安徽省高校省级自然科学研究项目(KJ2013A203)
- 作品数：6 被引量：6H指数：2
- 相关作者：刘生杰余为一倪庆胜吴超朱茂英更多>>
- 相关机构：阜阳师范学院安徽农业大学桓台县林业局更多>>
- 发文基金：安徽省高校省级自然科学研究项目国家自然科学基金安徽省科技攻关计划更多>>
- 相关领域：农业科学生物学文化科学更多>>
- 鸡和疣鼻栖鸭Ia-相关的恒定链交叉免疫原性研究
- 2015年
- 目的探索鸡和疣鼻栖鸭Ia-相关的恒定链(CIi和MDIi)的交叉免疫原性。方法用间接ELISA检测抗CIi小鼠血清与原核表达MDIi的反应性、抗MDIi小鼠血清与原核表达CIi的反应性;通过荧光免疫组织化学法鉴定抗CIi小鼠血清与疣鼻栖鸭脾组织MDIi的荧光反应强度、抗MDIi小鼠血清与鸡肝组织CIi的荧光反应强度。结果抗MDIi小鼠血清与原核表达CIi的反应滴度为1∶8000,抗CIi小鼠血清与原核表达MDIi的反应滴度为1∶16 000;采用抗MDIi小鼠血清、抗CIi小鼠血清进行免疫荧光组织化学染色,均能检测异种鸟类组织内的Ii抗原,但荧光染色强度均弱于同种鸟类Ii抗原组织的荧光反应强度。结论 CIi和MDIi具有交叉免疫原性,CIi和MDIi的序列保守性是形成共同抗原表位的分子基础,从免疫学角度揭示了鸟类Ii的高度保守性。
- 刘生杰陈德宇张秋妍叶红朱茂英
- 关键词：ELISA共同抗原
- 疣鼻栖鸭恒定链(MDIi)多克隆抗体制备及鉴定被引量：2
- 2014年
- 目的制备抗疣鼻栖鸭恒定链(MDIi)多克隆抗体,鉴定其与组织抗原MDIi的反应性。方法以PCR扩增获得MDIi序列构建原核表达载体pET-32a/MDIi,转化大肠杆菌进行表达;对表达产物鉴定后,免疫小鼠制备抗MDIi多克隆抗体;间接ELISA测定抗体效价,Western blot鉴定抗体特异性,间接ELISA检测抗体与疣鼻栖鸭组织MDIi的反应强度。结果成功构建了pET-32a/MDIi原核表达载体,诱导表达了相对分子质量(Mr)约40 000的包涵体形式的MDIi重组蛋白,免疫小鼠获得效价为1∶128 000的特异性多克隆抗体,抗体与疣鼻栖鸭组织中的MDIi反应滴度为1∶32 000。结论成功制备了高效价的特异性抗MDIi多克隆抗体,抗体与组织抗原有较强的免疫反应性。
- 刘生杰朱茂英陈德宇吴超倪庆胜余为一
- 关键词：多克隆抗体组织抗原
- 康氏木霉HEX1蛋白的原核表达及纯化被引量：3
- 2014年
- 【目的】对康氏木霉HEX1蛋白进行原核表达和纯化,为进行抗体制备及深入研究HEX1功能奠定基础。【方法】采用RT-PCR方法扩增康氏木霉hex1基因,构建pMD19-T-hex1重组克隆质粒,在此基础上构建pET28a-hex1表达载体,转化E.coli BL21(DE3)细胞。通过IPTG诱导表达,对重组HEX1蛋白进行可溶性分析、纯化及鉴定。【结果】成功克隆了长660bp的hex1基因并构建了融合表达载体,HEX1蛋白在IPTG诱导下得到表达。融合蛋白主要以包涵体形式存在,能与抗His标签的兔多克隆抗体发生特异性反应,并纯化出了融合表达蛋白。【结论】康氏木霉HEX1蛋白在原核细胞中得到成功表达及纯化,获得了分子质量约为25ku的重组蛋白。
- 唐俊陆娟许惠芬陈捷
- 关键词：康氏木霉原核表达蛋白纯化
- 鸡MHCⅠα和β2m的原核表达与多克隆抗体的制备被引量：1
- 2016年
- 为制备MHCⅠ基因工程疫苗的基础材料,构建了鸡MHCⅠ分子重组质粒并进行原核表达,进而制备鸡MHCⅠ分子的多克隆抗体。应用PCR方法,克隆鸡MHCⅠα和β2m基因,构建重组载体pETMHCⅠα和pET-MHCⅠβ2m,经PCR、双酶切和测序鉴定后,将重组质粒在大肠埃希菌Rosetta中进行诱导表达,融合蛋白纯化后,接种昆明小鼠制备多克隆抗体,血清稀释后用免疫印迹法(Western blot)分析。结果表明,鸡MHCⅠα和β2m基因在大肠埃希菌中成功表达,融合蛋白分子质量分别约为52.1ku和33.0ku;制备的鼠抗鸡MHCⅠα和β2m链多克隆抗体,经Western blot检测证实抗体特异性较强,可进一步用于鸡MHCⅠ分子的研究。
- 戴银王承志刘生杰沈学怀赵瑞宏胡晓苗张丹俊
- 关键词：原核表达多克隆抗体
- 立足皖西北申报食品质量与安全专业的思考
- 2014年
- 从食品质量与安全专业在安徽省的布局特点出发,结合皖西北经济形势和阜阳师范学院信息工程学院的办学特点,分析学校开设食品质量与安全专业的必要性、紧迫性及办学优势,为学校申报食品质量与安全专业及后续专业建设提供参考。
- 刘生杰程向阳王津津王军张军
- 关键词：食品质量与安全专业皖西北
- 鸳鸯鸭恒定链两异构体组织转录模式研究被引量：1
- 2014年
- 为探索鸳鸯鸭恒定链(MDIi)两种异构体MDIi-1和MDIi-2在不同组织或器官中的转录模式,建立了检测MDIi-1和MDIi-2组织转录的实时相对定量PCR方法,检测并分析了MDIi-1和MDIi-2在不同组织或器官中的转录特点。结果显示MDIi-1在法氏囊底部的转录水平为各组织或器官中最低(设为校正器);和校正器比较,MDIi-1在脾和小肠黏膜呈最高水平转录,而法氏囊颈部、肝、肾、胸腺和血液也呈较高水平转录,其他器官均低水平转录;MDIi-2在脾、法氏囊颈部和小肠黏膜也呈超过校正器的高水平转录,胸腺、肺和肾的转录水平仅略低于校正器,其他组织或器官转录水平都远低于校正器,呈极低水平转录。同一组织或器官中MDIi-1转录水平远高于MDIi-2,但MDIi-1和MDIi-2在所有被检组织或器官中转录具有很高的相关性,相关性系数达0.850 7。MDIi-1和MDIi-2共转录于所有被检组织或器官中,每一组织或器官中MDIi-1是主要转录形式,在所有被检组织或器官中两异构体均高转录于具有免疫防御功能的器官或组织,MDIi-1和MDIi-2差异性转录的试验结果为后续两异构体功能机制和基于MDIi的基因疫苗研究提供了基础资料。
- 刘生杰吴超倪庆胜余为一
- 关键词：鸳鸯鸭异构体
