国家自然科学基金(30700061)
- 作品数：8 被引量：25H指数：3
- 相关作者：苗志奇于湘莉李美芽唐克轩吴运帷更多>>
- 相关机构：上海交通大学浙江中医药大学上海中学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：生物学农业科学轻工技术与工程化学工程更多>>
- 入侵种互花米草(Spartina alterniflora Loisel.)遗传生态及硫适应研究
- 自从仲崇信老先生引入互花米草的三种生态型F-型、G-型和N-型后,国内学者们对于互花米草的研究从未中断,研究主要围绕互花米草的形态学、生态型、入侵机制、生态效应及控制方法等方面展开。我们的研究回答了以下几个问题:中国沿海...
- 夏露
- 关键词：生物入侵化学武器硫
- 文献传递
- 利用紫外诱变选育楸灵素合成缺陷株被引量：1
- 2017年
- 楸树内生真菌菌株FSN002次生代谢产物楸灵素具有优良的抗肝癌性能,选育突变株是研究楸灵素生物合成机制的重要手段。真菌孢子预培养13 h左右,萌发形成4–6个细胞的幼嫩菌丝,适合作为紫外诱变的出发材料。实验发现紫外光强度和照射时间对真菌致死率的影响符合线性模型,二者之间不存在明显的交互作用。当紫外光强度为90 000μJ/cm^2,时长为6 s时,真菌的致死率在95%左右。在上述优化选育诱变条件下,获得了1株楸灵素合成能力完全丧失的突变株和1株楸灵素合成能力下降到野生型16%的突变株,为下一步研究楸灵素的生物合成机制以及高效生产楸灵素奠定了基础。
- 胡丹唐克轩苗志奇
- 关键词：紫外诱变内生真菌突变株致死率
- 在地钱中构建简便、高效的基因表达检测体系
- 2019年
- 实时荧光定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)广泛应用于基因转录水平的差异分析.选择稳定表达的参比基因,设计理想的参比引物扩增参比基因进而对样本进行标准化处理是得到可靠的qRT-PCR分析结果的前提.地钱具有基因组小、生长周期短、易于培养繁殖、转基因效率高等优势,已成为一种新兴的合成生物学模式植物.植物合成生物学的研究产生了大量的转基因和突变系等地钱材料,同时也提出了在地钱底盘中提升qRT-PCR的效率和可靠性,从而快速准确分析外源以及内源基因表达水平的现实需求.对地钱基因组进行生物信息学分析发现,地钱中参比基因ACT7存在两个高度同源的基因序列,其中任一基因的表达均不太稳定,但两个基因的表达存在一定的互补性.为了在地钱中构建简易、高效的qRT-PCR分析体系,利用数学模型,分析qRT-PCR误差传导机制,建立参比引物的综合评价指标体系.研究发现,能够同时扩增两个ACT7高度同源基因的共退火引物对应的表达水平更为稳定,其中编号为3～6的引物在扩增效率、表达水平及稳定性等多个指标上表现均衡优越,从而开发了一种在地钱中快速准确检测基因表达水平的qRT-PCR平台技术,同时也为在其他物种中如何优化qRT-PCR检测体系指明方向.
- 苗志奇周璐徐美慧
- 关键词：实时荧光定量PCR地钱
- 树脂对楸灵素吸附与洗脱特性的影响
- 2018年
- 以含有楸灵素的楸树内生真菌FSN002发酵液为原料,采用静态实验法考察树脂对楸灵素的吸附过程,建立树脂吸附动力学模型,并通过模型分析定量研究各种树脂对楸灵素吸附与洗脱特性的影响.结果表明,树脂对楸灵素的吸附过程符合一级动力学模型,其中反相树脂对楸灵素的最大吸附能力平均为39.39mg/mL,是离子交换树脂的1.38倍;反相树脂吸附的楸灵素不易洗脱,平均洗脱收率为12.2%,离子交换树脂的平均洗脱收率为46.6%,其中阴离子交换树脂D201的楸灵素洗脱收率最高达83.0%,吸附速率较快,综合性能较好.
- 冯婷婷苗辰飞于湘莉苗志奇
- 关键词：大孔树脂洗脱
- 一株具有抗HepG2活性的胡桃楸内生真菌的分离及研究被引量：13
- 2009年
- 目的：从胡桃楸树皮部分离抗癌活性菌株，筛选抗癌活性菌株，进行菌种鉴定，并对其发酵产物体外抗癌活性进行初步研究。方法：采用菌丝顶端纯化法从胡桃楸树皮部分离、纯化抗癌活性菌株；以MTT法对上述活性菌株发酵液体外抗癌活性进行初步评价；形态学观察结合ITS序列分析法对筛选出的高抗癌活性菌株进行了菌种鉴定；单独对高抗癌活性菌株进行了体外抗癌活性试验。结果：分离得到FSN001—014共14株内生真菌，初步评价发现菌株FSN006具有较强的抗癌活性，鉴定为半知菌亚门，丝孢纲，丛梗孢目，木霉菌属长枝木霉。MTT结果显示FSN006发酵液对人肝癌HepG2细胞具有明显的生长抑制作用，在稀释20倍后仍能达到半数抑制效果。同等条件下阳性对照药姜黄素的IC50为11．49mg·L^-1。同时发酵液对正常肝细胞HL-7702的抑制程度仅相当于癌细胞抑制率的I／4左右，表现出较好的癌细胞选择性，有望开发成一种水溶性的高效低毒的抗癌药物。结论：胡桃楸树皮部存在多种内生真菌，其中分离得到的一个菌株具有较强的抗癌活性；其抗癌活性成分及其是否与胡桃楸中抗癌活性物质存在相关性等问题有待进一步深入研究。
- 李美芽吴运帷蒋福升于湘莉唐克轩苗志奇
- 关键词：胡桃楸内生真菌发酵液抗肿瘤
- 楸灵素的萃取-反萃分离纯化方法研究
- 2018年
- 为了探索萃取-反萃分离纯化楸灵素的最佳条件,利用高效液相色谱(high performance liquid chromatography,HPLC)研究了溶剂种类、溶剂与物料的体积比以及萃取体系的pH值对分离纯化效果的影响。结果表明楸灵素在4种有机溶剂中油水分配系数大小依次是:乙酸乙酯>氯仿>二氯甲烷>甲苯;酸萃取时萃取剂体积过小,楸灵素存在降解;萃取-反萃过程中,随着pH增大,楸灵素在油水两相中分配比值减小。在pH=4.5发酵液-乙酸乙酯1∶1和pH=9氢氧化钠-乙酸乙酯1∶3条件下进行萃取反萃取,楸灵素的萃取收率达78.28%,对应楸灵素色谱纯度97.7%。本研究显示通过加入酸碱,调节电离平衡,改变其极性和油水两相分配系数分离纯化楸灵素的方法工艺是可行的。
- 刘品苗辰飞王玲张曼苗志奇
- 关键词：萃取收率
- 一株楸树内生真菌的鉴定及其发酵产物抗肿瘤特性研究被引量：10
- 2010年
- 利用传统分类学方法、ITS序列测定和系统发育分析方法对一株分离自楸树抗肿瘤活性内生真菌FSNQ0023进行分类鉴定,并对其产物抗肿瘤活性及其细胞毒性进行了初步研究。结果表明,各种指标鉴定其为木霉属真菌(Trichoderma sp.)中的一种,该菌株经发酵培养120h,抗肿瘤活性最强;其对肝癌细胞HepG2的IC50约为正常肝细胞HL-7702的1/2;60℃处理2h后活性稳定。这些特性为活性产物的分离纯化提供了重要数据,也为抗肿瘤新药开发提供了依据。
- 吴运帷李美芽张田于湘莉杨旭林周之蔚苗志奇
- 关键词：楸树内生真菌抗肿瘤活性
- 紫杉醇在水环境中的降解动力学研究被引量：3
- 2009年
- 系统研究了紫杉醇在水环境中的稳定性及其影响因素。发现室温条件下紫杉醇在水中的半衰期只有15h,降解过程符合一级动力学特征。动力学分析发现,pH比温度对水环境中紫杉醇稳定性的影响更为明显。水环境中的紫杉醇在低温和中性偏酸条件相对稳定,而温度提高和强碱性条件强烈促进紫杉醇的降解,紫杉醇在pH中性的水中60℃条件下半衰期只有8h,而在25℃、pH10条件下半衰期缩短到5h。
- 于湘莉苗志奇李美芽
- 关键词：紫杉醇动力学酸碱度
- 楸灵素在水环境下的热稳定性及热降解动力学被引量：1
- 2016年
- 用高效液相色谱检测不同温度下楸灵素降解的动态变化。建立楸灵素热降解动力学模型,定量分析温度对楸灵素稳定性的影响。实验发现楸灵素在发酵液中的热降解符合一级反应动力学,热降解速率常数随温度提高而快速上升,符合Arrhenius方程。4℃条件下楸灵素在发酵液中的半衰期长达25 d,25℃条件下则缩短为6 d,而55℃条件则进一步下降到14 h。模型预测楸灵素在70℃半衰期只有3.7 h,楸灵素发酵液旋转蒸发会造成大量降解,收率低下,与验证实验结果完全吻合。
- 胡郁楠于湘莉唐克轩苗志奇
- 关键词：药物降解动力学模型
