中央级公益性科研院所基本科研业务费专项(BRF070305)
- 作品数：3 被引量：12H指数：1
- 相关作者：米宝明王东升严作廷王桂荣宗瑞谦更多>>
- 相关机构：中国农业科学院兰州畜牧与兽药研究所甘肃农业大学兰州大学更多>>
- 发文基金：中央级公益性科研院所基本科研业务费专项更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 乳牛子宫内膜抗菌肽BNBD5基因的克隆及其原核表达被引量：10
- 2009年
- 为研发防治乳牛子宫内膜炎的抗菌肽生物制剂,根据已发表的牛抗菌肽基因序列设计了1对引物,用试剂盒提取乳牛新鲜子宫内膜总RNA,经RT-PCR扩增,将克隆的抗菌肽BNBD5基因全长编码区的cDNA连接到原核表达载体pET30a中,经IPTG诱导原核表达,通过Western-blot检测融合蛋白BNBD5的表达水平。结果表明,RT-PCR扩增出的cDNA片段长138 bp,编码45个氨基酸的多肽,多肽中含6个保守半胱氨酸残基。用Blast程序进行检索比较显示,克隆出了牛防御素家族成员BNBD5基因,并成功构建了pET30a-BNBD5载体,经IPTG诱导,pET30a-BNBD5原核表达产物的相对分子质量约为10 ku,与预期的融合蛋白大小一致,证实构建的重组质粒能够在大肠杆菌中表达。
- 王桂荣严作廷王东升米宝明崔燕
- 关键词：乳牛克隆原核表达
- 奶牛子宫内膜粘液抗菌肽的分离纯化
- 研究目的:为研发奶牛抗菌肽生物制剂,防治奶牛子宫内膜炎疾病。研究方法:采用酸性尿素聚丙烯酰胺凝胶电泳琼脂糖弥散法检测子宫内膜粘液酸溶性提取物抗菌活性:应用琼脂糖电泳及水平电泳洗脱分离相应的抗菌条带,HPLC进一步分离纯化...
- 严作廷米宝明宗瑞谦祝秉东王桂荣李世宏王东升
- 关键词：子宫内膜抗菌肽分离纯化
- 文献传递
- 牛抗菌肽研究进展被引量：1
- 2009年
- 米宝明严作廷宗瑞谦王东升
- 关键词：抗菌肽抗微生物肽抗菌作用生物体内组成成分先天免疫
- 奶牛子宫内膜粘液抗菌肽的分离纯化被引量：1
- 2010年
- 为研发奶牛抗菌肽生物制剂,防治奶牛子宫内膜炎,本研究采用酸性尿素聚丙烯酰胺凝胶电泳琼脂糖弥散法检测子宫内膜粘液酸溶性提取物抗菌活性;应用琼脂糖电泳及水平电泳洗脱分离相应的抗菌条带,HPLC进一步分离纯化,琼脂糖弥散法检测纯化分子抗菌活性,Tricine-SDS-PAGE电泳检测其分子量。结果表明,从奶牛子宫内膜酸溶性提取物中纯化出一分子量约为14kD左右的抗菌多肽,对大肠杆菌(E.coliBL21)和金黄色葡萄球菌26003具有抗菌活性。本研究可能分离纯化出一种新的子宫内膜分泌的抗菌多肽,其可能参与奶牛子宫的天然防御机制。
- 严作廷米宝明宗瑞谦祝秉东王桂荣李世宏王东升
- 关键词：奶牛子宫内膜抗菌肽分离纯化
