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噬菌体展示技术筛选与白介素-32相互作用的蛋白被引量：2: 2013年; 目的利用T7噬菌体展示技术筛选与白介素-32(interleukin-32,IL-32)相互作用的蛋白。方法构建IL-32α的原核表达重组质粒,表达并纯化重组IL-32α蛋白(recombinant IL-32α,rIL-32α);以纯化后的rIL-32α作为靶蛋白,应用T7噬菌体展示技术对人肝细胞cDNA文库进行筛选;对筛选到的阳性克隆进行DNA测序及计算机辅助分析;利用哺乳动物双杂交实验和免疫共沉淀实验对筛选到的阳性克隆进行验证。结果成功表达并亲和纯化了rIL-32α蛋白;经过5轮筛选,投入和产出的噬菌体滴度比值达到稳定;同源性分析初步确定9个与IL-32α蛋白相互作用的蛋白;进一步实验证实IL-32α与这9个蛋白片段能发生相互作用。结论利用T7噬菌体展示技术成功筛选到9个与IL-32α相互作用的蛋白,我们的发现为深入揭示IL-32的生物学功能奠定了研究基础。; 孙伟庄重冯金荣孙晓雷朱丹丹段义农; 关键词：原核表达

日本血吸虫可溶性虫卵抗原SEA诱导HSC凋亡的分子机制研究: 目的:肝星状细胞(HSCs)活化是肝纤维化发生发展的中心环节,活化的HSCs向静止期转化或凋亡在肝纤维化逆转中起着重要作用。血吸虫可溶性虫卵抗原SEA虽然是血吸虫病虫卵肉芽肿形成的始动因子,但有研究显示曼氏血吸虫虫卵能够...; 朱丹丹陈金铃王建新段义农; 关键词：日本血吸虫可溶性虫卵抗原肝星状细胞; 文献传递

Septin4_I2基因活化肝星状细胞中的表达及序列生物信息学分析被引量：1: 2013年; 目的观察活化的肝星状细胞中Septin4_I2基因的表达,并对其进行生物信息学分析。方法采用实时荧光定量PCR法观察活化的肝星状细胞LX-2中Septin4_I2基因的表达,利用网络平台和生物软件分析Septin4_I2序列。结果活化的肝星状细胞中Septin4_I2基因表达上调。Septin4_I2基因序列含有5个内含子及保守的GTP结合位点。Septin4_I2蛋白以loop结构为主,氨基酸序列中含有数个丝氨酸、苏氨酸及酪氨酸磷酸化位点,含有特异性的蛋白激酶K、蛋白激酶C及酪蛋白激酶Ⅱ磷酸化位点,含有N-豆蔻酰化位点。结论活化的肝星状细胞Septin4_I2基因表达上调,编码蛋白可能与细胞分裂相关。; 万维琴朱丹丹顾锡娟段义农黄彩群; 关键词：生物信息学分析肝星状细胞

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国家自然科学基金(81171589)