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全细胞生物转化二氯丙醇合成环氧氯丙烷的工艺研究被引量：2: 2014年; 针对传统环氧氯丙烷生产工艺中二氯丙醇皂化过程产生大量高碱度、高含盐量有机废水问题,提出利用生物法转化二氯丙醇合成环氧氯丙烷的绿色工艺。利用表达重组卤醇脱卤酶的大肠杆菌全细胞为生物催化剂,考察了pH、温度、全细胞菌体添加量、底物浓度等对生物转化过程的影响。结果表明,优化的工艺条件为:最适pH为8.3,最适反应温度为45℃,全细胞菌体添加量为10 mg(DCW)/mL,底物浓度为20 mmol/L,在此条件下转化8 h后,1,3-二氯丙醇的最高转化率可达92.3%。全细胞生物催化剂重复反应3次后活力仍保留在80%以上,显示了其良好的应用前景。; 邹树平秦超胡忠策郑裕国; 关键词：二氯丙醇皂化废水环氧氯丙烷

环氧树脂固定化卤醇脱卤酶的研究被引量：6: 2016年; 采用环氧树脂ES-103B对卤醇脱卤酶进行固定化,对最优固定化条件及固定化酶的操作稳定性进行了研究。结果最佳固定化条件为:吸附温度为25℃,吸附缓冲液为p H 7.0磷酸钠缓冲液,初始酶质量浓度为0.5 mg/m L,共价时间为24 h。在此优化条件下,固定化酶的酶活回收率为74.5%,酶蛋白固定化效率为94.2%,比活力为518.6 U/g。利用固定化酶催化1,3-二氯丙醇制备环氧氯丙烷,重复使用15批次后,产物收率仍能保持在初始收率的91%以上,具有良好的工业化应用潜力。; 顾恺邹树平王志才郑裕国; 关键词：固定化环氧树脂

固定化重组大肠杆菌细胞催化合成(R)-环氧氯丙烷被引量：5: 2013年; 采用包埋法对重组大肠杆菌E.coli BL21进行了固定化研究,确定海藻酸钙是较好的固定化载体。考察了海藻酸钠质量分数、CaCl2质量分数、钙化时间、细胞包埋量以及固定化颗粒直径对固定化细胞活性和机械强度的影响,确定优化的制备条件为:海藻酸钠的质量分数为2.0%,CaCl2的质量分数为2%,钙化10 h,包埋菌体的质量浓度为0.05 g/mL,颗粒直径为2.7 mm。与游离细胞相比,固定化细胞的热稳定性和pH稳定性有明显提高。利用固定化重组大肠杆菌细胞催化拆分体积分数为1.5%的外消旋环氧氯丙烷,得到(R)-环氧氯丙烷的产率和光学纯度(对映体过量)分别为36.3%和100%。固定化细胞重复4批仍保持80%以上的活力,显示了良好的操作稳定性。; 邹树平颜海蔚胡忠策郑裕国; 关键词：重组大肠杆菌固定化生物催化

有机溶剂/缓冲液两相体系中全细胞催化拆分环氧氯丙烷被引量：5: 2013年; 研究了有机溶剂/缓冲液两相体系中重组大肠杆菌E.coliBL21(DE3)全细胞水解动力学拆分外消旋环氧氯丙烷制备(R)-环氧氯丙烷的过程.结果表明,最适反应条件为:最适有机溶剂异辛烷与缓冲液的体积比7:3,最适缓冲液pH8.0,底物浓度574mmol/L,全细胞加入量0.07g湿菌体/ml溶液,温度30oC.在此条件下于1L反应器中反应45min,(R)-环氧氯丙烷的摩尔产率、光学纯度和时空产率分别达到37.5%,99.3%ee和0.286mol/(L·h).与单一水相体系相比,异辛烷/缓冲液两相体系中底物浓度和(R)-环氧氯丙烷时空产率分别提高了55.2%和98.6%.; 邹树平颜海蔚胡忠策郑裕国; 关键词：全细胞有机溶剂

棘白菌素B脱酰基酶工程菌的构建及酶学性质研究被引量：3: 2016年; 棘白菌素B(ECB)脱酰基酶能选择性催化水解脱去ECB酰基侧链,得到ECB母核,可用于合成新型抗真菌药物阿尼芬净.从实验室保藏的犹他游动放线菌(Actinoplanes utahensis)ZJB-0801基因组中克隆到ECB脱酰基酶基因,并将其构建入表达质粒pSET152,通过接合转移的方法将表达质粒导入到天蓝色链霉菌(Streptomyces coelicolor)A3中,构建可以高效表达ECB脱酰基酶的工程菌.对重组ECB脱酰基酶的酶学性质进行了考察,结果表明:重组酶的最适反应温度为45℃,最适pH为7.5.Zn^(2+),Mg^(2+),Mn^(2+),Fe^(2+)对重组酶有显著的激活作用,而Cu^(2+),Co^(2+)具有显著地抑制作用.动力学参数分析表明:该酶对底物ECB的K_m和V_(max)分别为0.356mmol/L和397μmol/(min·mg).; 邹树平廖思行牛坤郑裕国沈寅初; 关键词：天蓝色链霉菌酶学性质

腈水解酶固定化的研究进展被引量：3: 2016年; 腈水解酶在医药及其中间体、农药及其中间体、食品、饲料添加剂等精细化学品工业生产中具有十分广泛的应用。固定化腈水解酶便于贮存和重复利用,有利于产物分离和连续化生产。介绍了常用的腈水解酶固定化方法,如包埋法、吸附法、共价法、交联法以及新型固定化方法,如膜截留固定化法、定向固定化法。这些固定化方法对提高腈水解酶稳定性和重复使用批次起着重要的作用。; 黄季维邹树平郑裕国; 关键词：腈水解酶固定化

环氧化物水解酶交联细胞聚集体催化合成(R)-环氧氯丙烷被引量：1: 2020年; 利用聚乙烯亚胺(PEI)絮凝、戊二醛(GA)交联对环氧化物水解酶全细胞进行了交联细胞聚集体(CLCAs)制备,考察了PEI浓度、GA浓度及硅藻土载体用量对CLCAs活力回收率的影响,结果表明PEI浓度、GA浓度及硅藻土载体用量最优值分别为3%(体积)和1%(体积)和6 g/L,此时CLCAs活力回收率可达88.4%。以CLCAs作为催化剂,以外消旋环氧氯丙烷((R,S)-ECH)为底物,在异辛烷/磷酸盐缓冲液两相体系中催化合成(R)-环氧氯丙烷((R)-ECH)。结果表明,在异辛烷与缓冲液的体积比3∶7,底物浓度800 mmol/L,CLCAs加入量18 g/L,缓冲液pH 8.0,温度35℃条件下,(R)-环氧氯丙烷的摩尔产率达到45.2%,产物光学纯度为99.1%ee。考察了CLCAs在两相体系中的操作稳定性,重复使用9个批次活力基本保持不变,显示了良好的操作稳定性。; 邹树平姜镇涛王志才柳志强郑裕国; 关键词：固定化生物催化

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国家自然科学基金(21176224)