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侵袭性念珠菌病与触珠蛋白基因多态性的相关性研究: 2016年; 目的：检测侵袭性念珠菌病（invasive candidiasis, IC）患者血清中触珠蛋白（haptogliobin,Hp）的含量和表型分布情况,分析 Hp 基因多态性与 IC 的相关性。方法用免疫比浊法分析41例 IC 患者和60例对照者血清中 Hp 的含量,同时用聚丙烯酰胺（PAGE）凝胶电泳法分析两组受试者血清中 Hp 的表型分布情况。结果 IC 组的血清 Hp 含量显著高于对照组（t =5.564,P 〈0.05）；IC 组的 Hp1-1和 Hp2-1表型分布与对照组间差异无统计学意义（χ2=0.092、0.059,P 〉0.05）,而在 Hp2-2表型分布明显高于对照组,差异有统计学意义（χ2=10.800,P 〈0.05）。结论带有 Hp2-2表型的人群可能对 IC 有遗传易感性,其血清 Hp 含量增高可能在 IC 发病中起一定作用。; 陈晶贺政新李玮赵会海侯天文; 关键词：念珠菌病基因多态性

用系统性念珠菌感染小鼠模型评价白念珠菌蛋白Eno1、Bgl2、Pgk1的免疫反应性被引量：1: 2015年; 目的用系统性念珠菌感染小鼠模型评价白念珠菌蛋白烯醇化酶1（Eno1）、β-葡萄糖苷酶2（Bgl2）、磷酸甘油激酶1（Pgk1）的免疫反应性。方法腹腔注射环磷酰胺致小鼠免疫力低下后,再腹腔注射白念珠菌SC5314以制备系统性念珠菌感染小鼠模型;用ELISA法和western blot法分析重组Eno1、Bgl2和Pgk1蛋白与模型小鼠血清抗体的免疫反应性。结果建模小鼠肠系膜边缘有米黄色细小颗粒,腹腔中有菌丝样生长的念珠菌,肾脏中可检测到念珠菌生长。小鼠感染白念珠菌6-8 d后出现抗Eno1、抗Bgl2和抗Pgk1的Ig G类抗体,效价峰值出现在感染后第20-24天。抗Eno1抗体效价最高,其次为抗Pgk1,抗Bgl2最低。Eno1与小鼠血清免疫反应性最强,Bgl2免疫反应性较弱。结论念珠菌可有效刺激小鼠产生抗Eno1、抗Bgl2和抗Pgk1的Ig G类抗体。重组Eno1蛋白免疫反应性最强,可用于后续研究。; 贺政新陈晶王宪灵冉向阳安黎云曾倩侯天文; 关键词：白念珠菌免疫反应性

流式细胞术检测全血白细胞吞噬白念珠菌方法的建立和应用被引量：3: 2015年; 目的建立全血白细胞吞噬白念珠菌的流式细胞术检测方法。方法绘制白念珠菌生长曲线后,取生长对数中期的白念珠菌,以活体细胞示踪荧光探针二乙酰羧基荧光黄琥珀酰亚胺酯（CFDA-SE）标记,与以PC5标记的CD45单克隆抗体预标记的全血白细胞,在37℃分别反应10、30、60min（MOI≈10∶1）,以流式细胞术观察CD45阳性细胞对白念珠菌的吞噬情况。结果白念珠菌在液体酵母浸出粉胨葡萄糖培养基（YPD）中37℃、50mL/LCO2培养,第5~11h为对数生长期。10mmol/LCFDA-SE染色30min,可使白念珠菌均匀着色;CD45阳性细胞和标记的白念珠菌作用10、30、60min,CD45阳性细胞中中性粒细胞的吞噬率分别为（80.1±6.1）%、（83.8±7.7）%和（92.3±11.2）%;单核细胞的吞噬率为（11.2±3.6）%、（15.8±4.4）%和（27.7±6.8）%,淋巴细胞作为无明显吞噬作用内参,其吞噬率为（0.9±0.3）%、（0.8±0.4）%和（5.2±1.6）%。结论成功建立流式细胞术检测全血白细胞吞噬白念珠菌的方法,全血白细胞与白念珠菌共孵育30min是较为合适的作用时间。; 贺政新陈晶王宪灵赵博华侯天文; 关键词：流式细胞术白念珠菌

湿化学酶法测定华氏巨球蛋白血症患者血清肌酐假性增高的评析被引量：6: 2015年; 目的探讨湿化学酶法检测华氏巨球蛋白血症患者肌酐假性增高的原因及解决方法。方法以2010-2012年中国人民解放军白求恩国际和平医院收治的5例华氏巨球蛋白血症患者为研究对象,采用离心超滤管将采集的患者血清中大分子蛋白滤去,分别用湿化学酶法、苦味酸法、干化学酶法检测超滤前后患者血清肌酐水平并进行比较分析。结果超滤前其中2例华氏巨球蛋白血症患者用湿化学酶法测得血清肌酐水平与苦味酸法、干化学酶法比较有明显差异,而5例患者后2种方法测得的肌酐水平差异不明显。而以离心超滤管滤去大分子蛋白后,3种方法测得的血清肌酐水平无明显差异。结论采用湿化学酶法检测华氏巨球蛋白血症患者血清肌酐时,应去除大分子蛋白以防止所测血清肌酐水平异常增高,或用干化学酶法或苦味酸法测定以确定检测的准确性,为临床提供真实可靠的检验结果。; 汤菲安黎云贾克然王宪灵; 关键词：酶法肌酐华氏巨球蛋白血症

呼吸道分泌物检出假丝酵母菌的意义: 2014年; 假丝酵母菌多为条件致病菌，广泛分布于自然界中，是口腔、咽喉等上呼吸道部位的主要定植菌之一。近年来，随着广谱抗生素、激素以及免疫抑制剂的应用和临床影响患者免疫功能的治疗手段的普遍开展，原发及继发性免疫功能低下的人群不断扩大，假丝酵母菌已经成为临床感染特别是院内感染中重要的病原菌。痰培养无创、方便，鉴定结果为临床确诊呼吸系统感染性疾病有重要意义，然而，由于人体口咽部定植有大量的寄生菌群，取样时容易对标本造成污染，影响检验结果的可信度。呼吸道分泌物检出假丝酵母菌的结果如何判读，是否需要给予抗真菌治疗是目前争议较大的问题，国内外尚无统一的意见，本文结合文献做一综述，对此问题进行分析。; 白云贺政新侯天文; 关键词：假丝酵母菌呼吸道分泌物

痰标本检出假丝酵母菌的临床意义被引量：1: 2014年; 肺假丝酵母菌病是一种由假丝酵母菌属引起的肺部感染性疾病,主要包括肺和支气管因假丝酵母菌感染所致的相关病变,如支气管炎、支气管肺炎、肺炎、肺脓肿及过敏性肺疾病等,但不包括真菌寄殖[1]。近年来,由于人口老龄化、环境污染及人类免疫缺陷病毒（HIV）感染等因素的影响,导致免疫力低下宿主增加,假丝酵母菌感染有不断增加的趋势,其中以假丝酵母菌引起的呼吸道感染为最常见的假丝酵母菌医院内感染[2]。; 侯天文; 关键词：标本假丝酵母菌显微镜检查活组织检查

白念珠菌磷酸甘油酸激酶1的原核表达及免疫原性分析被引量：5: 2013年; 目的构建白念珠菌基因磷酸甘油酸激酶1(PGK-1)基因的原核表达质粒并诱导其表达,对其免疫原性进行分析。方法 PCR法获取白念珠菌SC5314的PGK-1基因,插入原核表达载体pET30a中,以重组质粒转染感受态细胞E.coli BL21,经IPTG诱导表达后,SDS-PAGE检测蛋白的表达情况,并用Western blot法验证。用纯化获取的重组蛋白免疫BALB/c小鼠,ELISA对蛋白的免疫原性进行评价。结果成功构建原核表达质粒pET-30a-pgk-1,诱导后表达的重组蛋白相对分子质量(M r)约为54 810。ELISA检测抗体效价约为1∶1 024。结论成功获得白念珠菌PGK-1重组蛋白,该蛋白具有良好的免疫原性。; 贺政新陈晶冉向阳陈兴白云谢晓民侯天文; 关键词：白念珠菌原核表达侵袭性念珠菌病

侵袭性念珠菌感染血清学诊断的研究进展被引量：2: 2012年; 随着免疫力低下宿主的增多,侵袭性念珠菌感染(ICI)患者有不断增加趋势。除了常规培养技术,血清学诊断因其快速越来越受到临床关注。近年来,研究者用蛋白质组学分析了ICI患者血液中存在的念珠菌抗原成分及其特异抗体,并用分子生物学技术不断探寻新的检测指标。抗原包括念珠菌细胞壁及胞浆成分(β-葡聚糖、甘露聚糖、甘露糖蛋白65、热激蛋白90、烯醇化酶1等)、分泌酶类(分泌型天冬氨酸酶2等),抗体包括细胞壁甘露聚糖抗体、菌丝相抗原抗体(细胞延长因子、菌丝调节蛋白、凝聚素样序列、菌丝壁蛋白等抗体)、代谢酶Eno1抗体及多种抗体联合检测等。本文就血清学检测诊断ICI的研究进展作一综述。; 李云婷侯天文赵建宏; 关键词：血清学抗原抗体

念珠菌血症与血小板减少症: 2014年; 念珠菌血症常常出现血小板减少,甚或呈现血小板减少症。本文就目前有关念珠菌与血小板相互作用文献作一综述。发生念珠菌血症时,血小板可通过纤连蛋白等黏附于念珠菌,激活后释放α颗粒中多种抗真菌物质,引起细胞膜破坏和崩解,封闭和或延迟真菌芽管产生和菌丝延长,有效地抑制真菌早期阶段生长。而念珠菌依靠自身结构成份和代谢产物抑制血小板聚集,促进念珠菌扩散。因此,血小板抗念珠菌免疫损耗是念珠菌血症出现血小板减少现象的内在机制,早期检测血小板活化标志物CD42a和PAC1,将有助于念珠菌血症的早期诊疗。; 侯天文崔庆廷陈礼平尹晓琳郑运周; 关键词：念珠菌血症血小板减少症

白念珠菌烯醇化酶1的原核表达及多克隆抗体制备被引量：3: 2016年; 目的构建白念珠菌烯醇化酶1(eno1)基因的原核表达质粒并诱导其表达,制备其多克隆抗体。方法聚合酶链反应(PCR)获取白念珠菌SC5314的eno1全长基因,克隆入原核表达载体p ET30(a),转化感受态细胞E.coli BL21(DE3),经IPTG诱导表达后以亲和层析纯化重组蛋白并以SDS-PAGE和蛋白免疫印迹(Western blot)法鉴定。用纯化的重组蛋白免疫新西兰大白兔,制备Eno多克隆抗体,间接酶联免疫吸附试验(ELISA)测定抗体效价,Western blot法鉴定其特异性。结果成功构建原核表达质粒p ET30(a)-eno1,诱导后表达的重组蛋白相对分子质量约为50 000,主要以可溶性上清形式存在。纯化制备的eno1多克隆抗体效价约为1︰12 800 000,可与重组Eno反应。结论成功获得白念珠菌eno1重组蛋白并制备了该蛋白的多克隆抗体。; 贺政新侯天文李玮王宪灵; 关键词：白念珠菌原核表达烯醇化酶多克隆抗体

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