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中国博士后科学基金(2012T50159)
作品数:
1
被引量:2
H指数:1
相关作者:
党伯岳
靳保龙
漆小泉
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相关机构:
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相关领域:
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2014
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丹参二萜合酶基因CPS4的原核表达体系优化及活性蛋白纯化
被引量:2
2014年
目的:优化丹参柯巴基焦磷酸合酶基因家族新基因CPS4的原核表达体系并对重组蛋白进行纯化。方法:对2种原核表达菌株进行比较。对诱导条件,包括异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导浓度、诱导时宿主菌的密度(A600)和诱导时间进行正交试验。利用HisTrap HP蛋白纯化柱对重组蛋白进行纯化。结果:Escherichia coli Tuner(DE3)表达菌株能诱导产生更多的可溶重组蛋白。最佳诱导表达条件为诱导时宿主菌的A600值0.7,IPTG浓度0.2 mmol·L-1,诱导表达时间10 h。HisTrap HP蛋白纯化柱纯化时梯度洗脱能得到纯度高的重组蛋白。结论:利用此优化体系可得到足量用于后续研究的重组蛋白,为其他二萜类合酶基因的原核表达提供参考。
靳保龙
崔光红
党伯岳
刘世会
漆小泉
关键词:
丹参
原核表达
正交试验
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