湖南省科技计划项目(2008SK3052)
- 作品数：2 被引量：2H指数：1
- 相关作者：谭亚非曹忠龚福春谭淑珍郑兴良更多>>
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- 相关领域：理学医药卫生更多>>
- 以萘酰亚胺衍生物基荧光高分子为载体和指示剂的相分离免疫分析方法被引量：2
- 2009年
- 以4-甲氧基-N-(2-N',N'-二甲基氨基乙基-N'-烯丙基)萘二甲酰亚胺氯化铵(DMNAA)为荧光单体,合成了一种pH敏感荧光高分子聚N-异丙基丙烯酰胺-4-甲氧基-N-(2-N',N'-二甲基氨基乙基-N'-烯丙基)萘二甲酰亚胺氯化铵-N,N-二甲基氨丙基甲基丙烯酰胺[P(NIP-DMAPM-DMNAA)].采用共聚法将日本血吸虫抗原(SjAg)固定在P(NIP-DMAPM-DMNAA)上,制备P(NIP-DMAPM-DMNAA)-SjAg连接物,与日本血吸虫抗体(待测,SjAb)发生免疫反应后,调节pH值,使荧光高分子相变分离高分子-免疫组分连接物,最后,利用蛋白A对抗体的亲和性捕获P(NIP-DMAPM-DMNAA)-SjAg-SjAb,通过测定高分子自身的荧光信号来定量SjAb.该新型高分子具有良好的荧光特性,对pH响应快速,37℃下相转变pH值为7.2,分离免疫复合物时造成的损害低.与传统相分离免疫分析比较,新方法通过高分子相变分离和蛋白A捕获双重分离作用,消除了非特异性组分和未反应的特异性免疫成分等的干扰;利用高分子自身的荧光信号检测,无须另外的标记物,大大提高了免疫分析的简便性.以日本血吸虫抗体为分析对象,测得线性范围为1～1500ng/mL,抗体检出限为1.3ng/mL,相对标准偏差为3.6%(n=10),结果令人满意.
- 龚福春唐连飞郑兴良曹忠谭淑珍谭亚非
- 关键词：日本血吸虫
- 矢车菊甙-辣根过氧化物酶-过氧化氢新体系及其在酶联免疫传感分析中的应用
- 2009年
- 以一种天然色素矢车菊素-3-葡萄糖苷(Cyanidin-3-glucose,CAG)为辣根过氧化物酶(HRP)底物建立了矢车菊甙-辣根过氧化物酶-过氧化氢新体系.CAG在540nm处有一个吸收峰(AP1),在HRP催化下被H2O2氧化,AP1降低;同时,其氧化产物在482nm处产生一个新吸收峰(AP2),并且反应体系中两峰值的比值R(AP2/AP1)与HRP量在一定浓度范围内呈线性相关.根据此原理,以猪口蹄疫病毒蛋白(food and mouth disease virus antigen,FMDVAg)为分析模型,建立了检测猪口蹄疫病毒的酶联免疫传感分析新方法.该方法利用伴刀豆蛋白(Conconvalina,ConA)对糖蛋白的识别特性固定HRP-猪口蹄疫病毒抗体连接物(HRP-FMDVAb),由ConA介导和磁性分离实现了免疫反应特异性组分和非特异成分,以及反应免疫磁性珠与没反应免疫磁性珠的分离.运用制备的传感体系测定猪口蹄疫病毒的线性范围为1.5×10-8～2.7×10-6g/mL,抗原检出限为3.1×10-9g/mL,相对标准偏差为3.7%(n=11).底物CAG及其产物的水溶性好,对人体无毒副作用,在临床上可代替传统HRP底物进行免疫检测.
- 龚福春李定中杨荣魏建科曹忠谭淑珍谭亚非
- 关键词：猪口蹄疫病毒
