国家杰出青年科学基金(39925019)
- 作品数：27 被引量：66H指数：5
- 相关作者：沈倍奋黎燕宋伦孙英勋于鸣更多>>
- 相关机构：军事医学科学院大连理工大学中国医学科学院基础医学研究所更多>>
- 发文基金：国家杰出青年科学基金国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- IL-6在人骨髓瘤细胞U266中的信号转导途径与细胞增殖促进效应之间的关系被引量：4
- 2001年
- 目的 :研究人骨髓瘤细胞U2 6 6中IL 6信号转导途径激活与细胞增殖促进效应之间的关系。方法 :首先分别采用MTT、凝胶阻滞电泳 (electrophoreticmobilityshiftassay ,EMSA)和免疫沉淀 (immunoprecipitation ,IP)方法观察IL 6对U2 6 6细胞生长的影响及两条IL 6信号转导途径在U2 6 6细胞中的诱导激活状态 ;然后采用化学试剂处理或转基因方法观察信号途径活化状态变化与IL 6效应变化之间的关系。结果 :IL 6可明显促进U2 6 6细胞增殖 ,并在不同剂量下诱导JAK STAT和Ras NF IL 6途径活化 ;Ras途径活化被特异性上调和下调时 ,IL 6对U2 6 6细胞的生长促进效应分别得以增强和减弱 ;而JAK STAT途径活化受抑时 ,IL 6的促细胞生长效应反而加强。结论 :Ras途径的诱导激活介导了IL 6对U2 6 6细胞的增殖促进效应 ;而JAK STAT途径活化介导了与IL
- 宋伦黎燕沈倍奋
- 关键词：IL-6骨髓瘤信号转导细胞增殖
- PKA途径活化抑制人骨髓瘤细胞U266对IL-6的反应性被引量：1
- 2001年
- 目的 研究PKA途径活化对IL 6在人骨髓瘤细胞系U2 6 6中的信号转导功能及生物学效应的影响。方法 首先采用MTT方法确定IL 6作用于U2 6 6后所产生的与细胞生长相关的生物学效应 ;继而采用凝胶阻滞电泳 (electrophoreticmobilityshiftassay ,EMSA)方法观察参与IL 6信号转导功能的转录因子STAT3和NF IL 6在U2 6 6细胞中的诱导激活状态 ,并确定该细胞中的IL 6信号转导途径 ;最后采用PKA途径激动剂 (Forskolin ,FK)与IL 6共同刺激U2 6 6细胞 ,观察IL 6生物学效应和信号转导功能的改变。结果 (1)IL 6可明显促进U2 6 6细胞增殖 ;(2 )两种转录因子分别参与的IL 6信号转导途径 -JAK/STAT和Ras/NF IL 6均能够在U2 6 6细胞中诱导激活 ;(3)FK可抑制U2 6 6细胞本身的生长及IL 6对细胞的增殖促进作用 ,同时下调两条信号途径的活化。结论 U2 6 6细胞中PKA途径激活所介导的IL 6生物学效应减弱与信号转导功能受抑相关。
- 宋伦黎燕沈倍奋
- 关键词：白细胞介素-6多发性骨髓瘤信号转导
- 新基因LX3与白细胞介素-6诱导的相关性被引量：2
- 2005年
- 目的研究功能未知新基因LX3[1]与白细胞介素-6(IL-6)的相关性,为研究IL-6的作用机制寻找新的靶基因。方法反转录-PCR(RT-PCR)分析不同浓度IL-6处理的U937细胞及同一浓度IL-6诱导不同时间的U937细胞中新基因LX3的表达差异;NorthernBlot分析IL-6诱导前后U937细胞中新基因LX3表达的变化。结果LX3基因在U937细胞中的表达量随IL-6诱导浓度的增加而增加,在IL-6浓度为500ng/ml时表达量最高,而在0ng/ml时不表达;时间表达谱分析显示在IL-6刺激8h时新基因LX3的表达量最高;Northern印迹分析显示新基因LX3在IL-6诱导后的U937细胞中的表达量明显升高。结论LX3是与IL-6诱导紧密相关的新基因。
- 夏荣黎燕冯建男兰炯采沈倍奋
- 关键词：白细胞介素-6
- 蛋白激酶ERK活化介导IFN-α在人骨髓瘤细胞系U266上的增殖促进效应被引量：2
- 2002年
- 目的 研究IFN α在人骨髓瘤细胞系U2 6 6上的生物学效应及其分子机制。方法 采用MTT方法检测IFN α对U2 6 6细胞生长的影响 ;采用FACS方法检测IFN α作用下U2 6 6细胞生长周期及其表面IL 6R、gp130等分子表达水平的改变情况 ;采用免疫印迹方法检测能够介导细胞生长的Ras/MAPK途径中蛋白激酶ERK在IFN α刺激作用下的活化情况 ,并同时观察Ras/MAPK途径特异性抑制剂PD980 5 9作用后ERK激酶活化和细胞生长所发生的变化。结果 IFN α能够促进U2 6 6细胞周期行进 ,同时表现出细胞增殖促进效应 ;但它不影响U2 6 6细胞上IL 6R和gp130分子的表达。IFN α可明显激活蛋白激酶ERK ,PD980 5 9作用后ERK活化受抑 ,同时IFN α在U2 6 6细胞上的生长促进效应明显下调。结论 IFN α通过激活蛋白激酶ERK介导其在U2 6
- 宋伦黎燕于鸣沈倍奋
- 关键词：IFN-Α多发性骨髓瘤增殖效应MM
- 反义核酸抑制人骨髓瘤细胞中的IL-6信号转导功能研究
- 2000年
- 目的：研究人骨髓瘤细胞的ＩＬ－６信号转导通路中哪一个环节可作为“ＩＬ－６功能拮抗剂”设计的目标靶位。方法：首先通过凝胶阻滞电泳（ｅｌｅｃｔｒｏｐｈｏｒｅｔｉｃ ｍｏｂｉｌｉｔｙ ｓｈｉｆｔ ａｓｓａｙ，ＥＭＳＡ）、免疫沉淀方法观察人骨髓瘤细胞Ｓｋｏ－００７中参与ＩＬ－６信号转导功能的转录因子－ＳＹＡＴ３，ＮＦ－ＩＬ－６和蛋白做酶ＥＲＫ的诱导活化情况，继而构建和设计了针对这些信号分子的反义表达质粒和反义寡核苷酸，用同样方法观察反义核酸对ＩＬ－６信号转导功能的影响。结果：这些反义核酸可以不同程度地抑制ＩＬ－６在Ｓｋｏ－００７细胞中的信号转导功能。结论：可通过进一步实验确定转录因子、蛋白激酶作为“胞内拮抗剂”作用目标靶位的可行性。
- 宋伦黎燕沈倍奋
- 关键词：IL-6信号转导反义核酸
- 白细胞介素6诱导相关新基因的克隆与鉴定
- 2001年
- 黄耀江黎燕施明王建安胡美茹沈倍奋
- 关键词：白细胞介素6新基因克隆基因测序
- 生物信息学技术克隆并分析新基因STRF7被引量：8
- 2001年
- 为进一步研究信号转导相关的新基因片段 BE644 2 50 ,采用生物信息学方法克隆其全长 c DNA,并分析了其 ORF、电子表达谱、染色体定位等 ;之后对全长序列进行了实验验证 .电子延伸 ( contig)获得了 72 9bp的延伸产物 ,含一个典型的 74 aa的 ORF,命名为 STRF7;与已知蛋白无明显同源性 ,部分地相似于人的同源框蛋白 CDX-4和酵母的转录调节子 ADR6,属一新发现的基因 ;RT-PCR从 IL-6刺激后的 U937中克隆了 STRF7基因 ,其序列与电子延伸结果完全一致 ;进一步的分析显示 STRF7在多种组织中表达并定位于第 6号染色体上 .上述结果显示 ,STRF7是一个新基因 ,编码含 74 aa的蛋白 。
- 黄耀江黎燕王关林沈倍奋
- 关键词：生物信息学CDNA序列分析表达谱染色体定位
- 用一种新型的PCR方法快速制备人TNF-α缺失突变体被引量：7
- 2002年
- 人肿瘤坏死因子 α(hTNF α)的 2个Loop区 2 9～ 36、141～ 146是受体的主要结合部位 .应用一种新型的PCR方法 ,快速制备了这 2个Loop区的缺失突变体 ,并对其活性进行了研究 .结果表明 :这种新型的PCR方法在制备缺失突变体中具有快速、简便、经济等优点 ,值得推广 ;缺失蛋白对L92 9细胞的毒性作用明显降低 ,表明这 2个区域为hTNF
- 张巍沈倍奋黎燕郭宁冯健男
- 关键词：PCR方法
- IFNα在人骨髓瘤细胞系Sko-007中的生物学效应及分子机制被引量：2
- 2002年
- 目的 研究IFNα在人骨髓瘤细胞系Sko 0 0 7中的生物学效应及分子机制。方法 MTT方法检测IFNα对Sko 0 0 7细胞生长的影响 ;流式细胞术检测IFNα作用后Sko 0 0 7细胞生长周期及其表面IL 6受体 (IL 6R)α链和 β链 (gp130 )表达水平的改变 ;免疫印迹法检测能够介导细胞生长的Ras MAPK途径中蛋白激酶ERK在IFNα刺激作用下的活化以及Bcl 2家族抗凋亡蛋白———Bcl 2 ,Bcl xL 和Mcl 1在IFNα刺激前、后的表达改变。结果 IFNα能够抑制Sko 0 0 7细胞周期行进 ,使处于G0 G1 期的细胞数明显增加 (从 41.1%增至 84.1% ) ,而S期细胞比例显著下降 (从 5 7.1%降至 13.3% ) ;同时IFNα可表现出细胞增殖抑制效应 ,最大抑制率为 88%。IFNα刺激后 ,Sko 0 0 7细胞表面gp130表达明显下调 ;同时蛋白激酶ERK活化受抑 ;Bcl 2降解 ;Bcl xL 表达下降。结论 IFNα可通过下调细胞表面gp130表达、抑制蛋白激酶ERK活化和促进Bcl 2家族抗凋亡蛋白降解而实现其对Sko 0 0
- 宋伦黎燕孙英勋沈倍奋
- 关键词：干扰素Α增殖抑制BCL-2蛋白
- IL-6相关基因的克隆与鉴定被引量：1
- 2001年
- 目的 :克隆和鉴定IL 6作用相关基因将有助于揭示IL 6信号转导机制和发现新的信号分子。方法 :以来源于IL 6处理和未处理的U937细胞mRNA的双链cDNA作为检测子和驱动子 ,进行cDNA代表性差异分析。结果 :分离了 14个差异表达基因序列 (EST) ;反向RNANorthern杂交筛选到 9个差异表达序列 ,经测序及序列分析 ,其中 7个差异表达的EST代表在细胞生命活动或信号转导中有重要作用的已知基因 ,2个EST代表与IL 6作用相关的新基因。Northern印迹和时间表达谱进一步证明了P52和P31代表的新基因与IL 6作用的相关性。结论 :上述结果提示这些差异cDNA序列可能与IL
- 黄耀江王关林黎燕施明王建安沈倍奋
- 关键词：白细胞介素6U937细胞
