国家自然科学基金(31072109)
- 作品数：11 被引量：13H指数：2
- 相关作者：金天明孙颖李留安高静龙雨清更多>>
- 相关机构：天津农学院广东省农业科学院吉林大学更多>>
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- 基于单壁金属有机纳米管(SWMONTs)的药物传递系统（英文）
- 2016年
- 功能化单壁金属有机纳米管(SWMONTs)可以装载抗癌药物5-氟尿嘧啶(5-FU).材料表征结果表明,药物与SWMONTs的存在比例为每1.0 g载体SWMONTs中含有0.33 g的5-FU.释放曲线表明,在PBS缓冲液(p H=7.4)中24 h释放量为79.6%,而在缓冲液(p H=5.7)中24 h释放量为75%.细胞4T1和RAW264.7被用于细胞毒性实验.2种癌细胞的最高致死率均发生在最高实验浓度的载药体系(5FU@SWMONTs)处理时间最长的样品中.结果表明,5FU@SWMONTs对癌细胞的毒性会因为SWMONTs组分的存在而增强.
- 杨琳燕龙雨清路垚艾霞马吉飞金天明
- 关键词：药物传递细胞增殖
- 利用E.coli-App穿梭载体构建温控双基因裂解载体pMC-WK被引量：3
- 2011年
- 采用PCR方法从噬菌体PhiX174基因组中扩增出裂解蛋白E基因,从金黄色葡萄球菌基因组中扩增出核酸酶A基因(SN),通过15个柔性氨基酸linker将双基因串联,插入PBV220表达载体,构建温控双基因裂解系统(DLS)。PCR扩增DLS,将其与E.coli-App穿梭载体pMC-Express相连,构建重组穿梭载体pMC-WK。裂解试验表明,E-15aalinker-SN裂解较E裂解迅速而彻底,菌体裂解率达到99.999 4%;经PCR扩增出的DLS具有裂解活性。本试验成功构建了温控双基因裂解载体pMC-WK,为App菌影疫苗的研究奠定了基础。
- 孙颖金天明冯立文袁洁
- 关键词：穿梭载体
- TRAIL和HN基因融合表达重组腺病毒的构建及其对DT40细胞的抑瘤作用
- 2012年
- 分析携TRAIL和HN基因的重组腺病毒在DT40细胞中的表达规律及杀伤肿瘤细胞的生物学效应。通过RT-PCR分别从鸡外周血淋巴细胞和新城疫病毒(NDV)LaSota株中扩增出TRAIL和HN基因,通过定点突变和重叠延伸拼接法实现TRAIL和HN基因的2A连接,将获得的目的基因克隆到pShuttle-CMV穿梭载体中,与pAdeasy-1载体在BJ5183细菌内同源重组,构建了包含目的基因的重组腺病毒质粒pAd-TRAIL和pAd-TRAIL-2A-HN,将质粒线性化后转染AD293细胞,包装后的重组腺病毒,经RT-PCR检测、荧光显微镜观察和病毒滴度测定后,将获得的重组腺病毒体外转染禽淋巴白血病DT40细胞,通过RT-PCR和Western blotting检测重组腺病毒的感染性和外源基因的表达情况,采用流式细胞仪检测重组腺病毒对DT40细胞生长的影响以及Ad-TRAIL和Ad-TRAIL-2A-HN对DT40细胞的凋亡作用。PacⅠ酶切证实同源重组成功;RT-PCR、荧光显微镜检测证实重组腺病毒质粒成功导入AD293细胞中且具有良好的感染性,滴度为1.9×1010PFU/mL;Western blot检测结果显示,TRAIL-linker-HN基因能够在DT40细胞中稳定表达并对DT40细胞产生细胞毒作用,且诱导细胞的凋亡率为29.52%,表明TRAIL-linker-HN具有双基因抑瘤的协同效应。
- 高静孙颖金天明
- 关键词：重组腺病毒抑瘤作用
- 融合表达cLYZ基因和hLTF基因重组腺病毒的构建
- ＜正＞引言鱼类的C型溶菌酶（c LYZ）广泛分布于鱼的体液、组织和器官中,由于水生动物的特异性免疫系统还不完善,其溶菌酶具有更强的杀菌活性,不仅可以溶解革兰氏阳性菌,还可以溶解革兰氏阴性菌,它是通过分解细菌细胞壁中N-乙...
- 弓建芳张东超龙雨清李萌李小慧高珂珂金天明
- 低温应激对小鼠不同组织脂质过氧化状态的影响被引量：5
- 2011年
- 为了研究低温应激对小鼠不同组织脂质过氧化状态的影响,试验选择健康清洁级昆明白小鼠40只,随机分为对照组和应激组,每组20只。采集对照组和经过-20℃处理120 min的低温应激组组织样品,测定丙二醛(MDA)含量和超氧化物歧化酶(SOD)活性。结果表明:与对照组相比,应激组小鼠肝脏、肾脏MDA含量显著升高(P<0.05),心肌、肺脏MDA含量有上升的趋势(P>0.05),腿肌MDA含量无明显变化(P>0.05);应激组小鼠肝脏、肾脏和肺脏SOD活性显著降低(P<0.05),心肌SOD活性有下降的趋势(P>0.05),腿肌SOD活性无明显变化(P>0.05)。说明冷应激对小鼠组织脂质过氧化反应的影响具有组织差异性特点,即对肝脏和肾脏影响最大,肺脏次之,心肌和腿肌最小。
- 李留安金天明杜亮亮邸文李思雨石杰王义
- 关键词：小鼠脂质过氧化超氧化物歧化酶(SOD)
- 肉鸡禽呼肠孤病毒与巴氏杆菌混合感染的鉴别诊断
- <正>研究目的本研究旨在对临床发现的河北某规模鸡场疑似禽呼肠孤病毒和巴氏杆菌混合感染的病死肉鸡进行诊断,为临床上诊断和控制该疫病提供借鉴。材料方法病料采自2014年11月河北某规模鸡场4周龄左右的病死肉鸡。根据发病鸡的流...
- 张东超龙雨清李萌李小慧弓建芳高珂珂金天明
- 文献传递
- 融合表达cLYZ基因和hLTF基因重组腺病毒的构建
- <正>引言鱼类的C型溶菌酶(c LYZ)广泛分布于鱼的体液、组织和器官中,由于水生动物的特异性免疫系统还不完善,其溶菌酶具有更强的杀菌活性,不仅可以溶解革兰氏阳性菌,还可以溶解革兰氏阴性菌,它是通过分解细菌细胞壁中N-乙...
- 弓建芳张东超龙雨清李萌李小慧高珂珂金天明
- 文献传递
- 装载温控双基因裂解质粒的App菌影检测方法研究
- 2013年
- 为了提高对前期试验中制备的胸膜肺炎放线杆菌(App)菌影的检测效率,试验通过形态学鉴定、电镜扫描、PCR鉴定和间接ELISA法对App及其菌影进行检测。结果表明:PCR检测方法特异性显著,可检测AppⅠ、pMC-WK AppⅠ及其裂解情况,具有准确、灵敏、容易操作等优点。说明将菌影的形态学检查、电镜扫描、PCR和血清学检测相结合,可准确检验试验中不同阶段的App及其菌影。
- 魏延宏徐良李媛孙颖刘颖孙铭君宋桂敏金天明
- 关键词：间接ELISA
- 糖皮质激素对肾上腺合成皮质醇的调节被引量：1
- 2011年
- 糖皮质激素对动物的肾上腺皮质细胞分泌能力有着不同的影响,既有增强作用又有抑制作用,既有直接作用又有间接作用,且表现出动物种属间的差异性。这种调节作用只有通过与其受体结合才能得以发挥,母体的高糖皮质激素环境会影响胎儿的肾上腺轴功能和肾上腺皮质的分泌能力。文章就近年来糖皮质激素对肾上腺皮质合成皮质醇的调控作用进行了综述,以期为深入研究肾上腺皮质醇合成机理及指导畜牧业生产实践提供参考。
- 李留安吴展望金天明
- 关键词：糖皮质激素肾上腺轴
- 融合表达TM-1基因和gD基因重组腺病毒的构建及其免疫效果初步评价
- 2018年
- 为研究鸡毒支原体病和鸡传染性喉气管炎2种禽类接触性呼吸道传染病二联基因工程活载体疫苗，试验中选取鸡毒支原体TM-1基因和鸡传染性喉气管炎gD基N，经鉴定获得阳性pMD-TM-1和pMD-gD克隆质粒，酶切胶回收目的基因后分别克隆至穿梭载体构建重组pDC315-TM-1、pDC315-g D和pDC315-TM1-gD。将构建成功的重组穿梭载体和骨架质粒同时转染293细胞，经荧光显微观察、RT-PCR和Western blot检测，成功包装出能表达TM-1蛋白、gD蛋白和TM-1-gD融合蛋白的重组腺病毒pBH-TM-1、pBH-gD和pBH-TM-1-gD。Vivapure AdenoPACKTM法纯化病毒粒子，以TCID50法确定pBH-EGFP、pBH-TM1、pBH-gD和pBH-TM-1-gD的滴度分别为10T10 TCID50／mL、10^10.125 TCID50／mL、10^9.75 TCID50／mL、10^10.25 TCID50／mL，符合后续动物试验所需滴度要求。动物试验肌内免疫SFP雏鸡结果显示：重组腺病毒pBH-TM-1-gD组与常规疫苗组免疫效果无显著性差异（P〉0．05），可以成为一种替代抗生素的生物治疗方式。
- 李小慧高珂珂张东超弓建芳林静李昕孟佳丽尚翠玲金天明
- 关键词：TM-1基因GD基因重组腺病毒免疫效果
