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α-防御素基因和β-防御素基因在外周血白细胞中的不同表达被引量：4: 2003年; 目的观察健康人外周血白细胞中α-防御素和β-防御素基因表达的阳性率及外周血白细胞中α-防御素和β-防御素两大家族基因表达的特征,探讨其在感染免疫中的作用。方法 51名献血员被随机纳入研究中,在体外用100 ng/ml内毒素刺激其外周血白细胞,采用半定量逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)测定0、1、3、6、12、24 h时白细胞防御素信使RNA(mRNA)的水平,DNA印迹分析和序列测定法证实核苷酸扩增产物的特异性。结果在无刺激时,所有研究对象的外周血白细胞均检测到α-防御素1-3 mRNA的转录,而无β-防御素mRNA的转录。内毒素刺激3 h后,88.2％研究对象的外周血可检测到β-防御素1 mRNA的转录,39.2％β-防御素2 mRNA表达阳性,并于刺激6 h时β-防御素1和2 mRNA水平达到峰值,而α-防御素1-3 mRNA的水平并无显著性改变。α-防御素1-3基因在外周血白细胞中呈持续性表达,而β-防御素1-2呈可诱导性表达,β-防御素1和2基因的可诱导性表达存在个体间差异。结论 α-防御素和β-防御素的不同表达特征与其基因调控顺式作用成分不同有关,提示两大类防御素在感染免疫中具有不同的作用。; 方向明徐静陈齐兴舒强; 关键词：外周血白细胞基因表达

急性肺损伤对肺组织β-防御素-2基因表达的影响被引量：12: 2002年; 目的研究急性肺损伤（ALI）对肺组织β-防御素-2基因表达的影响。方法将60只雄性健康SD大鼠随机分成两组:对照组和急性肺损伤组,每组30只。5％苯巴比妥钠 120mg/kg腹腔注射麻醉,以LPS 200 μg/kg尾静脉注射复制急性肺损伤模型;对照组用等量生理盐水（NS）尾静脉注射。于尾静脉注射LPS或NS后0h、6h、12h、1d、3d、5d时杀死大鼠,剖胸取出肺组织。采用Trizol一步法提取肺组织总RNA,以GAPDH为内参,半定量RT-PCR检测肺组织β-防御素-2基因的表达水平,双脱氧末端终止法测序鉴定PCR产物的特异性。结果对照组0h时肺组织中β-防御素-2基因表达水平为 0.77± 0.14,各时间点肺组织中β-防御素-2基因表达水平无显著性变化（P>0.05）。ALI组6h时肺组织β-防御素-2基因的表达水平与对照组相比无显著性差异（P>0.05）,而12h、1d、3d、5d时显著增高（P<0.05）。结论 β-防御素-2基因在大鼠肺组织中有组成型表达,ALI上调肺组织中β防御素-2基因的表达。β-防御素-2基因的诱导性表达可能与ALI的发生发展有关。; 方向明徐笑益陈齐兴舒强; 关键词：呼吸窘迫综合征急性肺损伤肺组织 Β-防御素-2 基因表达

β防御素在机体免疫应答中的作用被引量：12: 2004年; 防御素为小分子阳离子抗菌肽 ,广泛分布于植物、昆虫、两栖动物、鸟类以及哺乳动物中 ,参与机体的防御反应。按其分子结构特点 ,分为α防御素和 β防御素两大家族。本文综述了 β防御素的发现、组织分布、分子结构、基因表达调控、在机体免疫应答中的作用及其作用机理 ,探讨了它的临床意义及应用前景。; 石卓舒强方向明; 关键词：防御素抗菌肽免疫应答

β-防御素2基因腺病毒表达载体的构建与真核表达被引量：3: 2006年; 目的:探讨重组腺病毒载体在真核细胞中稳定表达阳离子抗菌肽——β-防御素2的可行性。方法:采用RT-PCR方法扩增得到大鼠β-防御素2(rBD 2)基因片段,定向插入到腺病毒穿梭质粒pShuttle-CMV中,重组质粒pShuttle-CMV-rBD 2转化E.coli B J5183-AD-1后,与腺病毒基因组质粒pA dE asy-1发生同源重组,重组质粒pA dE asy-rBD 2转染293细胞进行腺病毒表达载体的包装。将包装成功的腺病毒感染cos-7细胞,并建立SD大鼠腺病毒感染模型,进行β-防御素2多肽的体外和体内表达,采用W estern b lot与免疫组化方法检测其表达。结果:重组腺病毒表达载体构建成功,包含大鼠β-防御素2基因,滴度达到109PFU/m l,W estern b lot与免疫组化方法分别检测到β-防御素2在SD大鼠体外、体内的表达。结论:重组腺病毒载体能在真核细胞中稳定表达阳离子抗菌肽——β-防御素2。; 石卓舒强赵正言陈智姚航平方向明; 关键词：Β-防御素腺病毒表达载体

重组β-防御素2在脓毒症所致大鼠急性肺损伤发生发展中的作用被引量：3: 2006年; 目的:探讨重组β-防御素2(BD 2)对脓毒症所致大鼠急性肺损伤的保护作用以及对预后的改善。方法:SD大鼠36只随机分为对照组及实验组,每组各18只,分别予以气管滴注对照腺病毒载体(A d-V,107PFU/m l)及可表达大鼠β-防御素2(rBD 2)的腺病毒载体(A d-rBD 2,107PFU/m l)各100μl。48 h后行盲肠结扎穿孔复制脓毒症模型;复制此模型后36h处死大鼠(n=12,实验组、对照组各6只),行腹腔灌洗液细菌计数、肺组织常规病理切片观察以及大鼠生存率分析(n=24,A d-V组、A d-rBD 2组各12只)。结果:与对照组(A d-V组)比较,实验组(A d-rBD 2组)肺组织损伤程度减轻,生存率明显提高(P<0.05),腹腔灌洗液细菌计数无明显差别。结论:在体内表达的重组β-防御素2可明显改善脓毒症所致的急性肺损伤的肺部病变及其预后。; 石卓赵正言舒强陈智姚航平方向明; 关键词：Β-防御素腺病毒表达载体急性肺损伤盲肠结扎穿孔

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国家自然科学基金(A30070854)