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湖南省科技计划项目(2008SK3085)
湖南省科技计划项目(2008SK3085)
作品数:
2
被引量:8
H指数:1
相关作者:
孟祥贤
王柯敏
羊小海
黄青山
郭秋平
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相关机构:
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相关领域:
生物学
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2010
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金纳米颗粒介导不对称PCR:制备单链核酸的新方法
被引量:8
2010年
单链核酸杂交技术是现代医学生物学等领域诊断与检测的重要手段.传统不对称PCR制备单链核酸的方法,需要严格控制引物和模板数量及反复摸索退火温度,操作复杂.发展了一种利用金纳米颗粒介导的不对称PCR快速制备单链核酸的新方法.浓度为0.1~0.5nmol/L金纳米颗粒可显著改善PCR扩增特异性,提高扩增效率.在不对称PCR扩增中,加入合适浓度的金纳米颗粒方便快捷得到单链核酸产物,不需要进行复杂的条件优化等操作步骤.通过快速制备地中海遗传病两个点突变CD17(A→T)和IVS-2-654(C→T)位点的单链DNA靶序列,证实该方法是一种简便、有效的获得单链核酸的方法,有望在单链核酸技术领域发挥重要作用.
孟祥贤
羊小海
王柯敏
郭秋平
黄青山
关键词:
金纳米颗粒
连接酶介导的诱导荧光共振能量转移法检测基因点突变
2009年
发展了一种基于连接酶介导的诱导荧光共振能量转移技术用于基因点突变的准确快速检测方法.针对特定突变位点设计的核酸探针,当与模板之间完全匹配时,被连接形成一条长的双链,双链特异性嵌入荧光染料SYBR Green I插入新生的双链区域,诱导荧光共振能量转移发生.相反,核酸探针与模板之间不匹配,则不能诱导荧光共振能量转移的出现.利用该方法,成功实现了β地中海贫血遗传病两种普遍存在的点突变Ivs-2-654(C→T)和CD17(A→T)的基因型检测.
孟祥贤
黄建华
谭拥军
关键词:
连接酶
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