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吉林省科技厅国际合作项目(20080723)
作品数:
1
被引量:1
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赵建武
王岩
邢志军
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2009
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人LIMK1基因荧光真核表达载体的构建及在人成骨肉瘤MG63细胞中的表达
被引量:1
2009年
目的构建并表达人LIMK1与绿色荧光蛋白(EGFP-C1)的融合蛋白EGFP-LIMK1,并监测其在人成骨肉瘤MG63细胞内的表达及活性。方法利用基因重组技术将LIMK1与绿色荧光蛋白融合并构建真核细胞表达质粒,通过脂质体介导法导入人成骨肉瘤MG63细胞内,用荧光显微镜观察LIMK1基因表达情况,通过Western blot检测其在MG63细胞中的活性。结果双酶切鉴定证实LIMK1片段已克隆到pEGFP-C1载体的KpnⅠ和NotⅠ位点之间,测序结果证实了插入片段的正确性,转染MG63细胞后,利用荧光显微镜观察可见到绿色荧光蛋白的表达;Western blot检测证实LIMK1在MG63细胞中活性上调。结论成功构建了含有绿色荧光蛋白基因的LIMK1真核表达载体并检测到其在真核细胞MG63中的表达及活性。
邢志军
赵建武
王岩
高忠礼
关键词:
转染
LIMK1
MG63
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