湖北省自然科学基金(2008CDB170)
- 作品数：3 被引量：6H指数：2
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- 花色苷对高糖培养的视网膜Müller细胞L-谷氨酸／L-天门冬氨酸转运体表达的影响被引量：2
- 2011年
- 目的观察花色苷对体外高糖培养的视网膜Meuller细胞L-谷氨酸／L-天门冬氨酸转运体（GLAST）表达的影响。方法取出生后10d的雄性Sprague—Dawley（SD）大鼠视网膜组织，体外原代培养Mueiler细胞。第2～4代细胞用于实验。将实验分为正常对照组（A组）、高糖对照组（B组）、高糖＋30μmol／L花色苷组（C组）、高糖＋60μmol／L花色苷组（D组）、高糖＋100μmol／L花色苷组（E组）进行。采用噻唑蓝比色法（MTT）测定波长570nm处的吸光度[A，旧称光密度（OD）]值，以各组A值计算细胞相对存活率。采用免疫蛋白印迹法（Westernblot）检测各组大鼠视网膜MOiler细胞上GI。AST的蛋白表达。结果MTT检测显示，A、B、C、D、E组A值分别为0．4508±0．0204、0．2701±0．0314、0．3320±0．0232、0．4283±0．0172、0．3619±0．0270，细胞相对存活率分别为100．0％、59．9％、73．6％、95．0％、80．3％。其中，C、D、E组A值均较B组增高，差异有统计学意义（F=32．25，P〈0．05）；D组A值较C、E组显著增高，差异也有统计学意义（F=21．07，P〈0．05）。Western blot检测显示，B组大鼠视网膜Mueller细胞的GI，AST蛋白表达较A组降低，差异有统计学意义（t=5．25，P〈0．05）；A、C、D、E组间大鼠视网膜Mueller细胞的GI。AST蛋白表达无明显变化，差异无统计学意义（F=2．979，P〉0．05）。结论花色苷可逆转高糖引起的Mueller细胞GLAST蛋白表达下降。
- 钱志刚柯敏
- 关键词：MUELLER细胞
- 花色苷对高糖高胰岛素培养下Müller细胞的保护被引量：2
- 2011年
- 目的:观察高糖高胰岛素作用下Müller细胞的活性改变及花色苷对其的保护作用。方法:用50mmol/L葡萄糖和不同浓度胰岛素处理大鼠视网膜Müller细胞24h,分为高胰岛素组:3kU/L胰岛素;低胰岛素组:3U/L胰岛素;对照组:不含胰岛素。分别用121.1,22.8,0μmol/L花色苷对各组细胞进行保护。48h后用MTT法测定Müller细胞的活性。结果:高胰岛素(3kU/L)处理后Müller细胞活性降低(P<0.05),低胰岛素组(3U/L)则与对照组无显著性差异(P>0.05)。在低胰岛素和高胰岛素组中,经高浓度花色苷处理过的Müller细胞较未加入花色苷的Müller细胞活性提高(P<0.05),且与未经胰岛素处理的Müller细胞相比差异消失(P>0.05);而低浓度花色苷无此作用(P>0.05)。结论:高浓度胰岛素在短期内可使Müller细胞的活性降低,一定浓度的花色苷可恢复高胰岛素对Müller细胞活性的改变。
- 胡昕倩柯敏
- 关键词：视网膜MÜLLER细胞花色苷胰岛素葡萄糖
- 花色苷对高糖、高胰岛素下Müller细胞合成VEGF的影响被引量：2
- 2011年
- 目的观察高糖、高胰岛素培养下Mller细胞血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)的合成与分泌,以及花色苷对其合成、分泌VEGF的影响。方法对大鼠视网膜Mller细胞进行原代培养。用50mmol.L-1葡萄糖和不同浓度的胰岛素处理Mller细胞24h,分为高胰岛素组(3kU.L-1胰岛素)、低胰岛素组(3U.L-1胰岛素)和对照组(不含胰岛素)。分别用121.1μmol.L-1、22.8μmol.L-1、0μmol.L-1花色苷对各组细胞进行干预。48h后用酶联免疫吸附法(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)测定上清液中VEGF的含量,免疫细胞化学测定Mller细胞中VEGF的表达。结果相比对照组,高胰岛素处理Mller细胞后上清液与细胞中的VEGF表达均增加;低浓度和高浓度花色苷均可使该组细胞与上清液中的VEGF表达减少,与未加入花色苷的Mller细胞相比差异均有统计学意义(均为P<0.05)。经2种浓度花色苷分别处理后,高胰岛素组与对照组上清液和细胞中的VEGF表达差异均无统计学意义(均为P>0.05),2种浓度之间差异亦无统计学意义(均为P>0.05)。结论高浓度胰岛素在短期内即可使Mller细胞合成、分泌VEGF增加,花色苷能有效逆转该过程。
- 胡昕倩柯敏钱志刚
- 关键词：花色苷胰岛素
