高等学校优秀青年教师教学科研奖励计划(2000-26)
- 作品数：4 被引量：23H指数：2
- 相关作者：刘洁罗阳张学满晓辉崔泽实更多>>
- 相关机构：中国医科大学更多>>
- 发文基金：高等学校优秀青年教师教学科研奖励计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学轻工技术与工程化学工程更多>>
- Cyclin G2抑制胃癌细胞增殖的实验研究被引量：4
- 2007年
- 目的研究cyclinG2对体外培养胃癌细胞增殖能力的影响,探讨cyclinG2作为肿瘤干扰阻断药靶的有效性和临床使用性。方法应用脂质体转染技术将包含有cyclinG2cDNA的pIRES-G2和对照空质粒pIRES-neo分别转染胃癌细胞株SGC-7901,经G418(400μg/mL)选择性培养基筛选两周后获得转入cyclinG2基因的细胞克隆,通过细胞化学法和免疫蛋白印迹杂交检测外源性cyclinG2蛋白表达情况;倒置显微镜下观察克隆细胞形态,Giemsa染色后进行克隆计数。结果转染pIRES-G2获得的细胞克隆中cyclinG2蛋白的表达水平明显高于转染pIRESneo,表明cyclinG2基因被成功地转入SGC-7901细胞稳定表达;转染pIRES-G2组的阳性细胞集落数目明显减少,pIRESneo组的集落数为(87±3),pIRES-G2组的集落数为(53±4),占对照组的60.1%(P<0.01);与对照组相比,pIRES-G2组集落内细胞数目减少,细胞皱缩,形态变得不规则,胞质内出现大量颗粒和空泡。结论cyclinG2可显著抑制体外培养胃癌细胞的增殖,并可能和肿瘤细胞信号传导系统存在某种联系。
- 刘洁崔泽实罗阳满晓辉张学
- 关键词：CYCLING2胃癌基因转染细胞抑制
- 基因转染法建立cyclin G2稳定表达的胃癌细胞株
- 通过基因转染法建立稳定表达cyclin G2的胃癌细胞株,探讨cyclin G2在胃癌细胞周期调控中的地位和作用。方法:利用Genbank中cyclin G2基因序列设计引物,以人口腔癌前上皮细胞系POE4总 RNA的反...
- 刘洁
- 文献传递
- Cyclin G2抑制肿瘤细胞增殖的研究被引量：20
- 2002年
- 背景与目的:周期蛋白(cyclin)是调节细胞周期活动的重要蛋白质,是细胞增殖的正调节因子。CyclinG2可能不同于其它周期蛋白,其表达可被DNA损伤和抑癌基因VHL诱导,对细胞增殖可能起负性调节作用。此外,我们在对口腔鳞癌进行基因表达谱研究时发现,癌组织中cyclinG2表达降低。本研究的目的是为了弄清cyclinG2表达究竟是促进还是抑制肿瘤细胞体外增殖。方法:应用RT-PCR扩增获得cyclinG2基因cDNA,将其插入到真核表达载体pIRESneo的BamHI和BstXI酶切位点处,获得重组表达质粒,命名为pIRES-G2。通过脂质体介导将pIRES-G2转染肿瘤细胞系HeLa,经G418筛选2周,观察细胞集落形成情况并计数形成的集落数。结果:实验组集落的数量显著少于对照组,而且所形成的集落大小也明显比对照组小,细胞皱缩、形态不规则,胞质内颗粒增多、出现空泡。pIRESneo空载体对照组的集落数为76.7±24.8;实验组的集落数为18±10.4,占对照组的23.4%。结论:CyclinG2基因高表达对HeLa细胞的体外增殖和生长有显著抑制作用。
- 田玉楼刘芙蓉刘洁姜莉罗阳张学
- 关键词：肿瘤细胞增殖基因转染
- cyclinG2表达载体的构建及其对人胃癌细胞生长的作用
- 2006年
- 目的:构建包含人cyclinG2基因的真核表达载体,并探讨其对人胃癌细胞体外生长的作用。方法:从POE4细胞总RNA反转录产物中扩增出cyc-linG2cDNA,亚克隆至双顺反子真核表达载体pIRESneo中获得pIRES-G2重组质粒,基因转染SGC-7901细胞,G418筛选阳性克隆,免疫蛋白印迹杂交方法检测cyclinG2蛋白表达情况,平板克隆形成能力和四甲基噻唑蓝(MTT)比色法对转染后细胞的增殖活性进行分析。结果:成功构建包含cyclinG2基因真核重组表达载体pIRES-G2;转染pIRES-G2的SGC-7901细胞克隆的增殖活性明显下降。结论:cyclinG2基因转染后SGC-7901细胞体外增殖能力下降。
- 刘洁田玉楼崔泽实罗阳满晓辉张学
- 关键词：细胞周期蛋白类转染胃肿瘤基因
- 高表达人cycli nG2基因的SGC-7901细胞克隆筛选和鉴定
- 2005年
- 应用脂质体基因转染技术建立稳定表达cyclin G2基因的胃癌克隆细胞,为深入研究cyclin G2在胃癌细胞周期调控的作用和机制提供理想的生物学模型。构建以新霉素基因作为筛选标志基因的包含人cyclin G2基因真核重组表达载体pIRES-G2,大量扩增纯化后经限制性内切酶BamH I/BstX I双酶切鉴定;利用阳离子脂质体介导的基因转染法将其和对照空载体pIRESneo转染人胃癌细胞SGC-7901,经G418选择性培养基筛选后有限稀释法连续克隆化,免疫细胞化学染色检测cyclin G2蛋白表达情况。酶切结果表明cyclin G2cDNA已成功插入pIRESneo的多克隆位点内;经G418筛选后在转染pIRES-G2和转染pIRESneo组均见多个细胞克隆出现,细胞化学染色证实pIRES-G2转染组cyclin G2蛋白的表达水平明显高于pIRESneo转染组;经过多次有限稀释获得稳定高表达cyclin G2的细胞克隆。应用脂质体转基因技术成功建立高表达cyclin G2基因的人胃癌细胞克隆。
- 刘洁崔泽实罗阳满晓辉张学
- 关键词：G2基因转染细胞克隆培养基筛选基因转染细胞克隆酶切鉴定G2
