您的位置: 专家智库 > >

国家自然科学基金(39770767)

作品数:15 被引量:48H指数:3
相关作者:邹萍徐之良刘凌波胡中波胡中波更多>>
相关机构:华中科技大学武汉大学同济医科大学附属协和医院更多>>
发文基金:国家自然科学基金更多>>
相关领域:医药卫生生物学更多>>

文献类型

  • 15篇中文期刊文章

领域

  • 14篇医药卫生
  • 1篇生物学

主题

  • 11篇细胞
  • 8篇抗原
  • 7篇凋亡
  • 7篇细胞凋亡
  • 7篇基因
  • 5篇FAS抗原
  • 5篇FAS配体
  • 4篇基因转移
  • 4篇骨髓
  • 3篇移植物抗宿主
  • 3篇移植物抗宿主...
  • 3篇造血
  • 3篇植物抗宿主病
  • 3篇淋巴
  • 3篇淋巴细胞
  • 3篇免疫
  • 3篇抗宿主病
  • 3篇骨髓移植
  • 3篇FAS
  • 3篇FAS/FA...

机构

  • 9篇华中科技大学
  • 7篇武汉大学
  • 3篇同济医科大学...
  • 1篇河南省人民医...

作者

  • 12篇邹萍
  • 7篇徐之良
  • 6篇刘凌波
  • 5篇胡中波
  • 3篇刘忠文
  • 3篇王良利
  • 3篇胡中波
  • 2篇江钟炎
  • 2篇肖娟
  • 2篇黄星原
  • 2篇龚非力
  • 1篇宋善俊
  • 1篇向建平
  • 1篇游泳
  • 1篇游泳
  • 1篇李惠玉
  • 1篇马艳萍
  • 1篇潘琦
  • 1篇陈燕
  • 1篇刘凌波

传媒

  • 4篇中华器官移植...
  • 2篇中华血液学杂...
  • 2篇华中科技大学...
  • 2篇Journa...
  • 1篇国外医学(免...
  • 1篇中华儿科杂志
  • 1篇临床血液学杂...
  • 1篇中国肿瘤临床
  • 1篇武汉大学学报...

年份

  • 1篇2004
  • 2篇2003
  • 6篇2002
  • 3篇2001
  • 3篇2000
15 条 记 录,以下是 1-10
排序方式:
人外周血淋巴细胞Fas的表达及细胞凋亡的诱导被引量:6
2000年
目的 研究Fas系统对外周血淋巴细胞的影响。方法 将分离、纯化后的淋巴细胞进行单向混合淋巴细胞培养 ,用流式细胞术动态检测新鲜分离和激活后的T淋巴细胞表面Fas表达水平 ,并用DNA电泳和原位末端标记技术分别从定性和定量的角度观察Fas系统激活与否对混合培养后淋巴细胞凋亡率的影响。结果 T淋巴细胞在被激活后Fas表达水平升高 ,加抗Fas单克隆抗体组的细胞凋亡率高于未加抗体的对照组 (P <0 .0 5 )。
王良利邹萍胡中波
关键词:淋巴细胞抗原基因表达FAS细胞凋亡
Fas/FasL途径在造血干细胞移植免疫中的实验研究被引量:2
2003年
目的 探讨转染FasL的CD34+ 细胞对同种抗原特异性T细胞和白血病细胞凋亡的影响。方法 丝裂霉素C预处理表达外源FasL的骨髓CD34+ 细胞 ,分别与经过富集的T细胞 (刺激细胞 /效应细胞比例为 5∶1)和白血病细胞U937混合培养 ,借助原位末端标记法 (TUNEL)和流式细胞仪 (FCM )检测T细胞和白血病细胞的凋亡率。结果 分别以未转染和转染外源FasL的CD34+ 细胞为刺激细胞 ,5d后 ,T细胞凋亡率分别为 :3.2 %± 1.1%、12 .1%± 1.5 % (P <0 .0 1) ,经IL 2作用后 ,凋亡率上升至 17.6 %± 1.3% (P <0 .0 1) ;与白血病细胞U937混合培养 18h后 ,白血病细胞凋亡率分别为 :5 .0 %± 1.3%、10 .8%± 0 .6 % (P <0 .0 1) ,加入阿糖胞苷后 ,凋亡率上升至 17.9%±1.3% (P <0 .0 1)。结论 转染外源FasL的骨髓CD34+ 细胞 ,可诱导同种抗原特异性T细胞和白血病细胞凋亡。提示通过Fas/FasL途径可选择性清除移植物中同种抗原特异性T细胞 ,有望为造血干细胞移植中防治移植物抗宿主病 (GVHD) ,保留移植物抗白血病效应 (GVL)提供新的策略。
肖娟邹萍刘忠文马艳萍胡中波刘凌波
关键词:造血干细胞移植FAS配体移植物抗宿主病
The Effect of the Fas/FasL Pathway during Chemotherapeutic Drug-induced Apoptosis of Leukameic Cells被引量:1
2001年
The mechanism of chemotherapeutic drug-induced apoptosis in leukaemic cells was studied to further investigate whether Fas/FasL system was involved in apoptosis induced by chemotherapeutic drugs and assess their effects when used in combination with soluble FasL (sFasL). The expression of Fas on human leukaemic cell lines K562, HL-60 and U937 treated with daunorubicin (DNR) or cytosine arabinoside (Ara-C) was detected by using flow cytometry. The activities of sFasL, DNR and Ara-C inducing apoptosis of leukaemic cells, in the absence or presence of neutralizing anti-Fas IgG antibody, were detected by using flow cytometry and TUNEL. The results showed that flow cytometric profiles of K562, HL-60 and U937 cells treated with DNR or Ara-C failed to show any significant increase in Fas expression over 18 h (P>0.05). Anti-Fas monoclonal antibody (IgG) could not block the apoptosis in leukaemic cells induced by DNR or Ara-C, but could block the apoptosis induced by sFasL. A role of sFasL in a cytotoxic synergistic effect when used in combination with chemotherapeutic drugs was revealed. It was concluded that chemotherapeutic drug-induced apoptosis in human leukaemic cells (UG37, HL-60) is independent of the Fas/FasL system, but combination of sFasL and drug treatment produces a synergistic cytotoxic effect on human luekaemic cells.
邹萍
关键词:CYTOTOXIC
Bioactivities of Culture Supernatants from Retroviral Packaging Cells Carrying the Mouse Fas Ligand Gene被引量:1
2001年
The bioactivities of culture supernatants from retroviral packaging cells carrying the mouse Fas ligand (mFasL) gene was investigated. FasLcDNA was cloned into PLXIN with an internal ribosome entry site to link two cistrons through gene recombination technology, PLXIN and the recombinant vector PLFIN were separately transfected into PA317 retrovirus packing cell line by lipofectamine 2000, and the resistant clones were selected with G418 selective medium. The integration of genome DNA was assayed by genomic DNA PCR. NIH3T3 cells were transduced by the culture supernatants from PA317 carrying the mFasLcDNA gene, and were selected with G418 selective medium, so as to select the PLFIN-PA317 clone capable of producing higher titer of supernatants. The levels of mFasL protein on NIH3T3 cells membrane were assayed by flow cytometry (FCM). The biological activity of mFasL on NIH3T3 cells membrane was investigated by the inducing apoptosis of Fas + Yac-1 cells co-cultured with NIH3T3 cells expressing Fas ligand. To explore the direct mFasL cytotoxicity of culture supernatants from retroviral packaging cells carrying the mFasL gene, the culture supernatants from PLFIN-PA317 and PLXIN-PA317 were separately co-cultured with Yac-1 cells in parallel. The recombinant PLFIN was successfully constructed. The highest titer of supernatants from twelve resistant clones was 8.5×10 5 colony-forming-unit (CFU)/ml. The NIH3T3 cells transfected by above supernatants had a higher level of mFasL (53.81±6.9 %), and significantly induced the apoptosis of Fas + Yac-1 cells (56.78±4.5 %), as both were cocultured for 5 h at 1∶1 ratio, whereas it is 7.08±3.4 % in control group (P<0.01). Supernatant from PLFIN-PA317 could also directly induce the apoptosis of Yac-1 within 5 h of incubation. Thus, the culture supernatants from PLFIN-PA317 possessed both infectivity and cytotoxicity of mFasL.
刘凌波
通过Fas-FasL途径体外清除小鼠同种异体反应性T细胞被引量:1
2002年
目的 通过Fas Fas配体 (FasL)途径清除小鼠同种异体反应性T细胞 (ARTC) ,为减轻异基因骨髓移植 (allo BMT)后的移植物抗宿主病探索新的手段。方法 用磁性细胞分离系统分离BALB c小鼠 (H 2 d)Sca 1+早期造血细胞 (HC) ,然后借助逆转录病毒基因转移技术对其转染外源小鼠FasL(mFasL)cDNA基因 ;扩增 1周后与异基因BAC小鼠 (H 2 d ×b)脾细胞进行单向混合淋巴细胞培养(OWMLC) 6d ,观察处理后的BAC小鼠脾细胞对Na251 CrO4标记的BALB c小鼠脾细胞的杀伤作用。结果 成功分离出BALB c小鼠Sca 1+HC ,纯度为 (89.0± 6 .1) %。BAC小鼠脾细胞与转染外源mFasL的BALB cHC以 1∶5比例共培养 6d后 ,对BALB c源脾细胞杀伤率在不同效、靶比例时均呈显著降低 (P<0 .0 1)。结论 体外反应中 ,转染外源mFasLcDNA并高表达的早期HC可清除针对自身MHC抗原的ARTC。
刘凌波邹萍徐之良胡中波陈燕宋善俊
关键词:FAS配体FAS抗原异基因骨髓移植移植物抗宿主病
化疗药物诱导白血病细胞凋亡对Fas/FasL途径依赖性的研究被引量:7
2002年
刘忠文肖娟游泳邹萍
关键词:化疗药物白血病细胞凋亡FAS/FASL
转染mFasL-cDNA小鼠造血细胞预防移植物抗宿主病的实验研究被引量:2
2003年
目的 探讨通过Fas FasL途径清除骨髓移植物中T细胞后 ,预防移植物抗宿主病(GVHD)的可能性。方法 近交系BAC小鼠 (雄性 ) ,为供者 ,近交系BALB/C小鼠 (雌性 ) ,为受者。随机分为实验组及对照组 ,每组各 10对。实验组采用脂质体转移法 ,将FasL cDNA转入BALB/C小鼠造血细胞 ,体外与BAC小鼠骨髓移植物混合培养后 ,输注给经致死量照射的BALB/C小鼠。对照组以未转染的BALB/C小鼠骨髓单个核细胞 (BMNC)与BAC小鼠骨髓BMNC混合培养后 ,输注给经致死量照射的BALB/C小鼠。通过观察两组受者鼠的一般情况、死亡率及组织病理学检查 ,了解GVHD的发生率。结果 实验组受者 10只 ,6 0d死亡 2只 ,共 4只有GVHD改变 ,对照组受者 10只 ,6 0d死亡 7只 ,10只均有GVHD改变。结论 转染mFasL cDNA小鼠造血细胞能有效地预防GVHD的发生。
徐之良邹萍刘凌波
关键词:骨髓移植移植物抗宿主病基因转染FAS抗原造血细胞
转染外源性Fas配体基因的正常骨髓CD34^+细胞诱导U937细胞凋亡的实验研究被引量:1
2004年
目的:观察转染外源性FasL的CD34+细胞对白血病细胞系U937的凋亡诱导作用,探讨通过向CD34+细胞转染FasL以增强移植后GVL效应的可能性。方法:免疫磁珠法分选骨髓CD34+细胞并进行体外扩增培养;FasL基因逆转录病毒途径转染CD34+细胞,并与白血病细胞U937混合培养,加入或不加入柔红霉素、阿糖胞苷,借助TUNEL、流式细胞仪检测细胞的凋亡率。结果:逆转录病毒上清转染后48~72h,流式细胞仪检测24.2%±2.4%CD34+细胞表达FasL(P<0.01)(未转染的CD34+细胞FasL阳性率为7.6%±1.1%)。未转染或转染外源FasL的CD34+细胞与白血病细胞U937以1:1的比例混合培养18h后,细胞凋亡率分别为5.0%±1.3%、10.8%±0.6%(P<0.01);FasL+CD34++DNR或FasL+CD34++Arac作用后,细胞凋亡率分别为13.4%±1.0%(P<0.05)、17.95%±1.3%(P<0.01)。结论:表达外源性FasL的骨髓CD34+细胞可诱导白血病细胞U937凋亡。提示植入转染外源性FasL基因的骨髓CD34+细胞可增强BMT后的GVL效应。
刘忠文邹萍
关键词:FAS配体CD34^+细胞U937细胞
诱导小鼠同种异体反应性T细胞凋亡
2002年
通过 Fas L - Fas途径诱导小鼠同种异体反应性 T细胞 (alloreactive T cells,ARTC)凋亡 ,为减轻异基因骨髓移植 (allo- BMT)后的移植物抗宿主病 (GVHD)探索新的手段。采用磁性细胞分离系统 (MACS)分离 BAL B/ c小鼠 (H- 2 d)干细胞抗原 (Sca) - 1+ 早期造血细胞 (early hematopoietic cells,EHC) ,然后与经丝裂霉素 C去增殖的能产生高滴度表达 m Fas L假病毒的逆转录病毒包装细胞 (PA317)共培养 ,进行 m Fas L c DNA基因转移 ;用含干细胞因子(SCF)、白细胞介素 - 3(IL- 3)和白细胞介素 - 6 (IL- 6 )的完全培养基培养 1周后 ,借助 PCR、RT- PCR、FCM技术检测外源 m Fas L c DNA在扩增的造血细胞 (HC)中的整合与表达效率 ;或与异基因 BAC小鼠 (H- 2 dxb)脾细胞进行单向混合淋巴细胞培养 (OWML C) ,6 d后用 Annexin V/ PI标记和 FCM检测 BAC脾细胞凋亡。结果显示 :用 MACS法成功分离出 BAL B/ c小鼠 Sca- 1+ EHC (1× 10 5个 /只 ) ,纯度为 (89.0± 6 .1) % ;经逆转录病毒法对它进行外源 m Fas Lc DNA转染并扩增 1周后 ,细胞总数达 2× 10 6 个 /只 ;基因组 DNA PCR和 RT- PCR证实 HC整合有 m Fas L c DNA和Neor基因 ,并表达外源基因 m RNA;FCM发现 m Fas L+ HC占 (43.9± 5 .6 ) % ,而用表达
刘凌波邹萍徐之良胡中波龚非力
关键词:FAS配体FAS抗原基因转移T淋巴细胞细胞凋亡
表达mFasL的新型双顺反子逆转录病毒基因转移体系的建立被引量:2
2002年
为建立表达小鼠 Fas配体 (m Fas L)的内部核糖体进入位点 (IRES)串联的双顺反子新型逆转录病毒基因转移体系 ,用基因重组技术将 m Fas L c DNA基因构建到 IRES双顺反子逆转录病毒载体 (PL XIN)中 ,脂质体法将此重组质粒 PL FIN和空载体 PL XIN分别转染包装细胞 (PA317) ,经 G418筛选出抗性包装细胞克隆 ,基因组 DNA PCR测定基因整合情况。并将抗性 PA317克隆培养上清感染小鼠成纤维细胞系 (NIH3T3) ,筛选出高滴度的 PA317细胞系 ;用流式细胞术测定筛选的 NIH3T3细胞目的基因表达状况 ;以抗性 NIH3T3和 Fas+Yac- 1细胞共培养法检测目的基因的生物学活性。筛选出 12个 PL FIN转染的 PA317细胞克隆中 ,最高产毒效价为 8.5× 10 5CFU(colony- form ing- unit) ;经此上清感染、筛选出的 NIH3T3细胞 ,高表达 m Fas L (阳性率高于对照组 5 2 .5 4% ) ;且能显著诱导 Fas+Yac- 1细胞凋亡 (凋亡率高于对照组 49% )。说明成功建立了表达 m Fas L
刘凌波邹萍徐之良王良利胡中波
关键词:基因转移细胞凋亡
共2页<12>
聚类工具0