卵巢恶性肿瘤组织中的表达及临床意义被引量：6
- 2016年
- 目的检测Ras和Sos1蛋白在上皮性卵巢恶性肿瘤中的表达,分析两种蛋白表达水平与上皮性卵巢恶性肿瘤临床病理指标的相关性。方法利用免疫组织化学SABC法检测62例上皮性卵巢恶性肿瘤组织、5例交界性上皮性卵巢肿瘤、15例卵巢上皮性囊腺瘤、18例正常卵巢组织中Ras与Sos1蛋白的表达情况,统计学分析两种蛋白表达水平与肿瘤恶性程度指标的相关性。结果 (1)Ras和Sos1在上皮性卵巢恶性肿瘤组织中的表达水平显著(P<0.05)高于在其它组织中的表达;(2)两种蛋白在上皮性卵巢恶性肿瘤细胞中的表达部位均以细胞膜和细胞浆同时表达为主;(3)Ras的表达程度(光密度值)与病理分型有相关性(P<0.05):其在浆液性卵巢癌的表达比在其他病理类型的表达更为显著,而Sos1蛋白表达与这些病理参数无相关性;(4)两种蛋白表达程度高的患者无瘤生存时间短,但不具有显著性。结论 Ras、Sos1这两种蛋白与上皮性卵巢恶性肿瘤的发生和发展可能存在内在联系;Ras蛋白的表达存在组织类型的差异,可用来支持卵巢浆液性腺癌的特异性诊断;统计学分析显示,两种蛋白表达程度高的患者,无瘤生存时间较低表达患者更短,但可能由于病例数较少有关,该结果不具备显著性,这需要扩大样本量进一步研究。
- 肖正华令狐华刘倩芬
- 关键词：RAS
- C3G在卵巢癌组织中的表达及其在SKOV3细胞增殖中的作用被引量：3
- 2013年
- 目的探讨鸟苷酸交换因子C3G(Crk SH3-domain-binding guanine nucleotide-releasing factor)在卵巢癌组织中的表达及在卵巢癌SKOV3细胞增殖中的作用。方法采用Western blot检测比较40例卵巢癌、8例卵巢良性肿瘤及4例正常卵巢组织中C3G的表达水平。应用特异性siRNA下调SKOV3细胞中C3G的表达,通过MTT法和平板克隆实验检测细胞增殖,建立裸鼠皮下种植瘤模型观察移植瘤生长情况。结果卵巢癌组织中C3G的表达显著高于卵巢良性肿瘤及正常卵巢组织,其在卵巢癌、卵巢良性肿瘤分别是正常卵巢组织中的(1.832±0.200)(P<0.05)、(0.893±0.147)倍。siRNA干扰可使SKOV3细胞中内源性C3G的表达下调79.2%;与野生型细胞组、阴性对照组及空载体对照组相比,C3G干扰组细胞增殖变慢(P<0.05),克隆形成率下降(P<0.05),移植瘤的平均体积和质量显著下降(P<0.05)。结论鸟苷酸交换因子C3G在大多数上皮性卵巢癌中过表达,并促进卵巢癌细胞增殖。
- 罗淑娟车亚玲彭慧娟张瑜高一萌刘斌令狐华
- 关键词：卵巢癌增殖
- 舒胸舌下片制备与促透剂的配方被引量：1
- 2014年
- 目的优选舒胸舌下片辅料配方和舌下黏膜促透剂配方。方法按正交实验设计,优选乳糖、甘露醇、微晶纤维素最佳比例;采用Frank扩散池进行体外扩散实验,HPLC测定人参皂苷Rg1的累积透膜量,按星点设计-效应面法设计实验,优选氮酮、油酸和薄荷醇的最佳比例。结果舌下片最佳制备工艺为药材提取物-〔乳糖-甘露醇(1∶9)〕-微晶纤维素为6∶8∶0.5加2%的氮酮、2%的油酸、5%薄荷醇复合促透剂制片。结论舒胸舌下片辅料配方能保证片剂的性状参数,复合黏膜促透作用稳定。
- 盛芳芳林於刘新
- 关键词：人参皂苷RG1星点设计-效应面法
