国家现代农业产业技术体系建设项目(NYCYTX009)
- 作品数：10 被引量：26H指数：4
- 相关作者：张桂红郭泗虎闫明菲曹宗喜张亮权更多>>
- 相关机构：华南农业大学海南省农业科学院中国农业科学院哈尔滨兽医研究所更多>>
- 发文基金：国家现代农业产业技术体系建设项目国家自然科学基金广州市科技支撑计划项目更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 检测猪戊型肝炎病毒的荧光定量PCR方法的建立被引量：4
- 2011年
- 根据GenBank中猪戊型肝炎病毒的ORF2核苷酸序列的保守区域设计合成一对特异性引物,建立了一套SYBRGreenⅠ荧光定量PCR检测猪源戊型肝炎病毒(swHEV)的方法,并评价了该方法的灵敏度、稳定性和特异性,同时与常规的RT-nPCR进行对比分析。结果表明,建立标准曲线的相关系数为0.998,斜率为-3.039,Ct值变异系数(CV)在0.17%～1.41%之间,有良好的稳定性。同时在检测猪群常见病中显示出很好的特异性,并且比RT-nPCR更灵敏,适合于swHEV的检测。
- 张亮权欧阳昀刘志刚曹宗喜闫明菲王文华郭泗虎张桂红
- 关键词：猪戊型肝炎病毒荧光定量PCR
- PRRSV ZQ-GD-2010株的分离及ORF5和ORF7基因的序列分析被引量：1
- 2012年
- 为了给研制基因工程疫苗选取毒株奠定基础,研究采集广东肇庆某猪场疑似患高热症猪的病料,通过RT-PCR检测、病毒分离传代,证实分离到1株猪繁殖与呼吸综合征病毒,命名为ZQ-GD-2010株,并对其ORF5和ORF7基因进行序列测定,绘制遗传进化树。结果表明:该毒株为美洲型,其ORF5和ORF7基因核苷酸与近年来我国分离到的美洲型毒株的相似性为96%～100%,而与欧洲型毒株LV株的相似性仅为58.9%～62.8%;其与2007—2009年国内分离株的遗传演化关系较近。
- 闫明菲曹宗喜贺丹丹郭泗虎张超轶张民泽张桂红
- 关键词：ORF5基因ORF7基因
- 嗜酸乳杆菌细胞壁提取物对致病性大肠杆菌粘附鸡肠纹状缘膜的影响被引量：4
- 2012年
- 为研究嗜酸乳杆菌细胞壁提取物对致病性大肠杆菌(E.coli)粘附鸡肠纹状缘膜的影响,本实验以雏鸡小肠纹状缘膜为模型,以嗜酸乳杆菌和鸡致病性E.coli O78为研究对象,提取嗜酸乳杆菌表层蛋白、肽聚糖及E.coli O78菌毛,雏鸡小肠纹状缘膜,采用固相粘附试验和生物素标记法从分子间相互作用的关系评价了嗜酸乳杆菌细胞壁提取物对菌毛粘附的抑制作用,结果表明:表层蛋白和肽聚糖对菌毛粘附具有明显的抑制作用,呈浓度依赖性抑制菌毛与纹状缘膜的结合,具有竞争性拮抗作用,这主要是由空间占位造成的。肽聚糖的抑制作用相对较小。
- 粟硕王艳菁齐海涛王利黄震陈济铛张桂红
- 关键词：嗜酸乳杆菌肽聚糖菌毛
- 多种亚型猪流感病毒混合感染的纯化和鉴定被引量：2
- 2013年
- 为了研究多种亚型猪流感病毒混合感染后病毒的纯化,试验采用鸡胚终点稀释法结合特异血清中和法对可能混合多种亚型猪流感病毒的样品进行纯化,并对纯化结果进行HI和RT-PCR试验进行验证。结果表明:此种方法纯化病毒是可行的,不同代次不含外源病毒。
- 曹楠齐海涛孔维立王衡谭力凯张桂红
- 关键词：猪流感病毒纯化
- 两株猪繁殖与呼吸征病毒的分离鉴定及遗传变异分析被引量：2
- 2012年
- 从广东省发病猪场采集的组织和血清中分离到两株PRRSV,病料经RT-PCR检测为阳性,通过Marc-145细胞进行传代,可产生明显细胞病变,通过间接免疫荧光可检测到荧光信号,两株病毒分别命名为ZH-GD株和ZS-GD株。对两株病毒的ORF5和Nsp2高变区进行序列测定和分析,结果表明,PRRSV ZH-GD株和ZS-GD株的核苷酸序列与欧洲型代表株LV株间的相似性相对较远,与美洲株经典毒株VR-2332间的相似性分别为88.6%和88.1%,与中国经典美洲毒株CH-1a间的相似性分别为94.4%和93.0%。在Nsp2上有30个氨基酸的缺失,与JXA1、XH-GD等高致病性变异株的Nsp2缺失位置一致。分离的两株PRRSV均属于美洲型的变异株PRRSV。
- 张超轶吴欣伟闫明菲张亮权郭泗虎黄昌力黄震张民泽赵付荣张桂红
- 关键词：PRRSV
- 广东地区猪源戊型肝炎病毒的检测和核苷酸序列分析被引量：2
- 2011年
- 为了检测广东地区部分猪场猪群中的猪源戊型肝炎病毒(HEV)RNA,试验利用反转录巢式聚合酶链式反应(RT-nPCR)并应用生物学软件将经扩增和测序得到的猪源HEV核苷酸序列与GenBank上的各个基因型HEV进行相似性比较分析。结果表明:5个样品中检测到HEV RNA,它们的相似性为85.1%～96.3%,与GenBank上基因Ⅰ型、Ⅱ型、Ⅲ型和Ⅳ型HEV序列的相似性分别为76.1%～80.5%、76.5%～79.4%、76.4%～80.2%、82.1%～97.7%。说明广东地区存在的猪源HEV可能属于在国内猪群中流行的基因Ⅳ型。
- 刘志刚曹宗喜张得玉秦宏阳张亮权孔维立吴欣伟于俊勇王文华于淼张桂红
- 关键词：基因亚型
- CD163基因的克隆及其胞外区基因表达质粒的构建
- 猪繁殖与呼吸综合征（Porcine reproduct ive and respiratory syndrome,PRRS）是由猪繁殖与呼吸综合征病毒（Porcine reproductive and respirato...
- 曹宗喜焦培荣贾坤吴欣伟于俊勇张桂红
- 关键词：胞外区克隆
- 文献传递
- H3亚型猪流感病毒SYBR GreenⅠ实时荧光定量PCR检测方法的建立被引量：6
- 2012年
- 为建立一种快捷、可行的检测H3亚型猪流感病毒(SIV)的方法,本研究根据GenBank中登录的H3亚型SIV HA基因的保守序列,设计合成一对特异性引物,建立了一种检测H3亚型SIV的SYBR GreenⅠ荧光定量检测方法,并进行灵敏度、稳定性和特异性试验,与普通PCR进行比较。研究结果表明,标准曲线的循环阈值与模板浓度呈现良好的线性关系,R2为0.994,CV在0.17%～1.41%之间,具有良好稳定性。除H3亚型SIV外,对H1、H4、H6、H9亚型SIV以及猪瘟病毒、猪繁殖与呼吸综合征病毒、口蹄疫病毒和猪圆环病毒2型的检测均为阴性,与普通PCR相比更灵敏。该方法特异性好,准确率高,适于临床分离鉴别H3亚型SIV。
- 郭泗虎王文华张亮权齐海涛曹楠闫明菲黄昌力张超轶张桂红
- 关键词：猪流感H3亚型
- 一株猪繁殖与呼吸综合征病毒的分离鉴定被引量：1
- 2012年
- 为了对从湖南某发病猪场送检的血清中分离到的1株蓝耳病病毒进行鉴定,试验通过接种Marc-145细胞传代后产生明显而稳定的细胞病变,又经过RT-PCR及间接免疫荧光(IFA)检测成功验证;通过对分离株的ORF5基因的测序结果表明,ORF5核苷酸序列与欧洲型代表株LV株及北美经典毒株VR-2332、国内经典美洲株CH-1a的相似性分别为64.5%、87.4%、93.0%,说明其属于美洲型;而将NSP2高变区的测序结果与JXA1等高致病性变异株的Nsp2比较后发现,都在同一位置不连续缺失30个氨基酸。说明成功分离到1株北美型变异株,最终将其命名为PRRSV CZ-HN株。
- 郭泗虎曹宗喜李海琴闫明菲张超轶张民泽赵付荣张桂红
- 关键词：猪繁殖与呼吸综合征病毒
- 反向遗传操作技术在猪繁殖与呼吸综合征病毒疫苗研发中的应用
- 2011年
- 猪繁殖与呼吸综合征（PRRS）是由猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）引起猪的一种高度传染性疾病。该病自1987年首次发现以来，已遍及世界各个养猪国家，它所引发的母猪流产和仔猪的呼吸障碍给养猪业造成了灾难性的打击。特别是2006年以来，变异株PRRSV的出现则对我国养猪业的发展产生了巨大的影响。
- 郭泗虎曹宗喜李海琴闫明菲亓文宝焦培荣张桂红
- 关键词：猪繁殖与呼吸综合征病毒反向遗传操作技术病毒疫苗传染性疾病PRRSV
