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基于VBNC状态复苏的荧光假单胞杆菌CHZYR63对毒死蜱的酶降解效果: 2015年; 利用复苏可培养化VBNC(Viable but non-culturable bacteria)资源菌筛选了对毒死蜱有降解性能的菌种及其酶.应用最大或然数计数(MPN)法,添加复苏促进因子Rpf蛋白分子,获取可培养化VBNC菌种,确定菌种的系统进化属性,并用常规培养法筛选了高效毒死蜱降解菌及其酶,探索了适宜的酶降解优化条件.从分离到的可培养化VBNC菌株中筛选出一株降解毒死蜱效果达70%的菌株CHZYR63,经16S r RNA基因序列分析,初步鉴定为荧光假单胞菌(Pseudomonas fluorescens).继而,从该菌株提取出粗酶,其降解毒死蜱能力为50%.降解条件优化研究表明:降解酶促反应的最适温度为35℃,最适p H值为7;在最适条件下该降解酶在30 min内对毒死蜱(100 mg/L)的降解率可达60.26%.; 丁林贤吴咚咚付惠玲王强蔡慧慧施洁莹王新全周育; 关键词：毒死蜱酶促降解 PH 温度

印染废水中活的但非可培养状态细菌的发现被引量：1: 2014年; 【目的】探明印染废水生物反应器中活的非可培养(viable but non-culturable,VBNC)细菌及其系统关系。【方法】利用土质滤材构建生物反应器,基于复苏促进因子(resuscitation promoting factor,Rpf)对VBNC细菌的复苏刺激生长作用,采用最大可能数法(most probable number,MPN)及其MPN培养系判断样品中的细菌总数,稀释平板法分离其中复苏可培养化的VBNC菌株,解析16S rRNA基因系统关系。【结果】(1)MPN培养系中,处理组MPN值对应的细菌总数为9.3×106~2.4×108,大于对照组MPN值对应的细菌总数4.3×106~9.3×106,表明添加Rpf后可培养化细菌总数最高从每g样品的7.5×106提高到2.4×108;(2)添加Rpf可使样品中细菌分离丰度提高2.2~32倍,表明印染废水生物反应器中存在对Rpf敏感、复苏可培养化的VBNC优势菌群;(3)MPN培养系中处理组稀释段培养液的OD660值大于对照组的OD660值,表明Rpf对部分细菌菌种有生长刺激作用。【结论】利用复苏促进因子Rpf,探明了印染废水生物反应器中存在对Rpf敏感的VBNC菌种,包括放线菌、革兰氏阳性以及革兰氏阴性菌。本研究结果揭示了印染废水中存在大量活的但非可培养状态细菌,这将为其形成机理、复苏活性化机制以及印染废水深度处理工程工艺改进等方面的深入研究提供重要的思路与方法。; 金夷胡佳丹张丽杨娜马英川梅荣武韦彦斐陈建荣王慧荣王方园李明智吴冬梅徐鸿徐龙乾沈佳琪吴霞胡群斌王桢王冠玉余晓云吴咚咚刘志恒丁林贤; 关键词：印染废水生物反应器

基于生物反应器探究制药废水中活的但非可培养状态细菌的组成: 2014年; [目的]探究制药废水中活的但非可培养(viable but non-culturable,VBNC)状态细菌的组成与系统关系。[方法]利用土质滤材构建生物反应器,基于复苏促进因子(resuscitation promoting factor,Rpf)对VBNC细菌的复苏刺激生长作用,采用MPN(most probable number)法,稀释平板法分离其中复苏可培养化的VBNC菌株并解析其16S rRNA基因系统关系。[结果]在MPN培养系中,Rpf对部分细菌有生长刺激作用。制药废水中存在对Rpf敏感、复苏可培养化的VBNC优势菌群;制药废水中对Rpf敏感的VBNC优势细菌主要有革兰氏阳性放线菌Microbacterium、Gordonia和Leucobacter属近缘菌,革兰氏阴性菌Candidimonas、Xanthobacter和Aminobacter属近缘菌,其中菌株ZYM1、ZYM3、ZYZR4和ZYXR1可能属于新种。[结论]研究结果揭示了制药废水中存在VBNC状态细菌,为研究其形成机理、复苏活性化机制以及制药废水的深度处理等提供重要的思路与方法。; 金夷周小玲翟竟余蒋涛李裕如梅荣武奚雯翼蔡嫣然王方园横田明张立新丁林贤; 关键词：制药废水生物反应器

基于活的但非可培养细菌降解毒死蜱的研究: 2014年; [目的]探索降解毒死蜱的新的微生物资源。[方法]应用最大或然数(MPN)法,通过添加适量复苏促进因子(Rpf)从多种土壤及污水生物处理系统中分离活的非可培养(VBNC)资源菌种,根据文献报道的已知毒死蜱降解菌株的系统关系综合分析,初步筛选出与已知降解毒死蜱菌种近缘的VBNC菌株并进行降解试验。[结果]共筛选出6株具有毒死蜱降解能力的菌株,其中菌株CHZYR63对毒死蜱的生物降解能力最强,经Box-behnken响应面法优化后降解率可达70.15%。[结论]可培养化VBNC菌种资源在残留农药降解方面有较大的利用价值,为揭示受染环境中VBNC微生物的形成及其活性化、环境污染物质的共代谢等微生物群体的相互作用机制提供了参考。; 吴咚咚王强蔡慧慧施洁莹付惠玲王新全周育丁林贤; 关键词：VBNC 毒死蜱生物降解响应面法

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浙江省自然科学基金(LY13C010002)

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