浙江省科技厅项目(2008C32035)
- 作品数：2 被引量：4H指数：1
- 相关作者：王忠发顾松叶施慧更多>>
- 相关机构：浙江省舟山市疾病预防控制中心浙江省海洋水产研究所更多>>
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- 相关领域：农业科学医药卫生更多>>
- 快速荧光定量RT-PCR定量检测对虾Taura综合症病毒(TSV)的方法建立与应用
- 目的建立桃拉综合症病毒快速荧光定量RT-PCR用于提高我市对虾出口检验检疫工作效率和疫病防控。方法选取TSV基凶组的保守序列,利用Primer Express 2.0软件设计引物和探针,扩增产物长度为73bp。构建TSV...
- 王忠发顾松叶施慧沈飚
- 关键词：TAURA综合征病毒
- 文献传递
- 快速荧光定量RT-PCR检测对虾Taura综合征病毒(TSV)的方法建立与应用被引量：3
- 2011年
- 目的:建立桃拉综合征病毒快速荧光定量RT-PCR用于提高我市对虾出口检验检疫工作效率和疫病防控。方法:选取TSV基因组的保守序列,利用Primer Express 2.0软件设计引物和探针,扩增产物长度为73 bp。构建TSV目的扩增片段的质粒为标准品,对TSV的核酸提取、RT-PCR进行优化。结果:TSV核酸提取20 min、RT-PCR34 min,检测灵敏度为0.03 fg/μl,组内的实验变异系数为0.25%～1.17%、组间实验变异系数为1.51%～2.60%,与10种病原微生物无非特异反应,定量标准曲线相关系数=-1。结论:本方法用于TSV核酸定量检测速度极快,灵敏度与特异度高、重复性好、定量准确,各项指标均优于标准方法。
- 顾松叶王忠发施慧沈飚
- 关键词：TAURA综合征病毒RT-PCR
- 病原体RNA和DNA同步聚合酶连反应的方法建立与应用被引量：1
- 2012年
- 目的:建立一种可同步检测病原体RNA或DNA的荧光定量RT-PCR方法,以提高突发公共卫生快速检测能力。方法:通过与经典荧光定量PCR的比对来验证新建立的方法能否同步扩增RNA和DNA以及对DNA的扩增效果。结果:新建立的方法可同步扩增RNA和DNA,扩增所需时间为35分钟,扩增曲线呈典型的"S"型,扩增效率E值均在理想值范围(0.916、0.923)、均在理想值范围(相关系数均可达到"1"),重复性良好(s均≤0.34、cv均≤1.13%),扩增灵敏度相同(平均ct值误差分布在0.02～0.25之间,t值分布在0.17～2.50之间,P均>0.05)。结论:新建立的方法可同步检测6种不同核酸类型的病原体,检测时间明显缩短,检测效果与经典荧光定量PCR相同。
- 王忠发
