广东省科技计划工业攻关项目(20128031800313)
- 作品数：1 被引量：0H指数：0
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- 硫化氢抑制丙酮醛诱导的人皮肤角质形成细胞损伤
- 2014年
- 目的 观察硫化氢（H2S）对丙酮醛（MGO）诱导的人皮肤角质形成细胞（HaCaT）损伤的影响.方法 HaCaT细胞分为MGO组、对照组和MGO＋NSHD（H2S供体）组.MGO组用200、400、600 μmol/LMGO处理HaCaT细胞48 h造成细胞损伤;对照组给予等体积培养基;MGO＋NSHD组应用400 μmol/LMGO处理,48 h前用50、100、200μmol/LNSHD预处理1h.通过CCK-8检测各组细胞活性.HaCaT细胞经100 μmol/LNSHD预处理1h,用20 μmol/L的H2S荧光探针WSP-1染色结合荧光照相术检测NSHD预处理1h组和对照组培养基和细胞内的H2S含量.将HaCaT细胞分为MGO组、MGO＋NSHD组、NSHD组和对照组.MGO组仅用400 μmol/L MGO处理48 h;MGO＋NSHD组在400 μmol/L MGO处理48 h前用100 μmol/L NSHD预处理1 h;NSHD组的细胞仅用100 μmol/L NSHD处理1h;对照组则给予等体积培养基.Hoechst 33258核染色结合荧光照相术检测细胞凋亡.Rh123染色结合荧光照相术检测线粒体膜电位（MMP）.结果 HaCaT细胞经200、400和600 μmol/L MGO处理48 h,细胞活性依次为0.325±0.023、0.224±0.009和0.095±0.102,均低于对照组0.415±0.031（F=37.866,P＜0.05）,其中400 μmol/LMGO组细胞活性约为对照组的1/2,选用此浓度的MGO作为有效损伤浓度.100 μmol/L NSHD处理1h可使培养基和细胞内的H2S含量较对照组均增加.在400μmol/L MGO处理48 h前,分别用50、100和200 μnol/L NSHD预处理1h,细胞活性依次为0.235±0.028、0.314±0.017、0.346±0.020,均高于单独400μmol/L MGO处理组0.224±0.009（F=61.209,P＜0.05）.400 μmol/L MGO处理48 h后细胞凋亡率高于对照组和NSHD组[（32.6±3.5）％比（5.1±1.2）％、（3.4±0.8）％,均P＜0.05],MMP低于对照组和NSHD组（28.5±2.9比46.1±3.8、48.6±4.3,均P＜0.05）.MGO＋ NSHD组细胞凋亡率（18.3±2.6）％,低于MGO组但高于对照组和NSHD组（均P＜0.05）,MMP为38.9±3.2,高于MGO组但低于对照组和NSHD组（均P＜0.05）.结论 NSHD能通过释放H2S拮抗MGO诱导的皮肤细胞损伤.
- 蔡典其杨春涛陈凤娟陈存特陈珏铭骆月妍江伟炽郑洁蓉张辉
- 关键词：糖尿病硫化氢角朊细胞丙酮醛皮肤溃疡
