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柔嫩艾美耳球虫5-磷酸脱氧木酮糖还原异构酶基因的克隆与表达: 为研究柔嫩艾美耳球虫(E.tenella)类异戊二烯合成途径的关键酶,5-磷酸脱氧木酮糖还原异构酶(1-deoxy-D-xylulose-5-phosphate reductoisomerase,DXR)的功能,利用生物...; 廖申权戚南山吴彩艳吕敏娜孙铭飞; 文献传递

柔嫩艾美耳球虫顶膜抗原-1(AMA1)免疫保护性研究: 为研究柔嫩艾美耳球虫(Eimeria tenella)免疫相关因子AMA1在预防鸡球虫病中的免疫保护性,以及新型佐剂QCDC(Quil A,胆固醇,双十八烷基二甲基溴化铵,聚羧乙烯组成)对.AMA1的免疫效果的影响。用将...; 王园园戚南山蔡建平吴彩艳廖申权吕敏娜仝宗喜孙铭飞; 文献传递

顶复门原虫糖酵解代谢及其关键酶:己糖激酶的研究进展被引量：5: 2011年; 顶复门原虫是包括刚地弓形虫、疟原虫及球虫等在内的一大类寄生性原虫的总称,引起重要的人畜寄生虫病。由于药物的长期使用,对于原有的药物产生了明显的抗药性,急需新型抗寄生虫药物的出现。顶复门原虫不能利用脂肪和蛋白质作为能量来源,只能依赖己糖激酶(Hex-okinase,HK)参与的糖酵解途径提供ATP。顶复门原虫HK的基因序列、结构特征与植物等一些低等生物更为接近,而明显区别于脊椎动物和大多数的真核生物,成为研究开发药物的理想靶位。本文对顶复门原虫糖酵解途径及其关键酶进行了综述。; 孙铭飞吴彩艳戚南山廖申权吕敏娜蔡建平; 关键词：糖酵解己糖激酶

柔嫩艾美耳球虫3-磷酸甘油醛脱氢酶基因的克隆与原核表达: 鸡球虫病(Coccidiosis)是由艾美耳球虫(Eimeria)引起的一种严重危害养禽业发展的寄生性原虫病。鸡球虫病传统的控制策略依赖于抗球虫药物的应用,但伴随着抗球虫药物的广泛使用,球虫的耐药性也日益显现。而鸡球虫活...; 廖申权戚南山吴彩艳吕敏娜孙铭飞; 文献传递

柔嫩艾美耳球虫裂殖子全长cDNA文库的构建及应用被引量：2: 2012年; 为克隆柔嫩艾美耳球虫裂殖子阶段的功能基因的全长序列,利用SMART技术,采用Clontech公司的Creator TMSMARTTMcDNA Library Construction Kit构建了鸡球虫裂殖子的全长cDNA文库。用试剂盒提取mRNA后,以cDNA合成试剂盒合成cDNA。连接至pDNR-LIB载体,用电转化法将重组质粒转化到E.coli DH10B内得到原始文库,扩增后保存于-80℃冰箱内;最后以文库为模板,分别以研究室已成功克隆序列(EtSAG2、EtMIC-2、EtMCAT)及Sanger的部分EST序列(Contig1218)设计引物,进行PCR扩增并测序检验文库的实用性。经测定,构建的初级cDNA文库约含有8.72×107个重组子,插入的片段多在1kb～3kb之间,平均插入片段长度约1.8kb,扩增后文库保存的滴度为2.4×104 cfu/mL;通过文库的PCR扩增,不仅可以成功扩增出研究室已成功克隆的序列(EtSAG2、EtMIC-2),并成功获得EtMCAT和EST序列(Contig1218)的全长cDNA序列,经比对分析Contig1218所编码的蛋白为组织蛋白酶B样半胱氨酸蛋白酶(Cathepsin B)。结果表明,已成功构建了柔嫩艾美耳球虫裂殖子高质量的全长cDNA文库,从而为筛选鸡球虫的功能基因全长序列奠定了基础。; 王园园陈佳覃宗华吴彩艳廖申权戚南山吕敏娜孙铭飞蔡建平; 关键词：柔嫩艾美耳球虫裂殖子 CDNA文库 SMART技术

Ⅰ型鸭肝炎病毒VP1基因的克隆和表达: 2012年; 通过RT-PCR方法克隆出GD株Ⅰ型鸭肝炎病毒(DHV-1)的结构蛋白VP1基因片段,VP1基因片段和原核表达载体pMAL-C2X均以EcoRⅠ、HindⅢ双酶切后构建获得重组质粒pMAL-C2X-VP1,经限制性酶切和序列测序证明,目的基因正确插入表达载体,转入E.coli BL21(DE3),构建重组表达菌E.coliBL21/pMAL-C2X-VP1,经IPTG诱导,SDS-PAGE检测结果表明,DHV-1的结构蛋白VP1能在E.coliBL21(DE3)中表达,获得可溶性重组蛋白,表达产物的分子质量约为69ku。; 吕敏娜戚南山覃宗华廖申权余劲术袁建丰吴彩艳孙铭飞; 关键词：VP1基因

柔嫩艾美耳球虫乳酸脱氢酶的克隆与原核表达: 鸡球虫病是由艾美耳属(Eimeria)的一种或几种原虫寄生于鸡肠道黏膜细胞所引起的疾病,可造成巨大经济损失。鸡球虫病的控制手段主要依靠抗球虫药的使用,但抗药性问题的日益严重限制了现有抗球虫药物的广泛应用,迫使人们寻找新的...; 孟祥龙廖申权戚南山吴彩艳吕敏娜李国清孙铭飞; 文献传递

顶复门原虫与细菌Ⅱ型丙二酰单酰辅酶A:ACP转酰基酶研究进展被引量：3: 2011年; 大部分顶复门原虫与人畜重要寄生虫病密切相关。近年来,由于各类药物在寄生虫与细菌病防治中的广泛应用,甚至是滥用,造成了这类寄生虫与细菌的严重抗药性,急需一些新型抗感染性药物的出现。由于在一些顶复门原虫与细菌中广泛存在的Ⅱ型脂肪酸代谢途径在其脊椎动物宿主中并不存在,而丙二酰单酰辅酶A:ACP转酰基酶(malonyl-CoA:ACP transacylase,MCAT)是由mcat基因编码的一种巯基酶,负责在起始步骤把丙二酰基团从丙二酰单酰CoA上的硫酯连接部位转移到ACP的磷酸泛酰巯基乙胺臂上而形成丙二酰单酰ACP,对于顶复门原虫和细菌的脂肪酸合成代谢至关重要,成为研究开发药物的理想靶位。文章对ACP转酰基酶的研究进展进行了综述。; 孙铭飞廖申权吴彩艳戚南山吕敏娜袁健丰于劲术蔡建平; 关键词：细菌

柔嫩艾美耳球虫顶膜抗原AMA3基因的克隆及表达: 目前控制球虫病主要采用化学药物防治和疫苗免疫预防,但其存在诸多缺点,因此研制高效安全的基因工程疫苗和新药物必将成为未来科学发展的方向,首要的是寻找球虫抗原基因和药物作用的靶标。顶膜抗原3(Apical membrane ...; 戚南山吴彩艳廖申权吕敏娜蔡建平孙铭飞; 文献传递

柔嫩艾美耳球虫酰基甘油酯酶的克隆与原核表达: 鸡球虫病是养鸡业中常见的一种肠道寄生性原虫病,严重威胁着养鸡业的发展。酯代谢是鸡球虫的三大代谢之一,酰基甘油酯酶(acylglycerol lipase,AGL)是酯代谢途径的关键酶,对鸡球虫的生存起着重要作用。本研究应...; 孟祥龙廖申权戚南山吴彩艳吕敏娜李国清孙铭飞; 文献传递

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广东省农科院院长基金(201014)