目的对广西一位女性个体CD36缺失的分子基础和特征及其基因分布进行研究。方法采用血小板抗原单克隆抗体特异性免疫固定试验（monoelonal antibody immobilization of platelet antigens assay, MAIPA） 和流式细胞技术（flowcytometry，FCM）检测确定广西地区一位汉族女性个体的CD36表型，应用CD36外显子测序、cDNA克隆测序对其cD36缺失发生的分子基础展开研究，构建表达CD36突变基因的细胞株[CD36（MT）细胞株]和表达CD36野生型基因的细胞株[CD36（wT）细胞株]，应用Western印迹检测细胞株CD36蛋白表达情况。建立序列特异性引物聚合酶链反应（polymerase chain reaction-sequence specific primer, PCR-SSP）检测技术对所发现的突变基因进行进一步检测确认，在1010名随机无血缘关系的中国广西健康人中进行该CD36突变基因的多态性调查。结果本研究对象经MAIPA和FCM表型检测结果为Ⅱ型CD36缺失，CD36外显子测序发现其具有T538C（Trp180Arg）突变杂合子，该突变点位于CD36第6外显子，克隆测序发现其CD36cDNA538位点T被c所替代，该突变可导致CD36成熟蛋白氨基酸序列发生Trp180Arg改变。应用所建立的CD36T538CPCR—SSP检测结果显示DNA分型检测结果与测序结果完全一致；Western印迹结果显示CD36在CD36（MT）细胞株上不表达，而在CD36（wT）细胞株上有表达。对1010名中国广西人群进行cD36T538C的基因多态性调查发现该CD36538T和538C等位基因频率分别为1．000和0．000，在本次调查人群中未发现具有538C等位基因的个体。结论发现了一个CD36基因新突变T538C（Trp180Arg）（GenBank：HM217022．1），并建立了鉴定该基因突变的PCR—SSP的技术。该基因新突变是中国广西人群中一个罕见型，可导致Ⅱ型CD36缺失的发生。本研究结果为了解中国地区人群CD36缺失发生的分子基础和特征以及CD36基因新突变T538C的人群调查提供了实验基础�
目的对CD36(GPⅣ)同种抗体介导血小板输注无效(PTR)的4例中国广西病例作确诊试验。方法应用血小板流式细胞荧光免疫检测技术(PIFT-FC)和血小板抗原单克隆抗体特异性免疫固定试验(MAIPA)检测及鉴定4名临床PTR患者血清中的抗-HPA和抗-CD36;以PIFT-FC试验和单核细胞检测流式细胞荧光免疫检测技术(MIFT-FC)检测CD36抗原在患者血小板及单核细胞上的表达情况和作CD36缺失的表现型分型。对患者CD36作基因序列分析和以DNA为基础的PCR-SSP技术鉴定并确认CD36基因突变点,以证实患者CD36的缺失。结果 4名PTR患者体内都含抗-CD36且均为CD36Ⅰ型缺失者,患者CD36基因检测分别为1例380C>T、2例329-330 del AC和1例1156C>T基因突变。结论确诊4例PTR均为抗-CD36介导;提示在临床遇到PTR病例时,鉴于中国人群有较高的CD36缺失率特征,除考虑HPA及HLA等的免疫因素外,应对抗-CD36介导的同种免疫反应而产生的血小板免疫异常予以重视,并给予针对性的诊断和治疗。
