江苏高校优势学科建设工程资助项目(2011-01)
- 作品数：1 被引量：4H指数：1
- 相关作者：生安志姜星鞠辉明白立景更多>>
- 相关机构：中国农业科学院北京畜牧兽医研究所扬州大学更多>>
- 发文基金：江苏省高校自然科学研究项目江苏高校优势学科建设工程资助项目国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- miRNA-143表达载体构建及表达活性检测被引量：4
- 2012年
- 以大白猪基因组DNA为模板,利用PCR扩增miRNA-143前体序列,构建重组载体pEGP-miR-143,转染猪胎儿成纤维细胞,通过荧光观察转染效率和报告基因表达效率,再利用实时荧光定量PCR(QRT-PCR)测定细胞内miRNA-143的表达,以检测外源基因的表达活性;对PCR产物进行测序鉴定及重组载体酶切验证。结果表明:成功构建了pEGP-miR-143载体;转染细胞后进行荧光观察,载体中GFP有较好的表达活性;QRT-PCR表明,与对照组细胞相比,试验组miRNA-143表达有显著提升,差异极显著(P<0.01)。说明已成功制备miRNA-143过表达载体,为在动物细胞和体内开展miRNA-143相应的功能研究奠定基础。
- 姜星生安志白立景鞠辉明
- 关键词：MICRORNA真核表达载体
