青岛市自然科学基金项目(05-2-JC-56) 作品数:9 被引量:55 H指数:4 相关作者: 李国强 唐旭利 刘静 钟惠民 管华诗 更多>> 相关机构: 中国海洋大学 青岛科技大学 国家海洋局第一海洋研究所 更多>> 发文基金: 青岛市自然科学基金项目 国家高技术研究发展计划 国家自然科学基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 农业科学 更多>>
南极冰藻Chlamydomonas L4的RPS5基因的获得及其在分类中的作用 通过对南极冰藻L4(Chlamydomonas L4)cDNA文库的筛选,克隆出一个具有5’和3’非编码区的40S核糖体蛋白S5(RPS5)全长基因序列。通过与GenBank中日本凋毛藻、拟南芥、果蝇、斑马鱼、非洲爪蟾、... 王能飞 沈继红 陈魁 林学政 郝林华 付春祥关键词:南极冰藻 CDNA文库 文献传递 HPLC法同时测定北沙参中法卡林二醇和人参炔醇的含量 被引量:3 2007年 运用DAD Agilent 1100高效液相色谱仪,首次建立了同时测定北沙参药材中2种组分法卡林二醇和人参炔醇含量的方法。采用大连依利特C_(18)(4.6 mm×250 mm;5.0μm)色谱柱。流动相乙腈-水(0.3%磷酸)梯度洗脱,流速1.0 mL/min,检测波长254 nm,柱温25℃,进样量30μL,比较测定了23批北沙参药材、参皮和茎叶中法卡林二醇、人参炔醇的含量。结果表明:在0.06~1.20μg质量范围内,法卡林二醇(r_a=0.9999)和人参炔醇(r_b=0.9998)呈现良好的线性关系,法卡林二醇的平均回收率为101.7%(RSD=2.6%,n=5),人参炔醇的平均回收率为97.5%(RSD=1.9%,n=5)。本方法准确、灵敏、稳定、重现性好,可作为北沙参药材的质量控制方法。 张样柏 李国强 管华诗关键词:北沙参 人参炔醇 HPLC 丹参药材水溶性成分HPLC化学指纹图谱研究 被引量:16 2008年 目的:对9个地区的丹参18批样品建立丹参药材水溶性成分HPLC指纹图谱。方法:运用Agilent 1100 DAD-HPLC高效液相色谱仪,采用大连依利特Sino Chrom ODS-BP(250 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱,甲醇-0.7%磷酸水梯度洗脱,流速1.0 mL/min,检测波长280 nm,柱温30℃,进样量20μL,测定了18批丹参药材并进行聚类分析。结果:根据聚类分析结果,采用安徽不同来源的10批丹参药材,建立了丹参水溶性成分指纹图谱共有模式,显示12个共有峰,指认了丹参素钠、表儿茶醛、丹酚酸B 3个特征峰。结论:建立的丹参药材水溶性成分指纹图谱,色谱图中个峰分离度较好,特征明显,方法的精密度重现性试验的RSD值小于5%,可做为丹参药材质量控制标准。 唐旭利 刘静 李国强 钟惠民关键词:丹参 指纹图谱 RP-HPLC 聚类分析 低拷贝核基因在异源多倍体植物中的进化与表达 被引量:10 2007年 异源多倍体植物在自然界中广泛分布。在这类植物谱系中,低拷贝核基因具有特殊的进化特点和丰富的植物系统发生信息,在转录水平存在基因沉默、基因激活和不均等表达等特点。以低拷贝核基因为主线,概述了其在多倍体植物系统发生中的应用和相关注意事项,并对其在多倍体植物中的表达变化及其分子机制进行了探讨,系统地介绍了国际上相关领域的研究成果和最新动向。 刘志鹏 王能飞 赵爱云 沈继红 刘小丽 刘公社关键词:异源多倍体 基因表达 红花药材水溶性成分HPLC指纹图谱研究 被引量:3 2007年 目的:建立红花药材水溶性成分HPLC指纹图谱。方法:运用Agilent1100 DAD-HPLC高效液相色谱仪,采用大连依利特SinoChrom ODS-BP(250 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱,甲醇-磷酸水梯度洗脱,流速1.0 ml/min,检测波长280 nm,柱温30℃,进样量20μl,测定了18批红花药材并进行聚类分析。结果:聚类分析结果表明,新疆不同地区的10批红花药材相似度较好。本文以新疆10批红花药材建立了药材指纹图谱共有模式,包含22个共有峰。结论:采用RP-HPLC方法建立的红花药材指纹图谱,方法稳定可靠简便,色谱图展现的各峰分离度较好,特征明显,可做为红花药材真伪鉴别标准。 唐旭利 刘静 李国强 钟惠民 邱培菊 张静关键词:红花 指纹图谱 注射用丹红(粉针)-中间体-药材HPLC指纹图谱相关性研究 被引量:6 2009年 探讨中药指纹图谱相关性研究方法,运用Agilent 1100 DAD-HPLC高效液相色谱仪,采用色谱条件:大连依利特SinoChrom ODS-BP(250 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱,甲醇-0.1%磷酸水梯度洗脱,柱温30℃,流速1.0 mL.min-1,检测波长280 nm,进样量20μL。建立了的相同条件下丹红注射剂、中间体和药材的HPLC指纹图谱。所建立的指纹图谱个峰分离度较好,指纹信息完整,符合指纹图谱技术规范。进一步利用相似度分析软件进行了指纹图谱相关性分析,揭示了丹红注射剂与中间体和药材具有较好的相关性。共有峰的相对保留时间及相对峰面积参数,可作为中药注射剂质量控制的重要依据。 唐旭利 刘静 李国强 钟惠民 张静关键词:HPLC 北沙参的化学成分研究 被引量:12 2008年 为了进一步研究药材北沙参(Glehnia littoralisF.Schmidt ex Miq)的药效物质基础,采用硅胶柱色谱、凝胶色谱Sephadex LH-20和高效液相色谱方法,从药材北沙参中分离得到了8个化合物。运用IR、1DNMR、2DNMR及与文献比较,鉴定它们的结构分别为:羽扇豆醇(Ⅰ)、桦木醇(Ⅱ)、β-谷甾醇(Ⅲ)、胡萝卜苷(Ⅳ)、人参炔醇(Ⅴ)、法卡林二醇(Ⅵ)、(8E)-1,8-heptadecadiene-4,6-diyne-3,10-diol(Ⅶ)和异欧前胡素(Ⅷ)。其中,化合物Ⅰ,Ⅱ和Ⅳ为首次从该药材中分离得到。 张样柏 唐旭利 李国强 管华诗关键词:北沙参 三萜 炔醇 不同产地白花蛇舌草中对香豆酸含量测定的快速方法 被引量:4 2008年 目的建立实用的不同产地白花蛇舌草中对香豆酸的高效液相色谱含量测定方法。方法采用AgilentEclipse×DB-C18(250mm×4.6mm,5μm)色谱柱,乙腈-0.1%磷酸水溶液梯度洗脱,流速1.0mL·min-1,检测波长230nm,柱温30℃,进样量20μL,测定了6批不同来源的白花蛇舌草药材。结果线性范围4~64μg·mL-1,r=0.9998,平均回收率(n=6)为96.86%,RSD=0.22%。结论本法简便快速,重现性良好,可作为白花蛇舌草药材质量控制的有效方法。 唐旭利 刘静 李国强 邱培菊 钟惠民关键词:白花蛇舌草 对香豆酸 高效液相色谱法 均匀设计优化白花蛇舌草中对香豆酸的提取工艺 被引量:1 2007年 采用均匀设计优化白花蛇舌草中对香豆酸的提取工艺。以对香豆酸含量、干浸膏得率为指标,考察药材的提取溶剂、溶媒量、提取温度、提取时间等因素对提取工艺的影响。优化工艺:水为提取溶剂,料液质量比1∶100,提取温度100℃,提取时间4 h。提取工艺可靠、简便。 刘静 郭森辉 李国强 钟惠民关键词:白花蛇舌草 均匀设计 对香豆酸 高效液相色谱法 南极冰藻Chlamydomonas sp.ICE-L的cDNA文库构建及品质检测 被引量:1 2006年 为构建南极冰藻Chlamydomonas sp.ICE-L的cDNA文库,提取对数生长期南极冰藻ICE-L的总RNA,以此为模板,通过PowerScript逆转录酶逆转录合成第一链cDNA;再以第一链cDNA产物为模板,用LD-PCR合成第二链cDNA。该cDNA产物经分级分离转入大肠杆菌中,即获得南极冰藻IcBL的cDNA原始文库,其滴度为1.6×10^6 cfu/mL。扩增后的cDNA文库的滴度为1.0×10^10 cfu/mL。用PCR方法测得文库的重组率大干97%,插入cDNA的长度为0.5~1.8kb,0.9kb以上插入片段占50%以上。取适量扩增文库稀释并铺平板,挑取72个独立菌落,对其中22个独立菌落所插入的cDNA进行测序,克隆到了一个具有5’和3’非编码区的40S ribosomal protein S5全长基因序列,GenBank收录号为AM167929。 王能飞 沈继红 金治平 赵爱云 林学政关键词:南极冰藻 RIBOSOMAL CDNA文库