黑龙江省科技攻关计划(PC09S01)
- 作品数：3 被引量：12H指数：2
- 相关作者：司昌德曲连东郭东春姜骞林欢更多>>
- 相关机构：中国农业科学院哈尔滨兽医研究所黑龙江八一农垦大学黑龙江省畜牧研究所更多>>
- 发文基金：黑龙江省科技攻关计划更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 初探高校屏障环境动物实验室综合管理措施被引量：1
- 2018年
- 屏障环境是指洁净度高的封闭建筑(或层流柜、IVC等),其洁净度达7级,是一种清洁级、SPF级实验动物生产、实验和检疫的设施,是目前在医药和生物技术实际工作中应用最多、最广泛的一类实验动物设施。本文系统地阐述了屏障环境动物实验室的运行和综合管理措施,包括屏障环境动物实验室人员、物品和动物管理几方面,为高校屏障环境下动物实验室的管理提供参考。
- 崔光成秦嫘何宝国丁丽艳齐绍文
- 关键词：屏障环境实验动物
- 鸭多杀性巴氏杆菌外膜蛋白A基因表达及抗原性鉴定被引量：5
- 2010年
- 根据已发表的Pm70株的序列(GenBank登录号:AE004439)设计了两对引物,用PCR方法扩增了鸭多杀性巴氏杆菌标准株C48-102的外膜蛋白基因A(ompA),扩增的片段为1062bp。将测序结果与GenBank中多杀性巴氏杆菌P52、PM70、T931317、T94289的ompA序列比对结果表明,核苷酸水平上同源性为89.0%～98.9%;在氨基酸水平上同源性为90.7%～99.2%。全ompA序列在大肠杆菌中干扰蛋白的正常表达,因此截断ompA蛋白的信号肽序列,将去信号肽的ompA基因插入到pPRO-EX-Htb载体上,构建了原核表达载体Htb-ompA,转化BL21,并诱导表达,SDS-PAGE结果表明,表达蛋白约为35kDa,与预期的分子量大小相符。Western-blot结果表明,表达的蛋白具有良好的抗原活性。本研究重组蛋白ompA的获得,为敲除ompA基因多杀性巴氏杆菌突变株的血清学检测奠定基础。
- 孙郭东春刘家森姜骞司昌德林欢韩凌霞崔玉东曲连东
- 关键词：多杀性巴氏杆菌外膜蛋白A原核表达
- 鸭疫里氏杆菌PCR方法初步建立及应用被引量：6
- 2011年
- 为了建立针对鸭疫里氏杆菌的病原学检测方法,试验根据已发表的鸭疫里氏杆菌的外膜蛋白A(OmpA)的基因序列(GenBank登录号为AF104937)设计1对引物,对7株不同血清型鸭疫里氏杆菌进行扩增并建立PCR方法。结果表明:均扩增出与预计大小一致的目的片段,PCR方法敏感性可达到8.6 pg;而多杀性巴氏杆菌、沙门菌、大肠杆菌和金色葡萄球菌均未扩增出预计大小的片段,说明该PCR方法具有良好的特异性。同时用建立的PCR方法对鸭疫里氏杆菌攻毒鸭病例和临床疑似病鸭的脏器分离菌进行扩增,均可扩增出目的条带,与细菌的分离结果相一致。
- 孙郭东春刘家森姜骞司昌德林欢曲连东
- 关键词：鸭疫里氏杆菌OMPAPCR
