湖北省卫生厅科研基金(JX3B27)
- 作品数：9 被引量：48H指数：4
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- 相关机构：湖北医药学院华中科技大学郧阳医学院更多>>
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- DNMT1、DNMT3b siRNA重组质粒的构建及鉴定
- 2012年
- 目的:构建DNA甲基转移酶(DNMT1)、DNMT3b微干扰RNA(siRNA)重组质粒,并鉴定其正确性。方法:构建DNMT1siRNA重组质粒和DNMT3b siRNA重组质粒各4种,分别用BamHⅠ和PstⅠ酶切、测序、鉴定。结果:用BamHⅠ和PstⅠ进行双酶切后所有质粒均为阳性重组载体,每一种载体选择两个克隆进行测序鉴定,测序结果与插入的寡核苷酸的序列完全相符。结论:DNMT1 siRNA重组质粒和DNMT3b siRNA重组质粒正确,可用于后续实验。
- 刘毅张旋魏涧李虎宜梁志恒张栩亮张有顺
- 关键词：DNA甲基转移酶酶切鉴定
- 膀胱癌组织中DNMT蛋白表达水平与肿瘤增殖和凋亡程度的相关性被引量：3
- 2015年
- 目的:探讨膀胱癌组织中DNMT蛋白表达水平与肿瘤增殖和凋亡程度的相关性。方法:收集膀胱癌组织标本80例和正常膀胱组织标本80例进行DNMT蛋白免疫组化分析。同时选择ABS-1膀胱癌细胞分为空白组、对照组、实验组。空白组加入常规培养基,对照组转染50nmol/L的空载体,实验组转染50nmol/L DNMT1 siRNA载体,然后进行肿瘤的增殖与凋亡分析。收集细胞进行DNMT蛋白表达检测。结果:DNMT1蛋白在膀胱癌组织中的阳性表达率为42.5%,在正常膀胱组织中的阳性表达率为2.5%,对比差异明显(P<0.05)。转染后DNMT1在空白组、对照组、实验组中的相对表达量分别为0.512±0.014、0.485±0.037和0.100±0.034,对比差异明显(P<0.05)。实验组增殖性明显低于空白组和对照组,而细胞凋亡率明显高于空白组和对照组,组间对比差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:膀胱癌组织与膀胱癌细胞中存在DNMT1蛋白过表达,抑制DNMT1蛋白表达能有效抑制肿瘤细胞的增殖和促进凋亡。
- 王全玉何炜蔺强李莉蕊吴振启
- 关键词：膀胱癌组织肿瘤增殖肿瘤凋亡
- RNA干扰抑制DNMT基因对小鼠肿瘤体积和原癌基因表达的影响
- 2015年
- 目的:探讨RNA干扰抑制DNMT基因对小鼠肿瘤体积和原癌基因表达的影响。方法:将30只胰腺癌模型裸鼠平均分为空白组、对照组与实验组,空白组腹腔注射普通细胞培养液50 mg·kg-1,对照组腹腔注射转染空载体细胞培养悬浮液50 mg·kg-1,实验组腹腔注射转染RNA干扰DNMT1 siRNA载体细胞培养悬浮液50 mg·kg-1,均连续注射15 d。结果:胰腺癌模型裸鼠的肿瘤结节明显、瘤体不规则、没有破溃与坏死,肿瘤生物学特性稳定。实验组肿瘤生长曲线平缓,但未停滞;空白组与对照组肿瘤生长较快,曲线陡直,处理后各组体积比较差异有统计学意义(P<0.05)。3组处理前的裸鼠体质量差异无统计学意义,处理后实验组的体质量明显低于其他两组;同时处理处死后实验组的瘤质量也明显低于其他两组,实验组肿瘤生长明显受抑制,差异均有统计学意义(P<0.05)。处理后空白组与对照组的肿瘤表面血管丰富,色泽红润;实验组的肿瘤体积明显缩小,表面浅黄色,未见肿瘤转移灶,可见部分细胞核固缩、裂解,出现凋亡。免疫组化分析结果显示处理后实验组的AFP与Ki-67的相对表达量均明显低于对照组与空白组(P<0.05)。结论:RNA干扰抑制DNMT基因在裸鼠肿瘤的应用能抑制原癌基因表达,抑制肿瘤体积与体质量的增加,从而有利于发挥抗肿瘤作用。
- 刘毅张旋李虎宜张栩亮权伟合吴振启
- 关键词：肿瘤体积原癌基因RNA干扰小鼠
- 不同剂量吡格列酮对膀胱癌上皮细胞生长的影响
- 2015年
- 目的研究不同剂量吡格列酮对膀胱癌上皮细胞生长的干预效果。方法选取膀胱癌患者60例,将其随机分为低剂量组(n=30)和高剂量组(n=30),分别采用1μmol/L和10μmol/L吡格列酮进行干预治疗。分别在干预治疗1、2、3、4d时检测膀胱癌上皮细胞存活率,在干预治疗4d时检测α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)mRNA和结缔组织生长因子(CTGF)mRNA表达水平及Ⅲ型胶原浓度,对结果进行统计分析。结果随着干预治疗时间的延长,两组患者膀胱癌上皮细胞存活率均明显降低,差异有统计学意义(P<0.05),且在干预治疗2、3、4d时高剂量组膀胱癌上皮细胞存活率低于低剂量组,差异均有统计学意义(P<0.05)。高剂量组患者的α-SMA mRNA、CTGF mRNA表达水平和Ⅲ型胶原浓度均显著低于低剂量组,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论较高剂量的吡格列酮可能通过进一步降低α-SMA mRNA、CTGF mRNA表达水平和Ⅲ型胶原浓度,从而诱导膀胱癌上皮细胞的凋亡,效果优于低剂量吡格列酮。
- 舒畅吴振启
- 关键词：吡格列酮膀胱癌上皮细胞凋亡
- 泌尿外科住院患者药物过敏性休克的抢救及护理被引量：1
- 2016年
- 目的探讨对泌尿外科住院患者药物过敏性休克实施抢救及护理的方法。方法选择2013年3月—2014年3月在我院泌尿外科接受治疗的药物过敏性休克患者30例,将所有患者根据治疗及护理方法分为2组各15例,对照组进行常规治疗及护理,观察组实施针对性的抢救及护理措施。分析其抢救护理过程及结果。结果经及时抢救与护理,观察组抢救成功率高达100%;对照组有2例抢救无效死亡,抢救成功率为86.7%,2组差异有统计学意义(P<0.05)。结论对泌尿外科药物过敏性休克患者实施积极抢救与护理,严格遵照医嘱用药,确保呼吸道通畅,是抢救成功的关键。
- 刘春阳吴振启
- 关键词：泌尿外科药物过敏性休克抢救护理
- 膀胱癌不同TNM分期对根治性膀胱切除术患者预后的影响被引量：24
- 2016年
- 目的:探讨膀胱癌不同TNM分期对根治性膀胱切除术患者预后的影响。方法:选取2011年8月至2014年12月在湖北医药学院附属东风医院泌尿外科住院进行诊治的膀胱癌患者92例,CT检查TNM分期中T_1期(30例)、T_2期(20例)、T_3期(32例)和T_4期(10例),所有患者都给予腹腔镜下根治性膀胱切除术,观察所有患者的预后情况。结果:对比四组分期的手术时间,其差别在统计学上没有意义,然而T_3/T_4期患者比T_1/T_2期患者有更多的术后排气时间、住院时间以及术中出血量(P<0.05)。T_3/T_4期患者术后1个月的切口出血、切口感染、吻合口瘘、肺部感染等并发症发生情况明显高于T1/T2期患者(P<0.05)。T_3/T_4期患者的膀胱容量和最大尿流率明显低于T_1/T_2期患者,而残余尿量明显高于T_1/T_2期患者,对比差异都有统计学意义(P<0.05)。结论:膀胱癌不同TNM分期能有效预测根治性膀胱切除患者的围手术期创伤情况和术后尿动力学状况,值得推广应用。
- 刘卫华邓红琴吴振启
- 关键词：膀胱癌TNM分期根治性膀胱切除术预后
- 吡柔比星不同灌注时间治疗表浅性膀胱癌的安全性及疗效比较被引量：10
- 2017年
- 目的探讨行经尿道电切术的表浅性膀胱癌患者应用吡柔比星不同灌注时间治疗效果和安全性。方法行经尿道电切术表浅性膀胱癌患者112例,随机分为观察组和对照组各56例。2组均于术后14 d给予吡柔比星灌注治疗,观察组灌注治疗时间30 min/次,对照组15 min/次,2组灌注频率均为每周1次,每个疗程8次,连续治疗2个疗程。随访24个月,比较2组不良反应发生率、复发率和远期生存率。结果观察组治疗后8、12、24个月复发率(3.57%,5.36%,7.14%)低于对照组(8.93%,12.50%,19.64%)(P<0.05);观察组治疗后12,18,24个月生存率(100.00%,96.43%,92.86%)高于对照组(92.86%,87.50%,80.36%)(P<0.05);治疗期间观察组粒细胞减少、膀胱刺激征、血小板减少发生率(26.79%,21.43%,5.36%)高于对照组(7.14%,8.93%,0)(P<0.05)。结论行经尿道电切术的表浅性膀胱癌患者应用吡柔比星30 min/次灌注治疗可降低远期复发率,提高远期生存率,但不良反应发生率较高,临床需结合患者情况选择合适灌注治疗时间。
- 骆莉萍吴振启
- 关键词：浅表性膀胱癌经尿道电切术吡柔比星灌注
- 羟基喜树碱联合5-氟尿嘧啶于膀胱癌化疗中的疗效及安全性研究被引量：5
- 2016年
- 目的探讨羟基喜树碱联合5-氟尿嘧啶(5-Fu)在膀胱癌化疗中的疗效及安全性。方法选择2011年2月—2015年8月在我院诊治的晚期膀胱癌患者92例,根据随机数字表法分为观察组与对照组各46例,对照组给予5-Fu膀胱灌注化疗,观察组给予羟基喜树碱联合5-Fu膀胱灌注化疗,两组每周灌注1次,连续观察灌注3个月。结果观察组与对照组的化疗有效率分别为95.7%和76.1%,观察组明显高于对照组(P<0.05)。对照组和观察组化疗期间的膀胱刺激症状、血象异常、肝肾功能异常、骨髓抑制等不良反应状况没有统计学差异(P>0.05),所有不良反应在治疗后症状明显减轻。所有患者随访1年,观察组的死亡率与复发率分别为8.7%和4.3%,而对照组分别为30.4%和17.4%,观察组的死亡率与复发率都明显低于对照组(P<0.05)。结论羟基喜树碱联合5-Fu在膀胱癌化疗中具有强大的抗癌作用,且不增加不良反应的发生,能促进长期预后的改善,是一种安全、有效的膀胱局部化疗药物。
- 骆莉萍吴振启
- 关键词：羟基喜树碱5-FU膀胱癌灌注化疗
- DNMT1和DNMT3b基因在人膀胱癌组织和细胞中的表达及意义被引量：5
- 2009年
- 目的探讨DNA甲基转移酶1(DNMT1)和DNA甲基转移酶3b(DNMT3b)在人膀胱癌组织和人膀胱癌细胞系BIU-87中的表达及意义。方法用免疫组织化学法分别检测DNMT1和DNMT3b蛋白在24例膀胱癌组织和10例正常膀胱组织中的阳性表达率;用RT-PCR和Western blot分别检测DNMT1和DNMT3b基因在人膀胱癌细胞系BIU-87中mRNA表达水平和蛋白表达水平。结果在24例膀胱癌组织中,DNMT1阳性表达率为(75.29±2.51)%,而在10例正常膀胱组织中的阳性表达率为(12.61±1.57)%,二者之间的差异具有显著性意义(P<0.05);DNMT3b在24例膀胱癌组织中的阳性表达率为(70.91±2.86)%,在10例正常膀胱组织中的阳性表达率仅为(10.16±1.22)%,二者差异亦具有显著性意义(P<0.05);在人膀胱癌细胞系BIU-87中,通过RT-PCR和Western blot均检测到DNMT1和DNMT3b基因mRNA和蛋白的表达。结论在膀胱癌组织中,DNMT1和DNMT3b蛋白的表达较正常膀胱组织明显增加,说明DNMT1和DNMT3b的高表达可能与膀胱癌的发生发展有关;DNMT1和DNMT3b在人膀胱癌细胞系BIU-87中存在表达。
- 吴振启张旭刘毅徐华史涛平权伟合李虎宜张有顺
- 关键词：DNA甲基转移酶1DNA甲基转移酶3B膀胱肿瘤
