国家自然科学基金(30972582)
- 作品数：4 被引量：5H指数：1
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- 骨髓基质细胞抗原2抑制乙肝病毒复制与释放被引量：1
- 2015年
- 目的研究骨髓基质细胞抗原2(bone marrow stromal antigen 2,BST-2)对乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)复制与释放的影响。方法以不同浓度干扰素处理人肝癌细胞株Hep G2.2.15,Western blot和荧光定量PCR检测BST-2蛋白水平和RNA水平;分别用构建的BST-2真核表达质粒p CDNA3.1-BST2-FLAG和BST-2拮抗蛋白HIV Vpu真核表达质粒,转染Hep G2.2.15细胞,酶联免疫吸附实验(ELISA)检测细胞培养液乙肝病毒表面抗原(HBs Ag)和乙肝病毒e抗原(HBe Ag),荧光定量PCR检测HBV mRNA,Southern blot检测HBV DNA。结果转染p CDNA3.1-BST2-FLAG后,HBV mRNA降低26%,细胞内HBV DNA降低31%,细胞培养液中HBV DNA降低33%(P<0.05),细胞培养液中HBs Ag下降至82%,HBe Ag下降至77%(P<0.05);加入Vpu蛋白后,BST-2的抑制作用受到对抗,HBV mRNA恢复至92%,细胞内HBV DNA恢复至93%,细胞培养液中HBV DNA升至98%,细胞培养液中HBs Ag恢复至102%,HBe Ag恢复至99%,HBV复制与释放明显增强。结论 BST-2对HBV复制与释放具有抑制作用,该抑制作用可被HIV Vpu蛋白拮抗。
- 朱素菲贺巧胡琴黄英陈维贤李月
- 关键词：乙肝病毒干扰素
- 不同基因型乙型肝炎病毒感染者与其自身抗体的相关性分析被引量：4
- 2012年
- 目的探讨感染不同基因型HBV患者血清中自身抗体的存在状况及其分布特征，以了解HBV感染与自身免疫的关系。方法采用聚合酶链式反应限制性片段长度多态分析技术对重庆地区252例HBV感染者血清进行HBV基因分型，同时采用间接免疫荧光法或免疫斑点法检测其血清中的抗核抗体、抗线粒体抗体、抗平滑肌抗体、抗肝肾微粒体抗体、抗核糖核蛋白抗体、抗Sm、抗SS-A抗体、抗SS-B抗体、scl-70、抗Jo-1抗体等自身抗体。将患者分为慢性乙型肝炎组、肝硬化组和肝细胞癌组3组，并设立正常对照组，分别就自身抗体分布、性别及年龄等多种指标进行对比分析。计数资料采用疋。检验，3组间两两比较P值α校正为0．05／3=0．0176。结果252例患者血清中检出基因B型170例（67．460／0）、C型82例（32．540／0），未发现A、D、E、F、G、H基因型存在；其血清中检出多种自身抗体，总检出率为76．98％，与正常对照组（12．0％）比较，差异有统计学意义（χ^2=44．60，P〈0．05）;170例B基因型患者血清中131例（77．06％）检出自身抗体，82例C型患者血清中63例（76．83％）检出自身抗体，两组比较，差异无统计学意义（P〉0．05）。结论本地区HBV感染者基因型主要为B型和C型，以B型居多；乙型肝炎患者自身抗体阳性率较高，检出率与病程、年龄相关，而号陛别、病毒基因的类型等因素无关。
- 聂红王云英王毅石姜陈维贤
- 关键词：基因型自身抗体
- E盒结合锌指蛋白2抑制乙型肝炎病毒的复制和表达
- 2016年
- 目的研究转录因子E盒结合锌指蛋白2（ZEB2）对HBV复制和表达的影响。方法分别培养HepG2、HepG2．2．15和HepAD38细胞，Westemblot检测ZEB2表达水平。培养HepG2．2．15细胞，转染ZEB2表达质粒或针对ZEB2的shRNA，采用Westemblot检测ZEB2和HBV核心蛋白表达水平，实时荧光定量PCR检测HBV3．5kbRNA和HBVDNA，Southernblot检测HBV复制中间体，酶联免疫吸附法检测HBsAg和HBeAg表达水平，明确ZEB2对HBV复制表达的影响。采用双荧光素酶报告系统检测ZEB2对HBV启动子的影响，染色质免疫共沉淀法检测ZEB2与HBV启动子的结合情况。组间均数比较采用Studentf检验。结果在HBV复制的细胞中，ZEB2表达受到抑制。过表达ZEB2可使HBV复制和表达水平下降约50％，差异有统计学意义（P〈0．05）。采用shZEB2-1和shZEB2-2下调ZEB2后，HBV复制中间体的相对表达量由58．53±3．43分别上升到112．80±5．03、128．30±2．31，HBV3．5kbRNA的相对表达量由1．00±0．01分别增加到2．03±0．02、2．32±0．03，HBsAg的相对表达量由35．63％±1．57％分别上升到81．87％±0．43％、100．00%±2.18％，HBeAg的相对表达量由37.00%±0.70%分别上升到88．00％±2．60％、100．00％±0．75％。ZEB2可以抑制HBV核心启动子的转录活性，并可与HBV核心启动子结合。结论ZEB2通过结合HBV核心启动子并抑制其转录活性，从而抑制HBV的复制和表达。
- 李小平胡琴贺巧陈维贤
- 关键词：核心启动子
- siRNA化学修饰及靶向转运策略的研究进展
- 2010年
- siRNA的化学修饰及靶向转运策略已广泛应用于肿瘤、病毒感染性疾病及代谢性疾病的临床治疗研究,并取得一定的进展。本文主要对siRNA的化学修饰、细胞穿透性多肽、靶向性配体及纳米颗粒等方面的研究进展作一综述。
- 杨兵陈维贤张莉萍
- 关键词：小干扰RNA化学修饰转运系统
