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hVEGF_(121)与βhCG融合蛋白的克隆、分离纯化与初步鉴定被引量：2: 2014年; 构建一种新型抗肿瘤融合蛋白疫苗,包含hVEGF121和βhCG抗原表位,并探索融合蛋白的纯化条件和方法。采用PCR方法,克隆VEGF和βhCG基因,并通过限制性内切酶NcoⅠ、EcoRⅠ和HindⅢ将两个基因逐个插入pET-28a(+)质粒中,利用质粒自带的卡那霉素抗性筛选出阳性克隆,获得重组基因的表达载体。对重组菌进行乳糖诱导表达后,通过超声破碎,硫酸铵分级沉淀,阴离子交换层析等方法进行融合蛋白的分离纯化,Western-blot鉴定。测序结果表明成功构建重组载体pET-28a-VEGF-M2-X10-βhCG-CTP37,重组基因长993 bp,编码331个氨基酸残基。SDS-PAGE显示,经乳糖诱导,Escherichia coli BL21(DE3)重组菌表达hVEGF121-M2-X10-βhCG-CTP37多肽,约占菌体总蛋白量的35%。融合蛋白经分离纯化后纯度可达到电泳纯,约占蛋白冻干粉的80%。结论:克隆、测定了融合蛋白基因,并在Escherichia coli BL21(DE3)中诱导表达hVEGF121-M2-X10-βhCG多肽,同时成功分离纯化此多肽。; 曹荣月宦晓军孙翁李盼郑梅赵鹤杨梦琪龙军张晓红; 关键词：ΒHCG 克隆分离纯化融合蛋白

真核表达载体pcDNA3.1(+)-GFP-M2的构建及在小鼠骨髓树突状细胞中的表达被引量：1: 2014年; 为了构建含有绿色荧光蛋白(Green fluorescent protein,GFP)报告基因的M2真核表达载体pcDNA3.1(+)-GFP-M2(2段热休克蛋白70表位序列407-426,mHSP70407-426,M2),探讨M2基因转染小鼠骨髓树突状细胞(Dendritic cell,DC)的表达情况。采用4轮PCR方法从pcDNA3.1(+)-GFP载体中将GFP编码序列扩增出来,并在其上游引入Kozak序列,下游引入M2序列,使用限制性内切酶HindIII和BamHI将目的片段插入到pcDNA3.1(+)中,利用质粒自带的氨苄青霉素抗性筛选出阳性克隆,获得重组基因的表达载体。重组载体通过转染试剂Lipofectamine2 000转染至DC中,通过倒置荧光显微镜观察绿色荧光蛋白在细胞内的表达。构建的pcDNA3.1(+)-GFP-M2经双酶切、PCR和测序鉴定和预期结果一致。荧光显微镜观察显示在转染pcDNA3.1(+)-GFP-M2基因的树突状细胞中,荧光均匀地分布于整个细胞。成功构建含有绿色荧光蛋白报告基因的M2真核表达载体pcDNA3.1(+)-GFP-M2。M2基因成功转染至树突状细胞中。; 曹荣月孙翁陈檬杨梦琪宦晓军肖芳李盼龙军; 关键词：真核表达载体树突状细胞 KOZAK序列

聚乙二醇修饰靶向纳米制剂的研究进展被引量：10: 2017年; 由于聚乙二醇具有良好的亲水性和柔顺性,能够改善药物的药代动力学和药效学特性,将其修饰到靶向纳米制剂表面能够增加药物在体内的滞留时间和浓度,因此聚乙二醇修饰靶向纳米制剂已成为目前药剂学领域的研究热点。本文总结了靶向纳米制剂的聚乙二醇物理和化学修饰方法,将聚乙二醇-脂质衍生物物理插入纳米制剂,或将聚乙二醇与纳米制剂化学键合;并探讨了聚乙二醇参数(如聚乙二醇相对分子质量、修饰密度、空间构象)对靶向纳米制剂性质的影响,对更好地构建聚乙二醇修饰的靶向纳米制剂提供参考。; 刘源周建平王伟; 关键词：聚乙二醇修饰共价结合参数优化

基于安卓平台的翻转课堂教学模式探析被引量：2: 2013年; 阐述了翻转课堂的起源、内涵,探讨了翻转课堂发展的基础,分析了翻转课堂在应用中面临的挑战,并提出了应当注意的问题。; 侍松门黄伶俐高珊珊; 关键词：教学模式

基于焦磷酸测序技术的基因突变检测在精准医疗中的应用研究进展被引量：4: 2015年; 基因突变检测在肿瘤等疾病的早期诊断、个体化给药指导、疾病治疗进程与耐药监控等方面具有极其重要的意义。随着测序技术的不断发展,DNA突变的检测与分析已为病毒感染、血液病和实体瘤等疾病的个体化诊治提供重要参考。焦磷酸测序技术是一种基于生物发光法测定焦磷酸盐的实时DNA测序技术,其用于DNA序列分析时不需电泳和荧光标记,定量性能好,结果准确,易于实现自动化,在基因突变检测分析与肿瘤等疾病诊治中发挥巨大作用。综述基于焦磷酸测序技术的基因突变检测在分子靶向个体化治疗和疾病诊断中的应用研究进展。; 李靖轩金益如徐吟秋宋沁馨周国华; 关键词：焦磷酸测序基因突变个体化治疗疾病诊断

基于微生物生物合成纳米颗粒机制的研究进展被引量：6: 2014年; 纳米粒子的合成方法多种多样,包括物理法、化学法和生物合成法,其中生物合成法是以生物为基体的绿色合成方法。由于微生物易于培养、生长快、廉价易得,已成为纳米粒子生物合成法的重要生物类群。微生物和纳米材料的多样性决定了其合成机制的多样化。本文结合国内外的科研报道,着重介绍了目前纳米粒子生物合成机制,并对纳米粒子微生物合成技术未来发展趋势进行了展望。; 吴盛美苏义龙马丽雅陈思李姝宜慕升君张俊霞严拯宇; 关键词：量子点微生物

免疫共刺激分子增强自噬小体疫苗诱导的T细胞应答: 2016年; 自噬小体疫苗DRibble被证实可以有效诱导小鼠和人T细胞应答,为了进一步增强DRibble疫苗诱导人T细胞应答的能力,本研究将免疫共刺激分子OX40、CD80和对照质粒分别转染至表达CMV pp65蛋白的LT3-pp65细胞系中,制备3种类型的DRibble疫苗为:Ctrl/pp65 DRibble、OX40/pp65 DRibble和CD80/pp65 DRibble。通过ELISA法检测不同DRibble疫苗诱导树突状细胞表达IL-12的水平,结果显示,OX40/pp65 DRibble和CD80/pp65 DRibble诱导树突状细胞表达IL-12的水平显著高于Ctrl/pp65 DRibble。进一步将3种DRibble疫苗分别刺激树突状细胞后与扩增的CMV特异性T细胞共培养,通过流式细胞术检测表达IFN-γ的T细胞占总T细胞的百分比。实验结果显示,与Ctrl/pp65 DRibble相比,OX40/pp65DRibble和CD80/pp65 DRibble诱导CD8+T细胞表达IFN-γ的能力显著增高,OX40/pp65 DRibble和CD80/pp65 DRibble诱导CD4^+T细胞表达IFN-γ的水平也显著高于Ctrl/pp65 DRibble。实验证明免疫共刺激分子OX40和CD80修饰均可以加强DRibble疫苗体外诱导人T细胞应答的能力。; 邢芸周镇先苗梓韬李曼曼曹荣月龙军; 关键词：OX40 CD80 T细胞应答体外

姜黄色素聚电解质纳米粒大鼠体内药动学研究: 2014年; 目的研究姜黄色素聚电解质纳米粒(CUR-PENPs)经大鼠尾静脉注射后的体内药代动力学。方法通过静电吸附法制备CUR-PENPs并对其表征;以姜黄色素(CUR)溶液为对照,研究大鼠尾静脉注射CUR-PENPs的体内药动学。结果透射电镜观察CUR-PENPs呈较规则类球体,平均粒径为(243.0±1.1)nm,Zeta电位为(-28.13±1.41)mV,载药量为5.5%。大鼠尾静脉注射CUR-PENPs的血药浓度-时间曲线下面积(AUC)为CUR溶液3.3倍,血浆清除率(CL)降为CUR溶液的27.8%。结论 CUR-PENPs能相对延长CUR体内滞留时间,提高药物AUC。; 杨柳刘桂花宋珏王璇平其能肖衍宇张灿; 关键词：姜黄色素药动学

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国家基础科学人才培养基金(J1030830)