陕西省自然科学基金(2004C2-21)
- 作品数：9 被引量：24H指数：3
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- 抗氧化剂对心肌肥厚单核细胞趋化蛋白-1的影响被引量：7
- 2007年
- 目的观察压力负荷大鼠心肌中单核细胞趋化蛋白-1（MCP-1）的表达变化，并探讨活性氧（ROS）与MCP-1的关系。方法应用腹主动脉缩窄法（Ac）建立大鼠压力负荷模型，42只SD大鼠随机分为7组，分别为：假手术组；AC手术组；抗氧化剂N-乙酰半胱氨酸（NAC）2、4周组。NAC组为：AC＋NAC（160mg／kg·d腹腔注射2周或4周）。各组均为6只SD大鼠。在观察期后颈动脉插管测大鼠血压及计算左心室质量分数（LVW／BW），采用分光光度计检测大鼠心肌ROS水平，用酶联免疫吸附测定（ELISA）法和逆转录聚合酶链式反应（RT-PCR）分别检测心肌组织MCP-1蛋白和mRNA的表达。结果（1）AC术后1～4周大鼠平均动脉压（MBP）明显高于假手术组（P〈0．05）。（2）术后2～4周大鼠LVW／BW与假手术组大鼠比较，差异有统计学意义（P〈0.05）；术后1周组大鼠LVW／Bw与假手术组比较，无显著性差异（P〉O．05）。（3）术后1周心肌组织ROS表达量为（30．4±1．5）U／mgpro，2周为（42．35=1．3）U／mgpro，3、4周分别为（34．9±1．6）和（32．3±1.4）U／mgpro，各组与假手术组（17．3±1．8）U／mgpro比较，差异有非常显著意义（P〈0.01）。NAC2周组ROS为（11．85=0．7）U／mgpro，明显低于AC2周组，差异有非常显著意义（P〈0．01）；NAC4周组ROS为（14．0±0．7）U／mgpro，与ACA周组比较，差异有非常显著意义（P〈0．01）。（4）术后1～4周心肌组织MCP-1蛋白表达量分别为（67．05=4．5）、（84．85=5．9）、（43．1±3．1）、（36．2±3．2）pg／mgpro，各组与假手术组（12．7±1．3）pg／mgpro比较，差异有非常显著意义（P〈O．01）^。NAC2周组MCP-1表达量为（33．75=2．4）pg／mgpro，与AC2周组比较，差异有非常显著意义（P〈0．01）；NAC4周组为（19．4±2．8），低于AC4周组，差异有非常显著意义（P〈0．01）。（5）术后1～4周MCP-1mRN
- 张丽娟赵连友尚福军郑强荪刘慧刘少伟
- 关键词：活性氧单核细胞趋化蛋白-1高血压
- 辛伐他汀调控心肌营养素-1诱导心肌细胞肥大及其与JAK-STAT信号通路的关系
- 目的观察辛伐他汀(Sim)对心肌营养素-1(CT-1)诱导的大鼠心肌细胞肥大效应的影响,探讨Jak激酶／信号转导转录活化因子(JAK—STAT)信号通路与心肌细胞肥大的关系。方法以培养的新生Sprague— Dawley...
- 武利军赵连友郑强荪尚福军王先梅牛晓琳黄志刚
- 文献传递
- 辛伐他汀抗高血压心肌纤维化与单核细胞趋化蛋白-1表达的关系被引量：4
- 2007年
- 目的:研究辛伐他汀对腹主动脉缩窄性高血压大鼠心肌单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)表达及其巨噬细胞浸润的影响,探讨其抗纤维化的机制。方法:应用腹主动脉缩窄法(AC)建立大鼠压力负荷模型,18只SD大鼠随机分为假手术组、手术组、辛伐他汀组,每组6只。4周后颈动脉插管测大鼠血压及计算左心室质量分数(LVW/BW),苦味酸-天狼猩红染色观察心肌间质胶原容积分数(CVF)和心肌血管周围胶原面积比(PVCA)反映心肌纤维化程度,免疫组化染色观察单核巨噬细胞抗原(ED1)数量,ELISA法和逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)分别检测辛伐他汀对心肌MCP-1蛋白和mRNA表达的影响。结果:手术组和辛伐他汀组大鼠平均动脉压(MBP)、LVW/BW、MCP-1蛋白和MCP-1 mRNA表达均显著高于假手术组(P<0.05或P<0.01),手术组CVF和PVCA、ED1阳性细胞数显著高于假手术组(P<0.01),但是辛伐他汀组与手术组MBP变化相近(P>0.05),辛伐他汀组较手术组LVW/BW、CVF和PVCA、ED1阳性细胞数、MCP-1蛋白和MCP-1 mRNA表达均显著降低(P<0.01)。结论:辛伐他汀可以抗心肌纤维化,其机制可能与降低MCP-1表达,减少巨噬细胞浸润有关。
- 张丽娟赵连友郑强荪尚福军杨润涛刘慧刘少伟
- 关键词：单核细胞趋化蛋白-1辛伐他汀巨噬细胞心肌纤维化
- 白细胞介素10对血管升压素诱导心脏成纤维细胞增殖及胶原合成的影响
- 目的研究白细胞介素10(IL-10)对血管升压素(AVP)诱导大鼠心脏成纤维细胞(CFs)增殖及I、Ⅲ型胶原合成的影响。方法以培养的新生SD大鼠CFs为实验模型,四氮唑盐(MTT)比色法检测CFs增殖, 流式细胞仪技术(...
- 黄志刚赵连友郑强荪牛晓琳王先梅武利军
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- 辛伐他汀对血管加压素诱导大鼠心肌成纤维细胞增殖的影响及其与小窝蛋白-1表达的关系被引量：1
- 2008年
- 目的研究辛伐他汀（simvastatin，Sim）对精氨酸血管加压素（arginine vasopressin，AVP，简称血管加压素）诱导成年大鼠心肌成纤维细胞（CFs）增殖的影响及其与小窝蛋白-1（caveolin-1，cavl）的关系。方法离体培养成年大鼠CFs，以四氮唑盐（MTT）比色法检测CFs的增殖，流式细胞分析仪测定其细胞周期，蛋白免疫印迹法检测cavl蛋白的表达。观察carl在AVP诱导大鼠CFs增殖前后及Sire干预后的变化。结果10^-7mol／LAVP干预24h后，MTT比色法检测CFs的吸光值（A）（0．24±0．03）较对照组（0．15±0．02）显著增高（P〈0．01）；给予10^-8 -10^-5mol／L的Sim和AVP共同干预后，CFs的A值呈递减趋势，分别为0．22±0．03、0．21±0．02、0．19±0．02和0．17±0．02，均较AVP组降低，差异具有统计学意义（P〈0．05，P〈0．01）。以10^-7mol／L的AVP干预24h后，CFsS期的百分率（19．52±1．07）和增殖指数（48．25±1．27）较对照组（分别为7．02±0．27和18．93±3．03）均显著增高（均P〈0．01）；10^-7～10^-5mol／LSim与10^-7 mol／LAVP联合干预组CFs S期的百分率和增殖指数均较AVP单独干预组降低，差异具有统计学意义（P〈0．05，P〈0．01）。10^-7mol／L的AVP分别与10^-8 - 10^-5moFL的Sim共同干预后，cavl蛋白的表达呈浓度依赖性地减少。甲羟戊酸（MVA）可逆转Sim对CFs增殖的抑制效应，并拮抗Sim诱导的cavl蛋白表达的降低。结论Sim可抑制AVP诱导的CFs增殖，Sim的干预效应可能受到cavl蛋白表达的调节。
- 何燕萍赵连友郑强荪刘少伟赵晓燕陆晓龙
- 关键词：小窝蛋白-1血管加压素辛伐他汀心肌成纤维细胞增殖
- 小窝蛋白-1反义寡核苷酸在AVP诱导大鼠心肌成纤维细胞增殖erk1/2信号转导中的作用及辛伐他汀的干预效应
- 2011年
- 目的研究小窝蛋白-1反义寡核苷酸(cav1-AS ODN)在血管加压素(AVP)诱导的成年大鼠心肌成纤维细胞(CFs)增殖erk1/2信号转导中的作用及辛伐他汀(Sim)对cav1表达的干预效应。方法采用脂质体导入法将cav1-AS ODN导入离体培养的成年大鼠CFs,用3H-TdR掺入法定量观察CFs增殖,蛋白免疫印迹法分析cav1-AS ODN对AVP诱导大鼠CFs增殖后磷酸化erk1/2(p-erk1/2)、p21和细胞周期蛋白A(cyclin A)表达变化及Sim对cav1表达的影响。结果 cav1-AS ODN与10-7 mol/L的AVP共同干预组,大鼠CFs内3H-TdR掺入率和p-erk1/2蛋白表达量分别相当于空白对照组的(212±6)%和(7.9±0.3)%,10-7mol/L的AVP单独干预组的3H-TdR掺入率和p-erk1/2表达量分别相当于空白对照组的(172±4)%和(5.7±0.2)%,两组比较差异非常显著(P<0.01)。cav1-AS ODN单独干预或与10-7mol/L的AVP共同干预大鼠CFs 24 h后,两组CFs内p21表达丰度均较空白对照组下降,cyclin A表达丰度升高。β-环糊精、黄体酮或Sim可减少CFs胞膜上cav1蛋白表达。用10、15或20μg/ml胆固醇分别与10-7 mol/L Sim共同干预CFs 24 h后,CFs胞膜上cav1蛋白表达量分别相当于对照组的(86±3)%(、91±4)%和(94±5)%,与10-7mol/L Sim单独作用CFs组(66±4)%比较,均有显著的统计学差异(P<0.05,P<0.01)。结论 cav1-AS ODN可增强AVP促CFs增殖的作用,Sim降胆固醇作用影响CFs胞膜上cav1蛋白表达,从而影响CFs增殖。
- 何燕萍杨军岭赵连友刘少伟
- 关键词：小窝蛋白-1反义寡核苷酸血管加压素辛伐他汀心肌成纤维细胞
- 拉西地平对AVP诱导的大鼠心脏成纤维细胞增殖的影响及其与ERK1/2的关系被引量：5
- 2008年
- 目的观察拉西地平对血管加压素（AVP）诱导的大鼠心脏成纤维细胞（CFs）增殖的影响及其与细胞外信号调节激酶（ERK）1／2的关系。方法以培养的新生SD大鼠CFs为实验模型，采用四氮唑盐比色法测定细胞数目；用流式细胞术分析细胞周期；用蛋白免疫印迹法测定总细胞外信号调节激酶（t-ERK）1／2和磷酸化细胞外信号调节激酶（p-ERK）1／2在细胞内的表达。实验按照给予CFs干预因素的不同，分为对照组、10^-7mol／LAVP处理组、10^-9 - 10^-6mol／L拉西地平＋10^-7mol／LAVP干预组和10^-7mol／L拉西地平单独干预组。结果①10^-7mol／LAVP干预24h后，CFs的A490值（0．232±0．013）较对照组（0．132±0．008）显著增高（P〈0．01）。在10^-9 - 10^-6mol／L拉西地平和10^-7mol／LAVP共同干预下，拉西地平可呈浓度依赖性地下调CFs的A490值，分别为0．216±0．01、0．203±0．01、0．176±0．01和0．160±0．01，均显著低于AVP组（P〈0．01）。②细胞周期分析显示，AVP组CFs在S期的百分率和增殖指数（PI）分别为13．06±0．83和21．70±1．55，与对照组（分别为4．60±0．60和8．97±1．56）比较显著增高（P〈0．01）。在10^-4mol／L拉西地平干预下，细胞在S期的百分率（8．84±0．80）和PI（15．46±1．84）较AVP组显著降低（P〈0．01）。③AVP组CFs的p-ERKI／2表达显著高于对照组（P〈0．01），10^-9、10-、10^-7和10^-6mol／L拉西地平组CFs中p-ERKI／2的表达与AVP组比较呈浓度依赖性地降低（P〈0．01）。结论拉西地平可抑制AVP诱导的大鼠CFs增殖，提示拉西地平对预防和逆转心脏重构具有一定的作用，其机制可能与ERKl／2的磷酸化有关。
- 陆小龙赵连友郑强荪赵小燕何艳萍刘慧尚福军
- 关键词：血管加压素拉西地平心脏成纤维细胞增殖
- 脂多糖诱导大鼠心肌细胞肿瘤坏死因子-α表达时活性氧调控的作用被引量：3
- 2006年
- 目的探讨在脂多糖(LPS)诱导大鼠心肌细胞肿瘤坏死因子α(TNF-α)表达过程中活性氧(ROS)的作用及其信号分子机制。方法以体外培养的新生SD(Sprague-Dawley)大鼠心肌细胞为实验模型,应用反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)和酶联免疫吸附实验(ELISA)检测TNF-αmRNA和蛋白表达水平;细胞内ROS水平采用ROS敏感的荧光探针二氯荧光素二乙酸(DCF-DA)测定。采用蛋白免疫印迹法测定心肌细胞内丝裂原活化蛋白激酶(MAPKs)亚型p38MAPK的磷酸化水平来反映其活性。结果(1)LPS组心肌细胞TNF-αmRNA和蛋白表达水平分别为(0·29±0·07)和(83·6±14·5)pg/mL,与对照组[(0·07±0·02)、(22·1±7·1)pg/mL]比较差异均有非常显著性意义(P<0·01)。在抗氧化剂氮乙酰半胱氨酸(NAC)干预后,TNF-αmRNA水平(0·13±0·03)和蛋白含量(39·1±10·2)pg/mL与LPS组比较差异均有非常显著意义(P<0·01)。(2)LPS组心肌细胞二氯荧光素(DCF)荧光强度为83±15,与对照组比较(34±9)差异有非常显著意义(P<0·01)。在NAC干预后,DCF荧光强度(19±4)与LPS组比较明显降低,差异有非常显著性意义(P<0·01)。(3)LPS组心肌细胞p38MAPK相对活性为(0·34±0·07),与对照组(0·18±0·05)比较差异有非常显著意义(P<0·01)。NAC干预组p38MAPK活性明显降低(0·24±0·03),与LPS组比较差异有非常显著意义(P<0·01);p38MAPK抑制剂预处理组TNF-α蛋白含量为(46·8±11·6)pg/mL,与LPS组(85·5±22·4)pg/mL比较差异有非常显著意义(P<0·01)。结论LPS可上调心肌细胞内ROS生成,ROS介导的信号通路至少部分参与了LPS诱导TNF-α表达的调控过程,p38MAPK可能是该信号通路的重要下游分子之一。
- 尚福军赵连友郑强荪王捷频张丽娟刘慧刘少伟
- 关键词：活性氧脂多糖肿瘤坏死因子-Α心肌细胞
- 拉西地平对CTGF诱导大鼠心肌细胞肥大的影响及其与ERK1/2的关系
- 2009年
- 目的观察拉西地平对结缔组织生长因子(CTGF)诱导大鼠心肌细胞肥大的作用,探讨其作用与细胞外信号调节激酶1/2(ERK1/2)的关系。方法以培养的新生SD大鼠的心肌细胞为实验模型,用图象分析法、3H-亮氨酸掺入法、考马斯亮蓝染色、蛋白免疫印迹法(Westernblot)等,评价拉西地平对CTGF诱导心肌细胞肥大的抑制作用及其与ERK1/2的关系。结果①以50ng/L的CTGF作用24h后,心肌细胞表面积为(1812.52±168.73)μm2,与对照组(689.31±96.58)μm2比较显著增加(P<0.01);5、10、25及50μmol/L拉西地平干预组的心肌细胞表面积分别为(1476.52±156.73)μm2、(1120.39±149.68)μm2、(926.10±101.44)μm2及(739.81±91.55)μm2,与CTGF组比较呈浓度依赖性降低(P<0.01)。②以50ng/L的CTGF作用24h后,心肌细胞的3H-亮氨酸掺入率为(2368.72±122.45)cpm/孔,与对照组(950.26±89.43)cpm/孔比较显著增加(P<0.01)。5、10、25及50μmol/L拉西地平干预组的心肌细胞的3H-亮氨酸掺入率,分别为(2023.12±106.15)cpm/孔、(1629.15±103.46)cpm/孔、(1302.19±98.53)cpm/孔及(1055.72±90.96)cpm/孔,与CTGF组比较呈浓度依赖性降低(P<0.01)。③以50ng/L的CTGF作用24h后,心肌细胞蛋白的含量为(1.692±0.203)ng/细胞,与对照组(0.622±0.068)ng/细胞比较显著增加(P<0.01);5、10、25及50μmol/L拉西地平干预组的心肌细胞蛋白的含量分别为(1.269±0.167)ng/细胞、(0.923±0.119)ng/细胞、(0·766±0.085)ng/细胞及(0.682±0.063)ng/细胞,与CTGF组比较呈浓度依赖性降低(P<0.01)。④50ng/LCTGF组的心肌细胞p-ERK1/2表达强度明显高于对照组,5μmol/L、10μmol/L、25μmol/L、50μmol/L拉西地平干预组心肌细胞p-ERK1/2的表达强度与CTGF组比较呈浓度依赖性降低。心肌细胞t-ERK1/2的表达在各组之间没有明显的差异。结论拉西地平可抑制CTGF诱导的心肌细胞肥大,其作用机制可能与ERK1/2磷酸化有关。
- 章燕付峰赵连友刘慧牛晓琳
- 关键词：结缔组织生长因子拉西地平心肌细胞肥大ERK1/2
- 血管紧张素-(1-7)对血管加压素诱导心脏成纤维细胞增殖和胶原合成的影响
- 目的研究血管紧张素-(1-7)[Ang-(1-7)]对血管加压素(AVP)诱导心脏成纤维细胞(CFs)增殖和胶原合成的影响。方法分离培养SD仔鼠CFs,四氮唑盐(MTT)比色法检测细胞增殖,流式细胞分析仪技术测定细胞周期...
- 牛晓琳赵连友郑强荪黄志刚王先梅武力军
- 文献传递
