国家自然科学基金(30570954) 作品数:7 被引量:21 H指数:3 相关作者: 崔红平 李睿 苏晶 徐翀 周建强 更多>> 相关机构: 同济大学 同济大学附属东方医院 常州市第三人民医院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 更多>>
常见眼部疾病干细胞治疗进展 被引量:1 2011年 干细胞移植技术作为一种新的疾病治疗手段,近年来受到越来越多关注。在眼科领域,干细胞移植技术同样得到了一定的研究和应用。在治疗眼部疾病,尤其是治疗与血管和神经退化相关的疾病方面,干细胞移植治疗技术发挥着积极的作用。本文对常见眼部疾病干细胞移植治疗的研究进展作一综述。 李睿 崔红平关键词:眼部疾病 干细胞 干细胞移植治疗眼科疾病的研究进展 被引量:4 2011年 干细胞是一类具有自我更新能力,高度增殖及多向分化潜能的特定细胞群体。在诱导培养下,干细胞可以分化成各种具有特定形态,特定功能的成熟细胞。在眼科领域,干细胞移植技术得到了广泛应用,尤其是在治疗视网膜退化疾病例如视网膜色素变性, 李睿 崔红平关键词:干细胞 眼疾病 DispaseⅡ消化法原代培养兔结膜上皮细胞及鉴定 被引量:3 2011年 目的研究DispaseⅡ消化法原代培养兔结膜上皮细胞,观察其体外生长特性,并采用免疫组织化学染色鉴定培养的上皮细胞。方法 DispaseⅡ消化法原代培养兔结膜上皮细胞,观察不同时期细胞的生长情况、细胞形态,做广谱角蛋白、MUC5AC免疫荧光染色及PAS染色鉴定;并比较不同部位结膜上皮细胞增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen,PCNA)表达阳性情况。结果 DispaseⅡ消化法能够获得大量的较纯净的结膜上皮细胞,细胞生长增殖快,能传代4~5代;绝大多数细胞广谱角蛋白免疫荧光染色阳性,少数细胞MUC5AC表达阳性及PAS染色阳性。睑结膜、穹隆部结膜和球结膜细胞PCNA阳性率分别为:(32.14±1.69)%、(27.67±1.20)%、(22.76±1.73)%,兔睑结膜上皮细胞PCNA阳性率较穹隆部及球结膜上皮细胞的PCNA阳性率高,各部位PCNA阳性率间比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论 DispaseⅡ消化法是进行体外结膜上皮细胞培养的理想方法,兔眼睑结膜处可能存在结膜干细胞。 谢秀雯 周建强 崔红平关键词:结膜上皮细胞 原代培养 不同方法体外培养兔结膜上皮细胞的比较研究 被引量:2 2008年 目的比较不同方法体外培养兔结膜上皮细胞的效率,确定体外培养兔结膜上皮细胞的最佳方法,建立兔结膜上皮细胞系,为进一步研究结膜上皮干细胞的鉴别、定位及其增殖分化提供基础。方法分别采用DispaseⅡ消化法、组织块培养法、胰酶/EDTA混合消化法获得兔结膜上皮细胞后进行体外培养,在不同时间观察细胞的形态,并应用免疫组化的方法进行细胞鉴定。结果组织块培养法细胞生长较慢,胰酶/EDTA混合消化法容易有成纤维细胞等污染,DispaseⅡ消化法能够获得大量的较纯净的结膜上皮细胞,细胞生长增殖快,免疫荧光pan-cytoeratin染色阳性,部分细胞MUC5AC染色阳性。结论DispaseⅡ消化法是进行体外结膜上皮细胞培养的最佳方法。 苏莉 崔红平关键词:结膜上皮 细胞培养 免疫组化 兔眼结膜上皮标记保留细胞的研究 被引量:5 2007年 目的检测兔眼结膜上皮细胞对5’-溴脱氧尿嘧啶(BrdU)的标记保留情况,为进一步探索结膜上皮干细胞的定位提供依据。方法实验1组为短期标记保留实验,采用一次性兔腹腔注射BrdU50mg/kg,不同时间间隔免疫组织化学法分析兔眼各部位结膜组织BrdU标记保留细胞。实验2组为长期标记保留实验,连续7d每日注射BrdU50mg/kg,观察6周后兔结膜上皮的BrdU标记阳性细胞。结果实验1组于1、3、5、7d,BrdU标记阳性细胞数量的高峰位置从睑皮肤黏膜交界处向穹隆部移行,所有切片的睑皮肤黏膜交界处均可见较多的BrdU标记阳性细胞。实验2组的结膜上皮BrdU标记阳性细胞主要保留在睑皮肤黏膜交界处。结论短期和长期标记保留实验说明兔眼睑皮肤黏膜交界处可能含有兔结膜上皮干细胞。 崔红平 徐翀关键词:结膜上皮 免疫组织化学 BRDU 腺相关病毒介导增强型绿色荧光蛋白基因体外转染兔结膜上皮细胞 被引量:1 2008年 目的:研究2型重组腺相关病毒(recombinant adeno-associated virus 2,rAAV2)载体介导增强型绿色荧光蛋白基因(enhanced green fluorescent protein,EGFP)对体外培养兔结膜上皮细胞的转染和表达情况,为后续研究提供依据。方法:体外培养兔结膜上皮细胞,rAAV2-EGFP按感染复数(multiplicity of infection,MOI)为104、105、106转染第2代兔结膜上皮细胞,转染后第1、3、5、7日倒置荧光显微镜下观察细胞中EGFP表达情况,计算转染率。MTT方法检测rAAV2-EGFP转染对细胞增殖的影响。结果:随着MOI值增大及转染时间延长,EGFP表达效率逐渐增高,转染后第7~8日达到高峰并维持。MTT检测各MOI组与对照组差别无统计学意义。结论:rAAV2载体可以介导EGFP基因高效稳定转染兔结膜上皮细胞,并且对细胞增殖无影响。 苏莉 崔红平 李艳红 高新蕊关键词:腺相关病毒 绿色荧光蛋白 结膜上皮细胞 大鼠烟曲霉菌性角膜炎模型的建立 被引量:8 2006年 目的建立大鼠烟曲霉菌性角膜炎的动物模型。方法刮除大鼠角膜上皮后,应用自制硬性角膜接触镜,在角膜面与接触镜之间滴入孢子浓度为107、108、109、1010CFU/ml的5种烟曲霉菌悬液及在两者之间直接涂抹培养的烟曲霉菌,建立模型,并进行病理研究。结果菌落直接涂抹法能稳定且简便的建立模型。108CFU/ml为合适的接种浓度。病理染色显示真菌的生长特点。结论应用自制硬性角膜接触镜和合适的接种方法可以成功建立真菌性角膜炎的大鼠动物模型。 苏晶 崔红平关键词:角膜炎 真菌性 烟曲霉菌