兰州军区医药卫生科研基金(LXH-2007006)
- 作品数：8 被引量：14H指数：3
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- 不同剂量X线照射对小鼠细胞免疫功能的影响被引量：3
- 2010年
- 目的研究不同剂量X线照射对小鼠细胞免疫功能的影响。方法:75只8～10周龄BALB/C小鼠随机分为3组:A、B组分别应用直线加速器分别经2Gy和3Gy照射(X线),C组为正常对照组,不接受照射。流式细胞仪测定第1～5周各组动物外周血T细胞亚群(CD_3^+、CD_4^+、CD_8^+)及NK细胞(CD_(16)^+CD_(56)^+)的变化,并对脾及胸腺变化作病理学观察。结果:经照射的小鼠,其外周血T细胞亚群及NK细胞呈进行性降低,至第3、4周开始出现逐渐恢复迹象,4、5周后恢复正常。在同一时间,3 Gy照射较2 Gy照射所导致的细胞亚群降低的程度更为明显(P<0.05)。脾、胸腺在照射后重量减轻并延续至4周才基本恢复至照射前的水平。观察5周各组未出现自然死亡。结论:BALB/C小鼠经照射后细胞免疫功能下降明显,4～5周后免疫功能恢复。
- 王存邦白海葸瑞张茜周进茂吴涛徐淑芬
- 关键词：X线照射免疫功能T细胞亚群
- 混合骨髓移植后过继免疫治疗小鼠白血病被引量：1
- 2011年
- 背景:急性白血病自体造血干细胞移植后复发率高,异基因造血干细胞移植后移植相关病死率高,混合造血干细胞移植及移植后过继免疫治疗有可能取长补短,提高疗效。目的:观察自体骨髓混合H-2半相合异体骨髓移植后供体淋巴细胞输注+白细胞介素2治疗对小鼠白血病的疗效。方法:将Balb/c小鼠经直线加速器照射3Gy后分为白血病模型组、白血病模型照射组、混合移植组、自体骨髓移植组,均尾静脉注射5×105K562(GFP+/NeoR+)或K562(GFP-/NeoR-)细胞。7d后6Gy照射,自体骨髓移植组移植自体骨髓细胞或联合白细胞介素2治疗;混合移植组移植小鼠自体骨髓细胞混合1/10的H-2半相合异体骨髓细胞后应用白细胞介素2或联合供体淋巴细胞输注治疗。4周后行小鼠外周血及骨髓细胞形态检查,外周血细胞亚群、GFP及NeoR基因测定,肝、脾匀浆细胞GFP和NeoR基因测定。结果与结论:白血病模型组小鼠因骨髓造血功能衰竭于20d内全部死亡,白血病模型照射组小鼠因造血功能衰竭于14d内全部死亡;自体骨髓移植组、混合移植组均有多少不等小鼠无白血病存活超过28d,且混合骨髓移植后及自体骨髓移植后应用白细胞介素2治疗可提高白血病小鼠长期无病生存率,在此基础上联合供体淋巴细胞输注可更进一步提高白血病小鼠长期无病生存率。
- 王存邦白海葸瑞张茜周进茂赵强潘耀柱
- 关键词：混合骨髓移植供者淋巴细胞输注白细胞介素2过继免疫治疗
- 应用逆转录病毒载体转染K562细胞株的实验研究被引量：3
- 2008年
- 目的:探讨多种细胞因子联合刺激下,逆转录病毒载体对K562细胞的基因转移效率。方法:以PA317-GCGPXSN细胞制备病毒上清,NIH3T3细胞测定病毒滴度后,取经过SCF、IL-3、IL-6预培养刺激后的K562细胞,实施基因转移,流式细胞仪及PCR方法测定基因转移效率。结果:①病毒滴度为1.9×105CFU/m l;②对照组K562细胞测定的荧光强度数值为0.56%,实验组为77.16%,两者差异有统计学意义(P<0.01)。PCR方法扩增到了NeoR基因的特异性片断。结论:细胞因子预刺激后实施基因转移,可有效地将外源基因转移进入K562细胞基因组中。
- 王存邦白海薛志文杨小亮
- 关键词：K562细胞逆转录病毒载体基因转移
- 小剂量X线对小鼠细胞免疫功能影响被引量：1
- 2010年
- 目的动态观察小剂量X线照射后BALB/C小鼠的细胞免疫功能变化情况。方法75只小鼠分成3组,经2和3 Gy X线照射后,应用流式细胞仪每周测定外周血T细胞亚群及NK细胞,观察5周。结果2Gy照射后1周,小鼠外周血CD3+、CD4+、CD8+、CD1+6CD5+6细胞降至24.76±1.87,22.87±1.71,1.07±0.07,4.64±0.78(P<0.05),并呈进行性降低,至第3周开始恢复,第4周恢复正常;3Gy照射后1周,小鼠外周血CD3+、CD4+、CD8+、CD1+6CD5+6细胞分别降至4.11±0.21,2.33±0.91,0.17±0.07,2.33±0.18(P<0.01),并呈进行性降低,至第4周开始恢复,第5周恢复正常;在同一时间,3Gy照射较2Gy照射所导致的细胞亚群降低的程度更为明显(P<0.05)。结论BALB/C小鼠经小剂量X线照射后细胞免疫功能下降明显,4～5周后可恢复正常。
- 王存邦白海葸瑞徐淑芬张茜周进茂吴涛谵台林芳
- 关键词：BALB/C小鼠照射T细胞亚群NK细胞
- 应用X线照射后的Balb/c小鼠制备白血病模型的方法学研究被引量：2
- 2011年
- 目的:探索用SPF级Balb/c小鼠经X线照射后,尾静脉注射转染GFP及NeoR基因的K562细胞株以制备白血病模型的方法。方法:实验组小鼠分别经X线照射2Gy和3Gy,24小时后取对数生长期的K562(GFP+/Neo+)细胞尾静脉注射2×106个/只。对照组不予特殊处理。结果:实验组在接种5-7天时发病,分别于30、24天内全部死亡;生存天数显著短于对照组(P<0.01)。体重较对照组显著下降(P<0.05)。小鼠的白血病发病率为100%,无自发缓解。随照射剂量的增加,小鼠的存活时间缩短,且外周血及骨髓中白血病细胞所占比例增加。流式细胞仪测定及PCR方法也证实了GFP+细胞和NeoR基因在外周血、骨髓、肝、脾中的存在。结论:Balb/c小鼠经照射后从尾静脉注射K562细胞株可以获得白血病模型。
- 王存邦白海葸瑞钱震张茜
- 关键词：K562细胞绿色荧光蛋白基因BALB/C小鼠
- 应用含标记基因K562细胞制备的小鼠白血病模型被引量：3
- 2010年
- 背景：文献报道应用NOD/SCID及SCID小鼠可以建立移植性人白血病小鼠模型,但由于小鼠存在免疫缺陷,使得在自体干细胞移植及移植后相关过继免疫治疗方面的研究受到限制和影响。目的：探索用SPF级Balb/c小鼠和转染GFP及NeoR基因的K562细胞株制备白血病模型的方法。方法：实验分为5组,A、B组和C、D组分别经X射线照射2Gy和3Gy,24h后取对数生长期的K562（GFP＋/Neo＋）细胞,A、C组尾静脉注射2×106个/只;B、D组尾静脉注射5×106个/只;E组为正常对照组。观察小鼠生存时间,进行骨髓细胞及外周血白细胞分类,采用流式细胞仪测定GFP阳性细胞及PCR方法测定Neo基因。结果与结论：实验各组在接种5~7d时发病,分别于30,23,24,17d内全部死亡;生存天均显著短于正常对照组（P〈0.01）。体质量均较正常对照组显著下降（P〈0.05）。小鼠的白血病发病率为100%,无自发缓解。随接种细胞数量的增加和照射剂量的增加,小鼠的存活时间缩短,且外周血及骨髓中白血病细胞所占比例增加。流式细胞仪测定及PCR方法也证实了GFP＋细胞和NeoR基因在肝、脾中的存在。结果证实Balb/c小鼠经照射后从尾静脉注射K562细胞株可以制备获得白血病小鼠模型。
- 王存邦白海葸瑞钱震张茜
- 关键词：绿色荧光蛋白基因K562细胞BALB/C小鼠
- 直线加速器小剂量X线照射对BALB/c小鼠T细胞亚群影响的动态观察研究被引量：3
- 2010年
- 目的：观察小剂量X线照射对BALB/c小鼠T细胞亚群的影响。方法：小鼠按实验分组经直线加速器2和3 Gy X线照射,流式细胞仪动态测定T细胞亚群变化。结果：照射后,小鼠外周血CD3＋、CD4＋、CD8＋细胞呈进行性降低,至第3、4周出现逐渐恢复迹象,4、5周后恢复正常。在同一时间,3 Gy较2 Gy照射所导致的细胞亚群降低的程度更为明显（P〈0.05）。结论：BALB/c小鼠经照射后T细胞亚群下降明显,4~5周后恢复正常。
- 王存邦白海葸瑞薛志文
- 关键词：直线加速器照射BALB/C小鼠
- 混合造血干细胞移植联合DLI-IL-2治疗急性髓性白血病的疗效被引量：1
- 2011年
- 目的:探讨急性髓性白血病(acute myelogenous leukemia,AML)患者采用自体外周血干细胞混合HLA半相合异体骨髓移植(autologous peripheral blood stem cell mixed with HLA haploidentical allogeneic bone marrow transplantation,Mixed-HSCT)联合供体淋巴细胞输注+白介素2(donor lymphocyte infusion combined interleukin-2,DLI-IL-2)治疗的疗效。方法:采用联合治疗方案的试验组23例AML患者中男性15例、女性8例,中位年龄22(17～41)岁;采用单纯移植治疗的对照组14例AML患者中男性10例、女性4例,中位年龄21(19～40)岁。两组患者在完全缓解期采用TBI+VEMAC方案预处理,对照组患者接受单纯Mixed-HSCT移植,试验组患者接受Mixed-HSCT且造血重建后继续DLI-IL-2治疗1～8次;各组在治疗前后进行染色体核型分析及骨髓检查。随访时间>3年。结果:两组患者均获得造血重建,无移植物抗宿主病(graft-versus-host disease,GVHD)发生。试验组有6例形成混合嵌合体(46XX/46XY),随访显示存活15例,长期无病存活率(disease-free survival,DFS)为65.2%;对照组有3例形成混合嵌合体(46XX/46XY),随访显示存活7例,DFS为50.0%。两组患者治疗后的不良反应(口腔溃疡、出血性膀胱炎、发热等)相似。结论:Mixed-HSCT联合DLI-IL-2治疗对AML患者长期无病生存有积极意义,无严重不良反应。
- 王存邦白海葸瑞潘耀柱张茜周进茂吴涛徐淑芬
- 关键词：急性髓性白血病供者淋巴细胞输注白介素-2
