国家自然科学基金(81271346)
- 作品数：9 被引量：72H指数：5
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- 自噬在骨性关节炎中的研究进展被引量：7
- 2017年
- 骨性关节炎(osteoarthritis,OA)以关节肿胀和疼痛为主要症状,严重影响患者生活质量,寻找治疗骨性关节炎有效药物成为当今研究热点。目前临床主要有:口服非甾体类抗炎药物,关节腔内注射玻璃酸钠等,以缓解疼痛,改善关节活动度的对症治疗,尚未发现有效治愈骨性关节炎的靶向药物。骨性关节炎的病理表现以滑膜炎和软骨退变为主。目前研究发现软骨细胞自噬水平下降是软骨退变原因之一,可能是治疗骨性关节炎药物靶点。该文就自噬定义、相关信号通路及影响因素,自噬在软骨细胞中的作用及骨关节炎中自噬等予以综述,为寻找有效治疗骨性关节炎药物提供新的思路。
- 赵旭傅志俭
- 关键词：骨性关节炎软骨退变软骨细胞自噬
- 慢病毒介导RNAi沉默大鼠脊髓神经元NF-κB p65基因的观察被引量：1
- 2014年
- 目的 构建NFκBp65基因RNA干扰（RNAi）慢病毒载体并转染体外培养的大鼠脊髓神经元,观察其沉默效率。方法 针对大鼠NFκBp65基因特异性序列,设计3条NFκBp65siRNA序列及1条阴性对照序列,合成包含各正反义靶序列的互补DNA链,退火形成双链DNA,插入到经BamHI和EcoRI酶切后的pFUGW慢病毒载体中,PCR筛选阳性克隆,DNA测序鉴定。与慢病毒包装质粒pHelper1.0、pHelper2.0通过lipofectamine2000共转染至包装细胞293T,经滴度测定后转染体外培养的大鼠脊髓神经元。实验分为5组：阴性对照组、LVNC组、LVshNFκBp651组、LVshNFκBp652组和LVshNFκBp653组,观察转染效率,Westernblotting法检测慢病毒表达载体对神经元NFκBp65基因的沉默效应。结果 测序结果证实合成的寡核苷酸链插入正确,重组载体构建成功,测定病毒滴度为108～9TU/mL,慢病毒重组体能够成功转染大鼠脊髓神经元,转染效率大于90%,与阴性对照组或LVNC组比较,LVshNFκBp651组和LVshNFκBp652组NFκBp65蛋白的表达明显下调（P均〈0.01）,而LVshNFκBp653组无明显下调（P〉0.05）。结论 成功构建了大鼠神经元NFκBp65基因的RNAi慢病毒载体,它可使大鼠脊髓神经元NFκBp65基因表达下调。
- 罗剑刚孙涛林小雯李芸赵菲苗贵申傅志俭
- 关键词：慢病毒神经元
- 臭氧治疗炎性痛的应用研究被引量：37
- 2016年
- 炎性痛广泛存在于各种疾病进程中,对患者的工作和生活影响较大,其治疗是世界医学难题之一,现有临床各类药物虽有一定疗效,但均因具有不同程度的不良反应而限制了其对疼痛的有效治疗,因此,寻求更为有效安全的治疗方法 ,就显得尤其重要。医用臭氧作为一种新型的治疗方式,具有抗炎镇痛、改善局部组织的缺氧情况和血液循环的作用,而且操作简单、费用较少、创伤小、安全性高,在治疗颈椎病、腰椎间盘突出症、骨性关节炎、口腔疾病、血液疾病、呼吸系统疾病、慢性感染性疾病等方面有明显优势,在临床上已广泛开展。对于医用臭氧治疗炎性痛的临床疗效及发挥作用的机制已有大量的文献报道。本文综述了臭氧在治疗脊柱相关性炎性痛、关节相关性炎性痛和软组织炎性痛等方面的临床疗效,为以后的临床炎性痛的治疗提供可行方向。
- 李芸傅志俭
- 关键词：臭氧炎性痛
- 神经病理性疼痛大鼠脊髓IL-33蛋白表达的变化被引量：4
- 2015年
- 目的：观察外周神经慢性压榨性损伤（chronic constrictive injury,CCI）大鼠脊髓白介素-33（interleukin-33,IL-33）表达的变化规律。方法：雄性Wistar大鼠60只,分为手术组和假手术组,每组30只,于CCI前1天、CCI后第1、4、7、14、21天各时间点测定机械痛阈及热痛阈后立即处死大鼠,每个时间点5只,取L4~6脊髓,采用Western blot方法测定IL-33的蛋白表达变化。结果：手术组大鼠术侧机械痛阈及热痛阈明显降低,脊髓IL-33水平表达增加,明显高于对侧和假手术组术侧;IL-33蛋白水平于CCI后第1天开始增加,第7天达到高峰（P〈0.01）,于CCI后第21天仍维持于较高水平（P〈0.05）。结论：CCI致大鼠脊髓IL-33活化,参与神经病理性疼痛的调控过程。
- 罗剑刚左玲许维澄林小雯李芸赵菲苗贵申孙涛傅志俭
- 关键词：神经病理性疼痛白介素-33
- 凯纷复合氟哌利多和芬太尼对全髋置换患者应激反应的影响被引量：1
- 2017年
- 目的:探讨凯纷复合氟哌利多和芬太尼对硬膜外麻醉下全髋置换手术患者应激反应的影响.方法:将60例ASAⅠ~Ⅲ级在硬膜外麻醉下拟行全髋置换手术的患者随机分为3组,凯纷复合氟哌利多和芬太尼组(Ⅰ组,n=20),氟哌利多和芬太尼组(Ⅱ组,n=20),凯纷组(Ⅲ组,n=20).采用10.0 g/L利多卡因行硬膜外穿刺成功后,Ⅰ组患者静注凯纷1 mg/kg、氟哌利多0.05 mg/kg、芬太尼0.002 mg/kg;Ⅱ组患者静注氟哌利多0.05 mg/kg和芬太尼0.002 mg/kg;Ⅲ组患者静注凯纷1 mg/kg.观察麻醉效果及并发症发生情况,记录麻醉前10 min,切皮后30、60和90 min的血压、心率,同时检测麻醉前10 min,切皮后30、60和90 min的血浆肾素、血管紧张素Ⅱ、醛固酮、血清皮质醇.结果:三组患者麻醉前的血压、心率、血浆肾素、血管紧张素Ⅱ、醛固酮、血清皮质醇比较,差异无统计学意义(P>0.05).Ⅰ组患者切皮后30、60和90 min的血压、心率、血浆肾素、血管紧张素Ⅱ、醛固酮、血清皮质醇浓度低于Ⅱ组和Ⅲ组(P<0.05),Ⅱ组和Ⅲ组患者切皮后30、60和90 min的血压、心率、血清皮质醇等比较,差异无统计学意义(P>0.05).结论:硬膜外麻醉凯纷复合氟哌利多和芬太尼均能减轻全髋置换患者应激反应所致的血流动力学变化以及血清皮质醇的变化.
- 褚文彦吴明毅孙玉明李江伟郭玉洁
- 关键词：硬膜外麻醉全髋置换应激
- 臭氧对骨性关节炎大鼠关节软骨Wnt/β-catenin信号通路的影响被引量：5
- 2016年
- 目的 探讨臭氧对骨性关节炎大鼠关节软骨Wnt/β-连环蛋白（β-catenin）信号通路的影响.方法 健康雄性SPF级Wistar大鼠18只,3月龄,体重200～ 250 g,采用随机数字表法分为3组（n=6）：正常对照组（C组）、骨性关节炎组（OA组）和臭氧组（O组）.采用膝关节腔内注射含3mg碘乙酸钠水溶液50 μl的方法制备骨性关节炎模型.注药后7d,O组右后肢膝关节腔注射25μg/ml臭氧1 ml,每周1次,连续3周.造模后观察大鼠行为学改变.于造模前1d、造模后1、4、7、14、21和28 d时测定机械缩足反应阈.造模后28 d时,截取整个膝关节,行HE染色,光镜下观察软骨病理学结果,采用免疫组化法测定膝关节软骨β-catenin和基质金属蛋白酶-13（MMP-13）的表达水平.结果 大鼠造模后出现跛行、膝关节肿胀、关节活动降低等关节炎的表现,以及舐足等痛觉过敏表现.与C组比较,其余2组造模后各时点机械缩足反应阈降低,膝关节软骨β-catenin和MMP-13表达上调（P＜0.05）;与OA组比较,O组造模后7-28 d时机械缩足反应阈升高,膝关节软骨β-catenin和MMP-13表达下调（P＜0.05）.O组膝关节软骨病理学损伤较OA组减轻.结论 臭氧减轻大鼠骨性关节炎的机制可能与抑制关节软骨Wnt/β-catenin信号通路激活有关.
- 姜鹏李芸王珺楠林小雯谢珺田傅志俭
- 关键词：臭氧WNT蛋白质类Β连环素
- 臭氧对腰椎间盘突出症患者髓核NO和IL-6水平的影响：离体实验被引量：7
- 2015年
- 目的 评价臭氧（O3）对腰椎间盘突出症患者髓核NO和IL-6水平的影响.方法 经椎间孔镜取出16例腰椎间盘突出症患者的髓核,每个髓核均分为3份,采用随机数字表法,将其分为3组（n=16）：对照组（C组）不施加任何干预;O320μg/ml组（O320组）和O340μg/ml组（O340组）分别注入20 μg/ml O3和40 μg/ml O3各2 ml.20 min后体外培养72 h,收集培养液,采用硝酸酶还原法检测NO浓度,采用ELISA法检测IL-6浓度;采用实时荧光定量PCR法检测诱导型一氧化氮合酶（iNOS） mRNA和IL-6 mRNA的表达水平.结果 与C组比较,O320组和O340组髓核培养液NO和IL-6的浓度降低,髓核组织iNOS mRNA和IL-6 mRNA的表达下调（P＜0.05）;O320组和O340组间上述指标比较差异无统计学意义（P＞ 0.05）.结论 O3治疗腰椎间盘突出症患者腰腿痛的机制与其减少椎间盘NO合成和降低局部炎性反应有关.
- 赵菲赵学军林小雯王珺楠罗剑刚苗贵申姜鹏傅志俭
- 关键词：臭氧椎间盘移位
- 医用臭氧对大鼠骨关节炎软骨细胞中PPARγ及自噬水平表达的影响被引量：4
- 2020年
- 目的探讨医用臭氧对大鼠骨性关节炎软骨细胞中过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)及自噬相关蛋白表达的影响,及PPARγ在臭氧诱导的软骨细胞自噬中的作用。方法选取出生3 d以内的Wistar大鼠10只,获取四肢关节软骨进行原代软骨细胞的分离培养,并通过甲苯胺蓝染色及Ⅱ型胶原蛋白免疫荧光进行软骨细胞的鉴定。通过10 ng/mL白介素-1β(IL-1β)刺激24 h构建骨关节炎软骨细胞模型。造模后采用不同浓度臭氧处理30 min,采用CCK-8法检测不同浓度臭氧对软骨细胞活力的影响,选出最佳臭氧浓度。造模后加入PPARγ特异性抑制剂GW9662处理12 h,再给予30μg/mL臭氧处理。将原代软骨细胞随机分为对照组、模型组、模型臭氧组、正常臭氧组、模型臭氧+抑制剂组及模型抑制剂组。采用Western blotting法检测PPARγ蛋白及自噬相关蛋白LC3Ⅱ、P62及Beclin-1的表达。采用免疫荧光技术检测软骨细胞的自噬相关蛋白LC3B及P62的表达。结果经甲苯胺蓝染色及Ⅱ型胶原蛋白免疫荧光鉴定,分离培养的细胞为软骨细胞。不同浓度臭氧处理后,30μg/mL臭氧处理后骨性关节炎软骨细胞的活力得到改善(P<0.05),50、70μg/mL臭氧明显抑制骨性关节炎软骨细胞的活力(P<0.05)。30μg/mL臭氧提高了骨性关节炎软骨细胞中PPARγ及自噬相关蛋白LC3Ⅱ及Beclin-1的表达水平,抑制了P62蛋白的表达(P<0.05)。PPARγ特异性抑制剂GW9662(20 mmol/mL)抑制臭氧对骨性关节炎软骨细胞自噬相关蛋白LC3Ⅱ、Beclin-1上调作用,并可逆转臭氧对P62的抑制作用。结论30μg/mL医用臭氧可以促进骨性关节炎软骨细胞自噬,PPARγ激活在臭氧诱导骨性关节炎软骨细胞的自噬中起到促进作用。
- 孙盼盼赵旭林小雯傅志俭
- 关键词：白介素-1Β过氧化物酶体增殖物激活受体Γ自噬
- 高浓度医用臭氧对大鼠运动功能和脊髓Bax、Bcl-2表达的影响被引量：7
- 2013年
- 目的:观察鞘内注射高浓度医用臭氧对大鼠运动功能和脊髓组织中Bax、Bcl-2基因表达的影响。方法:SD大鼠16只,随机均分为2组(n=8),分别建立大鼠鞘内置管模型。对照组(C组)仅行鞘内穿刺置管不注射;医用臭氧组(O3-60组):鞘内置管后经导管注射60μg/mL医用臭氧10μL。麻醉前及注射医用臭氧后24 h分别对两组大鼠进行BBB运动功能评分;然后立即断颈取材,采用Western blot测定腰膨大处脊髓组织Bax、Bcl-2蛋白表达水平。结果:与对照组相比,鞘内注射高浓度医用臭氧24 h后,臭氧组大鼠后肢BBB运动功能评分(Basso Beattie andBresnahan locomotor rating scales,BBB scores)显著降低(P<0.05);脊髓Bax蛋白表达显著增加(P<0.05),Bcl-2/Bax比值显著降低(P<0.05)。结论:高浓度医用臭氧鞘内注射可损伤大鼠运动功能,其损伤可能与神经细胞凋亡有关。
- 许维澄林小雯王群波傅志俭
- 关键词：医用臭氧神经细胞凋亡BAXBCL-2
