天津市自然科学基金(2361131)
- 作品数：3 被引量：7H指数：2
- 相关作者：张晓红袁佳琴孙慧敏孙岩秀华夏更多>>
- 相关机构：天津医科大学天津市第四中心医院更多>>
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- 相关领域：医药卫生更多>>
- IGFBP-5和Lamp-2在年龄相关性白内障和透明晶状体上皮细胞的蛋白表达被引量：5
- 2006年
- 目的:研究胰岛素样生长因子结合蛋白5(insulin-likegro-wthfactorbindingprotein5,IGFBP-5)和溶酶体膜糖蛋白2(lysosomeassociatedmembraneprotein2,Lamp-2)在年龄相关性白内障和透明晶状体上皮细胞(LECs)的表达,为了解白内障发生机制提供实验依据。方法:术中获取白内障和透明晶状体前囊,免疫组化检测LECsIGFBP-5和Lamp-2蛋白的表达。结果:成熟期年龄相关性白内障与核性年龄相关性白内障LECs表达IGFBP-5蛋白阳性率分别低于透明晶状体对照组(40.0%,42.1%vs79.0%,P<0.05),Lamp-2的蛋白表达各组间没有明显差异,其中核性年龄相关性白内障组与透明晶状体对照组比较P值接近0.05。结论:年龄相关性白内障LECs的IGFBP-5和Lamp-2表达异常与该白内障的形成有关。
- 华夏孙慧敏苑晓勇郑建秋黄秀菊
- 关键词：年龄相关性白内障晶状体上皮细胞
- 年龄相关性白内障基因异常表达的研究被引量：2
- 2005年
- 目的比较年龄相关性白内障晶状体上皮细胞(LEC)基因表达与正常人的差异,探讨白内障发病的分子机制。方法术中撕取晶状体前囊36眼,其中单纯核性年龄相关性白内障10眼,成熟期年龄相关性白内障19眼,角膜移植供体眼及外伤性晶状体脱位7眼(正常对照)。3组晶状体囊膜分别提取总RNA,将合格的各组RNA样品做差异显示(DD-RT-PCR),寻找差异表达基因,再将其分离、扩增、测序,最后选取与白内障形成密切相关的胰岛素样生长因子结合蛋白(IGFBP-5)及溶酶体相关膜蛋白2(LAMP-2)基因进行验证。结果各组RNA纯度达到要求,总RNA完整,经差异显示,年龄相关性白内障组比正常人组低表达的条带有5条,高表达条带15条。对6条明亮条带测序后,其中3个片段分别与IGFBP-5、LAMP-2及小核糖体蛋白10(rps10)有很高的同源性,其他3个片段均为新近克隆未知功能的基因或基因组序列。验证表明,年龄相关性白内障IGFBP-5表达水平低于正常对照(P<0.01),而年龄相关性核性白内障LAMP-2表达水平高于正常对照。结论IGFBP-5和LAMP-2是年龄相关性白内障相关基因,差异显示技术在研究年龄相关性白内障发生中有重要意义。
- 张晓红孙慧敏孙岩秀袁佳琴
- 关键词：年龄相关性白内障MRNA差异显示技术基因
- 改进Trizol一步法提取人晶状体囊膜组织及培养的晶状体上皮细胞中总RNA被引量：1
- 2005年
- 目的改进传统一步法,尝试从人晶状体囊膜和培养的晶状体上皮细胞中提取质量满意的总RNA。方法将人晶状体前囊膜和培养的牛晶状体上皮细胞分别随机分为标准组和对照组,分别采用常规一步法和改进法提取总RNA,通过测OD值、做变性胶电泳和RTPCR反应检测改进法是否可提高微量组织或细胞的RNA产量,并验证其纯度和完整性。结果相同标本量条件下,改进组RNA产量均高于标准组数倍;变性胶电泳28S∶18S=2∶1,各组RNA产物经RTPCR反应均可扩增出220bp的目的基因,而阴性对照反应均得到阴性结果,可认为是完整的未降解的无污染的RNA。结论改进一步法可成功地提取毫克级组织和104个细胞的总RNA,产物完整无降解并可用于下一步反应。
- 孙岩秀孙慧敏郭若琳张晓红袁佳琴
- 关键词：TRIZOL糖原晶状体上皮细胞
