山东省科技发展计划项目(2007GG20002044)
- 作品数：1 被引量：2H指数：1
- 相关作者：霍然冯永强王法刚曹永倩李强更多>>
- 相关机构：中国医学科学院山东大学更多>>
- 发文基金：山东省科技发展计划项目国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 存活素反义寡脱氧核苷酸对人恶性黑色素瘤细胞增殖和凋亡的影响被引量：2
- 2010年
- 目的 了解存活素反义寡脱氧核苷酸（ASODN）对人恶性黑色素瘤细胞（hMMC）增殖和凋亡的影响.方法 取对数生长期hMMC株A375,按随机数字表法分为对照组（不转染）、正义链组（转染600 nmol/L存活素正义寡脱氧核苷酸）、错义链组（转染600 nmol/L存活素错义寡脱氧核苷酸）、脂质体组（仅用脂质体处理）、反义链组（转染存活素ASODN,根据转染物浓度再分为200、400、600 nmol/L 3个亚组）,倒置荧光显微镜下观察转染效果.采用噻唑蓝法测定细胞存活情况并计算细胞增殖抑制率,双变量流式细胞仪检测细胞凋亡率及细胞周期,蛋白质印迹法检测存活素蛋白的表达,激酶法检测半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3（caspase-3）的活性.对数据进行方差分析.结果 （1）正义链组、错义链组、反义链600 nmol/L组细胞转染率均大于80%.（2）反义链200、400、600nmol/L组转染后24 h细胞增殖抑制率[（10.30±0.56）%、（16.69±0.58）%、（24.67±0.67）%]较正义链组[（5.23±0.25）%]、错义链组[（5.09±0.13）%]、脂质体组[（4.70±0.45）%]显著增加（F=746.91,P值均小于0.05）,且随转染时间延长,增殖抑制率增加明显.（3）反义链200、400、600nmol/L组转染后24 h细胞凋亡率分别为（13.5±1.9）%、（20.1±1.5）%、（32.1±2.9）%,显著高于对照组、正义链组、错义链组、脂质体组的（6.5±0.6）%、（5.6±0.7）%、（6.4±1.0）%、（6.5±1.3）%（F=139.9,P值均小于0.05）,细胞被阻滞在G2/M期.（4）与对照组比较,反义链各浓度组存活素蛋白表达量减少,caspase-3活性明显增高（F=63.1,P值均小于0.05）;正义链组、错义链组、脂质体组caspase-3活性与对照组比较,差异无统计学意义（F=0.512,P值均大于0.05）.结论 存活素ASODN能够呈浓度-时间依赖性抑制hMMC株A375增殖,诱导G2/M期阻滞,促进其凋亡.
- 曹永倩王法刚霍然蔡景龙冯永强李强王一兵
- 关键词：半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3存活素
