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含有禽网状内皮组织增生病病毒基因组片段的天然重组禽痘病毒的研究被引量：31: 2004年; 将国内 5个不同生产厂家来源的禽痘弱毒疫苗株和 1株禽痘野毒株在鸡胚成纤维细胞 (CEF)上连续传 5代 ,用禽网状内皮组织增生病病毒 (Reticuloendotheliosisvirus,REV)特异性的单克隆抗体进行间接免疫荧光试验 (Im munofluorescenceassay,IFA) ,均检测不到传染性REV。但以 6株禽痘病毒 (FPV)感染的第 2代和第 5代细胞基因组提取物为模板 ,通过PCR均能扩增出REV的长末端重复序列 (LTR)和囊膜蛋白 (env)基因片段。用特异性核酸探针作分子斑点杂交 (Dotblot) ,结果显示所扩增的PCR条带为特异的REV_LTR和REV_env基因片段。实验结果表明 ,国内的一些痘病毒疫苗和野毒株基因组中 ,已稳定地整合进了REV的基因组成分。; 丁家波崔治中于立娟孙淑红姜世金; 关键词：禽痘病毒网状内皮增生病病毒

^3H—TdR掺入法检测鸡不同组织淋巴细胞增殖反应的条件优化被引量：3: 2006年; 为了检测感染免疫抑制病毒后鸡群的细胞免疫变化，以建立的^3H—TdR掺入法观察了外周血、脾脏、胸腺、法氏囊中淋巴细胞的增殖反应，对影响该方法的细胞密度、丝裂原浓度（ConA或LPS）、犊牛血清（FCS）浓度等条件进行优化。结果表明，外周血淋巴细胞增殖试验的最佳条件：细胞10^5～10^6／mL，ConA5mg／L，FCS10％；脾脏中淋巴细胞最佳条件：细胞5×10^6／mL，ConA10mg／L，FCS10％；胸腺中淋巴细胞最佳条件：细胞10^6／mL，ConA40mg／L，FCS10％；法氏囊中淋巴细胞最佳条件：细胞5×10^6／mL，LPS40mg／L，FCS10％。; 郭慧君崔治中李宏梅; 关键词：外周血脾脏胸腺法氏囊淋巴细胞增殖反应

内蒙古猪瘟流行病学调查及猪瘟病毒的分离被引量：4: 2004年; 　对内蒙古部分地区猪场进行了猪瘟流行病学调查,发现我区在较大范围内以非典型的猪瘟为主,发病多见于3月龄以下的仔猪,且以局部流行为主;母猪多呈隐性感染,部分母猪表现出繁殖障碍;个别地区仍有发病率和致死率较高的急性典型猪瘟;发病猪场不同程度上存在免疫程序不合理和免疫抑制性疾病。在此基础上对疑似病例进行了病理学检测和兔体交互免疫试验进行确诊,并对猪瘟野毒进行了分离。本研究不仅为内蒙古地区进一步作好猪瘟的防制提供了理论依据,而且为猪瘟野毒分子生物学的研究打下了基础。; 郝永清王潇张爱荣赵和平刘长春张秉升; 关键词：猪瘟野毒猪瘟病毒病猪免疫抑制性疾病月龄流行病学调查

口蹄疫病毒O/Laos/00株非结构蛋白3A基因特征分析被引量：2: 2005年; 经反转录聚合酶链式反应(RT_PCR)技术扩增得到口蹄疫病毒O/Laos/00株的非结构蛋白3A基因核苷酸序列,与其他8株代表性参考毒株的3A基因进行比较,分析口蹄疫病毒3A基因的特征。结果表明:O/Laos/00株3A基因含有429核苷酸,编码143氨基酸残基。9株病毒3A氨基酸序列相比较,可分成3种不同的类型:一类是具有全长3A的毒株,一类是具有133～143位氨基酸缺失的毒株,这两类毒株均来源于牛体,核苷酸差异小(<15%);另一类是具有93～102位氨基酸缺失的毒株,毒株相互之间核苷酸差异较大(7.25%～22.2%)。; 信爱国朱建波赵文华李乐张念祖; 关键词：口蹄疫病毒宿主

HAV表位抗原与HBV核心抗原融合基因的原核表达被引量：1: 2005年; 为探讨甲肝DNA疫苗的可行性,利用DNA重组技术将甲肝病毒(HAV)复合多表位抗原基因VPX插入到乙肝病毒核心抗原(HBcAg)基因中,得到CVPX融合基因。将CVPX克隆到原核表达载体pET-28a(+)中,并在大肠杆菌中进行表达,表达的蛋白进行Western Blot及ELISA检测,结果表明:融合蛋白具有甲肝病毒表位抗原的反应原性。; 张蕾张玉静万家余韩烨

H5亚型禽流感病毒HA基因在WISH细胞中的瞬时表达: 2008年; 在WISH细胞中,对H5亚型禽流感病毒HA基因进行了瞬时表达的研究。首先构建了真核表达质粒pVAX-H5HA,通过酶切和PCR筛选阳性克隆后测序。然后将重组表达质粒以脂质体介导法转染WISH细胞,通过RT-PCR在转录水平检测目的基因的表达,间接免疫荧光检测目的蛋白。结果表明,HA基因在WISH细胞中进行了表达。; 张蕾张大鹏吴东林王诺明宇张慧瑛张瑞兴张玉静; 关键词：H5亚型禽流感病毒 HA基因

基因2型牛病毒性腹泻病毒RT-PCR检测方法的建立和初步应用被引量：15: 2008年; 根据已发表的牛病毒性腹泻病毒基因1型(BVDV-1)和2型(BVDV-2)5'非编码区(5'-UTR)的序列,分别设计了针对BVDV-1型、BVDV-2型以及针对BVDV-1和BVDV-2两型的特异性引物和通用引物,以标准参考株BVDV-1NADL株和BVDV-2890株为对照,建立了分别能检测BVDV-1、BVDV-2和BVDV-1/BVDV-2的RT-PCR检测方法。在此基础上,进一步对疑似BVDV-2感染牛的临床病料组织(脾、淋巴结、心肌、血液等)检测结果表明,在所检测的18份样品中,BVDV-2阳性8份(44%)。经RT-PCR鉴定为阳性的组织病料,进一步通过MDBK细胞进行病毒分离,病毒分离率为100%;结合感染细胞病变观察,间接免疫荧光试验RT-PCR和序列测定鉴定,所分离的病毒均为BVDV-2。上述研究表明,该RT-PCR检测方法敏感、特异;并证实我国牛群已存在BVDV-2的污染或感染。; 任敏焦海宏蒋颖刘振华王传彬朱国强

我国禽痘病毒野毒和疫苗株基因组中已整合进禽网状内皮组织增生病病毒基因组片段: 将国内5个不同生产厂家来源的禽痘弱毒疫苗株和1株禽痘野毒株在鸡胚成纤维细胞(CEF)上连续传5代,用禽网状内皮组织增生病病毒(reticuloendotheliosis virus,REV)特异性的单克隆抗体,进行间接免...; 丁家波崔治中于立娟孙淑红姜世金; 关键词：禽痘病毒网状内皮增生病病毒; 文献传递

猪瘟病毒兔化弱毒株与内蒙古分离野毒株(NMW)E2(gp55)基因的克隆与序列分析被引量：1: 2006年; 采用反转录PCR(RT-PCR)和套式PCR(nested-PCR)扩增了猪瘟病毒兔化弱毒株与内蒙古野毒株的E2(gp55)基因,片段长约1200bp,将PCR产物与PMD-18-T载体相连接并克隆后,经酶切、PCR鉴定后进行序列测定和分析,结果显示二者的核苷酸同源性为89.7%,这一结果表明内蒙古近期流行的猪瘟野毒株与目前使用的疫苗株在E2基因上存在一定的差异。; 郝永清王潇张爱荣乌尼李富强; 关键词：猪瘟病毒

大肠杆菌野生株F18菌毛蛋白粘附亚单位基因的克隆与表达被引量：4: 2007年; 根据Z26520中fedF序列设计1对引物,从发病仔猪的腹泻粪便分离获得的大肠杆菌中扩增得到fedF基因,经纯化、连接、转化,将其成功克隆到pMD18-T中,所克隆fedF基因序列与GenBank中收录的其他fedF基因序列的同源性达97.8%～99.2%.另设计1对引物,利用基因工程方法将所克隆的fedF的编码序列亚克隆到表达载体pBV220中,转化大肠杆菌BL21(DE3)获得表达重组菌.测序结果表明,插入编码序列与预期序列一致.SDS-PAGE电泳及Western-blotting分析表明,重组菌在诱导后可以表达特异性的相对分子质量为30 100的FedF蛋白.; 罗维余兴龙白霞李润成侯强红尹恒; 关键词：大肠杆菌克隆

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