湖南省教育厅优秀青年基金(12B029)
- 作品数：3 被引量：16H指数：2
- 相关作者：张何傅昕钱俊覃事栋李久铭更多>>
- 相关机构：湖南工程学院中国科学院吉首大学更多>>
- 发文基金：湖南省教育厅优秀青年基金湖南省自然科学基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：环境科学与工程生物学轻工技术与工程更多>>
- 集成微流体驱动泵的微流控微珠阵列芯片用于基因突变检测的研究被引量：4
- 2013年
- 建立了一种基于微泵集成微流控微珠阵列芯片及三磷酸腺苷双磷酸酶(Apyrase)介导的等位基因特异性延伸的基因突变检测方法。将微流控芯片、引物修饰微珠阵列及基于毛细和蒸发作用的微流体驱动泵集成构建检测芯片,待测目标序列流过装配的微球阵列并与微球表面延伸引物杂交,在Apyrase和去除外切酶活性的Klenow DNA聚合酶协同作用下,引物3'末端碱基与目标序列包含的基因突变检测位点匹配则能够发生延伸,并将生物素化的dCTP掺入到引物的延伸序列中并固定在微球表面,链霉亲和素修饰量子点能与微球表面引物延伸序列中的生物素结合并提供荧光信号,而引物3'末端与目标序列存在单碱基不匹配则不能发生延伸。结果表明:采用这种单碱基识别技术,微泵驱动的芯片内可以检测0.2 pmol/L目标序列(信背比>3),液压驱动的芯片内能识别0.5 pmol/L目标序列,而芯片外检测只能识别0.1 nmol/L目标序列,微泵集成芯片在检测基因突变时其灵敏度较芯片外基因突变分析提高了500倍,并在0.5～30 pmol/L目标序列浓度范围内待测序列浓度与检测信号呈良好的线性关系。测定了一个人基因组样本中多药耐药蛋白基因1(MDR1)的两个多态性位点C3435T及G2677T,结果显示该样本具有3435CT及2677TT的基因型组合,此结果与DNA测序结果一致。本方法用于基因突变分析,具有良好的特异性、灵敏性及稳定性。
- 张何傅昕朱振军
- 关键词：微泵基因突变量子点
- 基于大肠杆菌的全细胞微生物传感器的构建及其在急性生物毒性检测中的应用被引量：10
- 2013年
- 构建了以大肠杆菌为指示生物的全细胞微生物传感器,初步探讨了其在重金属(Cu2+,Zn2+,Pb2+)及其二元联合毒物、农药污染物(莠灭净、乙酰甲胺磷)的急性生物毒性分析中的应用性能。结果表明,基于对数生长后期和稳定期的大肠杆菌微生物传感器具有良好的毒性分析性能。最优实验条件为:E.coli培养16 h,苯醌为电子传递介体,呼吸基质pH 6～8。所测毒物对E.coli的呼吸抑制作用大小顺序为:Cu2+>Zn2+>Pb2+,乙酰甲胺磷>莠灭净,与发光细菌、鱼类、藻类等其它方法检测所得结果一致。这种电化学全细胞生物传感器毒性分析方法具有快速灵敏、成本低廉、操作简单等优点,有望用于水体急性生物毒性的在线监测。
- 钱俊李久铭只金芳覃事栋
- 关键词：微生物传感器大肠杆菌重金属农药
- 模拟肠道环境下肠道益生菌对三种重金属离子的富集作用的研究被引量：2
- 2015年
- 本研究考察了嗜酸乳杆菌、嗜热链球菌、双歧杆菌三种肠道益生菌在模拟肠道环境条件下生长情况及对Cr6+、Cd2+、Pb2+的吸附特性。结果显示:嗜酸乳杆菌对Cr6+有较强的吸附和富集作用,最大吸附率为70%,吸附量为0.0021 mg/g;嗜热链球菌对Cr6+、Cd2+均有较强的吸附和富集作用,最大吸附率分别为50%和62%,吸附量分别为0.0015 mg/g和0.1057 mg/g;双歧杆菌对Cr6+、Cd2+均有较强的吸附和富集作用,最大吸附率分别为66.6%和69.9%,吸附量分别为0.0019 mg/g和0.1298 mg/g;三种肠道益生菌在模拟肠道环境下对Pb2+均无明显吸附作用。
- 张何罗程印傅昕
- 关键词：肠道益生菌肠道环境重金属离子
