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猪圆环病毒2型福建分离株ORF2基因遗传变异分析被引量：2: 2015年; 为了解福建部分地区感染猪圆环病毒2型（PCV2）的基因型及遗传变异情况,采集了9份来自福建4个地区临床疑似PMWS仔猪肺、肾、淋巴结组织,病毒核酸提取后用PCV2ORF2特异引物进行PCR扩增、凝胶电泳,鉴定5份阳性样品,阳性率55.6%,回收、纯化阳性条带后送生物公司测序。Base by Base软件分析发现5份阳性样品ORF2的变异程度很小,主要是1～7个碱基点突变,有1处2个碱基连续突变,没有插入或缺失突变,同源性为98.91%～99.84%。进化树分析显示5份阳性样品都属于Group 1群（PCV2b型）中的1A/1B亚型,表明来自不同地区的样品之间变异较小。结合GenBank中已收录的所有福建18株PCV2ORF2序列进行分析,发现PCV2b基因型占95.6%,其中1A/1B亚型占72.7%,1C亚型占27.3%,结果表明PCV2b基因型中的1A/1B亚型在福建地区广泛流行并占主导地位。研究结果对本地区选择相匹配的疫苗进行有效防控具有重要意义。; 曾显成陈景杰林群群池雪林吴异健吴宝成谢宝贵; 关键词：PMWS ORF2基因

猴头菇多糖对呼肠孤病毒感染番鸭肠道黏膜免疫及抗氧化能力的影响被引量：18: 2015年; 旨在研究猴头菇多糖对感染番鸭呼肠孤病毒(MDRV)雏鸭肠道黏膜免疫和抗氧化能力的影响。通过建立模拟MDRV自然感染发病模型,将200只1日龄健康雏番鸭随机分为空白对照组、猴头菇多糖对照组、同居感染对照组和猴头菇多糖预防组。各试验组番鸭在同居感染后第1、3、6、10、15、21天,采集样品测定各指标。结果显示,猴头菇多糖能够不同程度促进感染呼肠孤病毒雏番鸭肠道SIgA、IFN-γ、IL-4的分泌,具有维持肠道黏膜免疫平衡的作用;且显著(P<0.05)提高SOD活性和GSH含量,降低了MDA含量,具有提高机体抗氧化酶活性、清除体内自由基、抑制脂质过氧化的作用。结果表明,猴头菇多糖对雏番鸭肠道黏膜免疫具有较显著的调节作用,且能提高机体抗氧化能力,有效减轻呼肠孤病毒对其肠道屏障功能的损伤。; 黄丽娜姜慧慧王洁高婷高婷吴宝成吴宝成黄一帆; 关键词：番鸭呼肠孤病毒黏膜免疫抗氧化能力

猴头菇多糖对呼肠孤病毒感染番鸭肠道黏膜免疫及抗氧化能力的影响: [目的]本试验旨在研究猴头菇多糖对感染番鸭呼肠孤病毒(Muscovy Duck Reovirus,MDRV)雏鸭肠道黏膜免疫和抗氧化能力的影响。[方法]通过建立模拟MDRV自然感染发病模型,将200只1日龄健康雏番鸭随机...; 黄丽娜姜慧慧王洁高婷张叶飞吴宝成吴异健黄一帆; 关键词：番鸭呼肠孤病毒黏膜免疫抗氧化能力; 文献传递

猴头菇多糖对MDRV感染番鸭病死率及肠道形态结构的影响: 研究不同剂量的猴头菇多糖(HPS)对番鸭感染番鸭呼肠孤病毒(MDRV)后病死率及肠道形态结构的影响。试验通过建立MDRV自然感染发病模型,HPS预防给药,给药剂量分别为0.1g/L、0.2g/L、0.4g/L,试验期25...; 姜慧慧黄丽娜吴宝成李健吴异健黄一帆; 关键词：番鸭呼肠孤病毒病死率肠道形态结构; 文献传递

猴头菇多糖对MDRV感染番鸭病死率及肠道形态结构的影响被引量：8: 2015年; 为研究不同剂量的猴头菇多糖(HPS)对番鸭感染番鸭呼肠孤病毒(MDRV)后病死率及肠道形态结构的影响,试验通过建立MDRV自然感染发病模型,采用HPS预防给药,给药剂量分别为0.1 g/L、0.2 g/L、0.4 g/L,试验期25 d。结果表明:给药组试验番鸭感染MDRV后该病潜伏期延长、发病临床症状减轻、病死率下降,中剂量(0.2 g/L)HPS效果最明显;MDRV感染后,番鸭十二指肠、空肠和回肠的绒毛高度、绒腺比值(V/C值)、肠壁厚度、绒毛宽度、绒毛表面积均低于空白对照组(P<0.01);而给药组上述指均标高于同居感染对照组(P<0.01),其中中剂量HPS组提高最明显。由此可见,在饮水中添加不同剂量的HPS均可缓解MDRV感染的临床症状,保护消化道形态结构,降低感染番鸭的病死率,且以中剂量(0.2 g/L)HPS效果最好。; 姜慧慧黄丽娜吴宝成李健吴异健黄一帆; 关键词：番鸭呼肠孤病毒病死率肠道形态

番鸭呼肠孤病毒σA蛋白的原核表达及其多克隆抗体的制备被引量：6: 2016年; 为实现番鸭呼肠孤病毒（MDRV）σA蛋白的原核表达及其多克隆抗体的制备,采用RT-PCR扩增了MDRV-YB株σA基因的完整编码序列（CDS）,双酶切并连接至表达载体p ET-32a（＋）中,将重组表达质粒转化大肠杆菌BL21（DE3）,IPTG诱导蛋白表达,并对表达产物进行SDS-PAGE分析;随后对重组σA蛋白进行Ni2＋柱亲和层析纯化,用Western-blot鉴定纯化后重组蛋白的活性;最后以纯化后的包涵体蛋白为抗原免疫新西兰兔,制备多克隆抗体,并用ELISA法检测其效价,Western-blot鉴定其特异性。SDS-PAGE分析表明,成功表达出分子质量约为64.2 ku的融合蛋白,且主要以包涵体形式存在;其IPTG诱导最佳时间、浓度和温度分别为6 h、1.2 mmol/L和24~27℃;经Ni2＋柱纯化获得了高纯度重组σA蛋白;Western-blot结果显示,纯化前、后的重组蛋白均可以与MDRV阳性血清发生特异性识别,说明纯化后的重组σA蛋白依然保留良好的反应原性;ELISA测得多抗血清的效价大于1∶32 000,Western-blot鉴定进一步证实制备的多克隆抗体可与重组σA蛋白发生特异性反应,为MDRVσA蛋白生物学功能研究奠定了基础。; 吕小婷廖加磊孙雪宁胡万荣朱二鹏吴异健吴宝成; 关键词：番鸭呼肠孤病毒原核表达多克隆抗体

黄芪多糖对番鸭呼肠孤病毒感染番鸭的细胞因子水平的影响被引量：9: 2015年; 为研究黄芪多糖(APS)抗番鸭呼肠孤病毒(MDRV)感染和免疫调节的机理,用建立的MDRV自然感染番鸭发病模型,进行了APS防治MDRV同居感染试验和临床(健康无病毒感染)用药验证试验。结果显示,在感染中期,MDRV能促进同居感染对照组番鸭机体IL-1、IL-2、IL-6、TNF-α的分泌,抑制IL-4的分泌;与同居感染对照组相比,0.4g/L APS预防用药能延迟MDRV同居感染番鸭出现症状的时间,减轻临床症状和病理变化,显著降低死亡率;APS使MDRV感染番鸭血清中IL-1、IL-2、IL-4、IL-6、TNF-α水平维持在正常范围内;维持MDRV感染番鸭和健康番鸭血清IL-1、IL-2、IL-4、IL-6、TNF-α水平处于动态平衡,对机体的免疫具有双向调节作用。上述研究结果为APS临床防治MDRV感染提供了依据。; 江锦秀黄丽娜姜慧慧方静厉冬彬程兴吴异健吴宝成; 关键词：番鸭呼肠孤病毒黄芪多糖预防性用药

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福建省自然科学基金(2012J01067)