中国科学院脊椎动物进化系统学重点实验室开放课题基金(2010LESV009)
- 作品数:2 被引量:2H指数:1
- 相关作者:赖旭龙盛桂莲吴恋娟双小燕伊剑更多>>
- 相关机构:中国地质大学更多>>
- 发文基金:中国科学院脊椎动物进化系统学重点实验室开放课题基金国家自然科学基金中央高校基本科研业务费专项资金更多>>
- 相关领域:生物学天文地球更多>>
- 古DNA实时荧光定量PCR实验中标准品的制备被引量:2
- 2010年
- 实时荧光定量PCR技术通过对PCR每一循环扩增产物的实时检测,可对模板的精确拷贝数进行绝对定量,从而用于古DNA实验中提取和扩增条件的比较和优化.本研究采用异硫氰酸胍碱裂解-SiO2吸附的方法,从采自黑龙江省的晚更新世斑鬣狗化石材料中提取得到了斑鬣狗线粒体基因组古DNA.经常规PCR扩增后,将纯化的扩增产物克隆到微生物体内使其大量复制,再用M13通用引物扩增出含少量外源DNA的古DNA目标片段,从而建立了适用于古DNA荧光定量PCR扩增的标准品的制备方法.经检测分析,运用该方法制备的标准品性质稳定,能够准确地指示反应体系中较为精确的古DNA模板拷贝数,从而反映古DNA的提取和扩增效率,用于比较并优化古DNA提取和扩增条件.
- 盛桂莲吴恋娟赖旭龙
- 关键词:古DNA实时荧光定量PCR标准品
- 辽宁海城小孤山披毛犀化石的古DNA分析
- 2012年
- 从采自辽宁省海城县小孤山晚更新世披毛犀化石样品中成功地获得了1 080bp细胞色素b基因序列,调用Genbank中已发表的披毛犀序列及5种现生犀牛的同源序列,以马作为外类群,采用邻接法(NJ法)和最大似然法(ME法)构建系统发育树,结果均显示披毛犀与现生苏门答腊犀亲缘关系最近,且辽宁省海城县小孤山样品处于披毛犀分支的根部;对披毛犀样品进行基因分异度分析结果表明,小孤山的披毛犀样品具有较高的基因分异度,为探讨披毛犀的起源、迁徙及演化等问题提供了重要的分子依据。
- 双小燕袁俊霞侯新东盛桂莲伊剑赖旭龙
- 关键词:披毛犀古DNA系统发育分析晚更新世