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基因谱系示踪揭示小鼠Tbx18^+肾脏间质祖细胞分化为输尿管平滑肌被引量：4: 2012年; 本文旨在研究Tbx18+肾脏间质祖细胞分化为输尿管平滑肌细胞的命运及转录因子Tbx18在小鼠输尿管平滑肌发育形成中起到的作用.实验建立Tbx18:Cre/R26REYFP和Tbx18:Cre/R26RLacZ两种谱系示踪系统和Tbx18:Cre/Cre敲除模型.该示踪模型通过cre重组酶的表达能有效地示踪Tbx18+肾脏间质祖细胞在泌尿系统的发育命运.通过免疫荧光染色和X-gal染色,同时发现Tbx18+肾脏间质祖细胞可分化为输尿管平滑肌细胞,但不分化为输尿管移行上皮细胞.在Tbx18:Cre/Cre基因突变模型中,泌尿系统出现明显的肾积水和输尿管积水,肾盏、肾盂扩张,输尿管明显缩短和扩张.实验结果揭示,Tbx18+肾脏间质祖细胞可以分化为输尿管平滑肌细胞,且转录因子Tbx18在哺乳动物输尿管平滑肌的发育中起到重要的作用.; 高凌志杜建霖李晓群汪浩查承沁刘亚杰佘强; 关键词：输尿管平滑肌

Tbx18-Cre基因敲入小鼠的繁殖、鉴定及其应用被引量：1: 2012年; 为了探讨Tbx18-Cre基因敲入小鼠(Tbx18:Cre knock-in Mus musculus)的繁殖、鉴定及Tbx18基因敲除小鼠和遗传示踪小鼠模型的应用,将Tbx18-Cre基因敲入杂合子小鼠进行繁殖,应用PCR法鉴定其子代基因型。将子代雌雄杂合子小鼠互交,应用H.E染色观察Tbx18基因敲除胚鼠心的形态学变化。将杂合子小鼠与RosaEYFP报告小鼠交配,应用心冰冻切片技术观察Tbx18:Cre/Rosa26REYFP双转基因遗传示踪胚鼠心内Tbx18阳性心外膜祖细胞发育命运。结果表明,用于繁殖、基因敲除研究及基因遗传示踪的子代基因型均符合孟德尔遗传规律。同时心H.E染色和心冰冻切片发现,Tbx18敲除小鼠心窦房结发育存在缺陷,而Tbx18阳性心外膜祖细胞是心发育重要的祖细胞来源。研究结果揭示,Tbx18-Cre基因敲除小鼠是研究先天性心脏病发病机制的理想模式动物,Tbx18阳性心外膜祖细胞可能是心脏病患者心脏修复和再生潜在的种子细胞。; 张进刘亚杰翁敏杰佘强; 关键词：基因敲入

转录因子Tbx18在小鼠胚胎发育过程中的时空表达被引量：5: 2012年; 目的检测胚胎期小鼠Tbx18在mRNA及蛋白水平的表达情况,了解Tbx18在小鼠胚胎发育过程中的时空表达模式。方法用整体原位杂交技术检测小鼠整胚TBX18 mRNA的表达,用X-gal染色检测Tbx18-Cre/Rosa26R/LacZ双杂合基因谱系示踪模型小鼠胚胎的报告基因LacZ蛋白的表达,用荧光定量PCR检测小鼠胚胎期心脏mRNA的定量表达。结果发现在小鼠胚胎期9.5～10.5 d转录因子Tbx18主要在前体心外膜表达,由前体心外膜逐渐迁移定位于心外膜;在11.5～12.5 d的小鼠胚胎Tbx18主要定位于心脏、上下肢、体节及上下唇鄂区域;大于12.5 d的小鼠胚胎Tbx18除了上述部位外还定位于肾、输尿管、膀胱等区域。结论转录因子Tbx18在小鼠胚胎发育过程中的表达具有时空特异性,对小鼠心脏的发育可能起着至关重要的作用;同时在上下肢、体节、唇鄂、肾、输尿管、膀胱的发育中也可能起非常重要的作用。; 蒲荻杜建霖李晓群翁敏杰佘强; 关键词：整体原位杂交小鼠胚胎发育

诱导多能干细胞诱导体系研究现状及进展: 2010年; 体细胞诱导重编程为诱导多能干细胞是近年来干细胞研究领域一项新的技术,不仅为体细胞重编程去分化机制的研究注入了新的活力,而且为疾病发生发展相关机制研究及再生医学带来了新的曙光.诱导多能干细胞（iPS细胞）诱导体系作为该技术的核心部分,在转录因子的组成和导入方式、诱导效率及诱导安全性的提高等方面都有不断的进展.就近几年iPS细胞诱导体系的现状与应用前景进行综述和展望.; 杨景涛佘强; 关键词：体细胞重编程 IPS细胞转录因子小分子化合物

曲美他嗪对2型糖尿病模型大鼠心室肌Ito通道表达的影响研究被引量：5: 2011年; 目的:探讨曲美他嗪(TMZ)对2型糖尿病模型大鼠心室肌Ito通道α亚单位(Kv1.4、Kv4.2、Kv4.3)表达的影响。方法:大鼠高脂喂养1月后,一次性腹腔注射链脲佐菌素35mg·kg-1建立2型糖尿病模型,建模成功后,随机分为治疗组(高脂饮食,灌胃TMZ10mg·kg-1)和模型组(高脂饮食,灌胃生理盐水),每组10只,给予相应药物,每天1次,4周后分别用实时荧光定量聚合酶链式反应技术(Real-timePCR)、蛋白免疫印迹法(Westernblot)检测左心室Kv1.4、Kv4.2、Kv4.3mRNA和蛋白质的表达水平,另设正常对照组进行比较。结果:与正常对照组比较,模型组大鼠左心室Kv1.4mRNA和蛋白质表达明显升高,Kv4.2、Kv4.3mRNA和蛋白质表达明显降低(P均<0.01);与模型组比较,治疗组大鼠左心室Kv1.4mRNA和蛋白质表达明显降低,Kv4.2、Kv4.3mRNA和蛋白质表达明显升高(P均<0.05)。结论:TMZ可逆转2型糖尿病模型大鼠心室肌Ito通道α亚单位表达的变化。; 何莉向玉鸾佘强; 关键词：曲美他嗪 2型糖尿病

心外膜细胞在心脏发育及再生的研究进展: 2012年; 心外膜是由前体心外膜细胞逐渐分化形成并覆盖于心脏表面的间皮组织。研究表明,哺乳动物心外膜细胞具有多向分化的潜能,因而心外膜细胞现已成为心肌再生领域的研究热点。现就心外膜细胞功能、标志基因及其在心脏再生领域研究进展做一综述,并展望其研究前景。; 刘亚杰佘强; 关键词：心脏发育

盐酸曲美他嗪对大鼠缺血心室肌Ito通道α亚单位表达影响的研究被引量：2: 2010年; 目的:研究盐酸曲美他嗪(Trimetazidine,TMZ)对急性心肌梗死大鼠血浆游离脂肪酸(Free fatty acid,FFA)浓度和左心室梗死周边区心室肌瞬时外向钾电流(Transient outward current,Ito)通道α亚单位(Kv4.2、Kv4.3和Kv1.4)表达变化的影响。方法:通过结扎大鼠左冠状动脉前降支建立心梗模型,将存活的26只大鼠按随机数字表分为急性心梗组和TMZ组,每组13只,同时设立假手术组,10只。4周后取左室梗死周边区心肌组织,分别用Real-time PCR和Western blot检测Kv4.2、Kv4.3、Kv1.4mRNA和Kv4.2、Kv4.3、Kv1.4蛋白质表达,同时取全血用比色法测血浆FFA浓度。结果:急性心梗组血浆FFA浓度和Kv1.4基因表达水平高于假手术组(P<0.05),而Kv4.2、Kv4.3基因表达较假手术组降低(P<0.05);TMZ组血浆FFA浓度和Kv1.4基因表达与心梗组相比降低(P<0.05),而Kv4.2、Kv4.3基因表达水平较心梗组升高(P<0.05),接近于假手术组。结论:急性心梗后4周梗死周边区心肌Kv4.2、Kv4.3基因表达降低,Kv1.4基因表达和血浆FFA浓度增高,TMZ可能通过降低心梗后血浆FFA浓度,逆转其Ito通道α亚单位表达的改变。; 向玉鸾何莉佘强; 关键词：急性心肌梗死瞬时外向钾电流盐酸曲美他嗪

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国家自然科学基金(30971213)