国家自然科学基金(30901219)
- 作品数：6 被引量：22H指数：2
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- 丙烯酰胺对NB-1细胞钙稳态的影响被引量：2
- 2012年
- 目的研究丙烯酰胺(AM)对神经细胞钙稳态的影响,探讨AM致神经损伤的可能机制。方法将人神经母细胞瘤(NB-1)细胞诱导分化成熟后,以不同浓度AM进行体外染毒,采用噻唑蓝(MTT)比色法检测神经元损伤程度,并应用ATP酶检测试剂盒测定不同损伤程度的细胞Ca2+-ATP酶和Na+-K+-ATP酶活力的变化。以Fluo-3/AM为荧光指示剂,用激光共聚焦方法检测细胞内游离钙离子浓度的瞬时变化情况。结果 AM染毒组成熟NB-1细胞存活率有明显下降,提示AM对神经细胞有毒性作用;AM染毒组Ca2+-ATP酶和Na+-K+-ATP酶活力值也均下降,差异具有统计学意义(P<0.05);AM作用于成熟NB-1细胞可立即引起细胞内钙离子浓度升高。结论 AM可能通过影响神经细胞钙稳态产生毒性作用。
- 李冲王茜曹燕花刘楠关维俊王学生肖经纬李斌李忠生
- 关键词：NB-1CA2+-ATP酶NA+-K+-ATP酶
- 丙烯酰胺对人神经母细胞瘤NB-1细胞的毒性
- 2012年
- 分析丙烯酰胺(ACR)对人神经母细胞瘤NB-1细胞毒作用的剂量-效应和时间-效应关系,进一步探讨丙烯酰胺的神经毒性机制。将NB-1细胞诱导成熟后,设置正常对照及染毒浓度组、时间组,采用MTT法和LDH法检测各组细胞存活和生长情况,分析ACR对NB-1细胞的毒性作用。MTT结果表明,>60μg/ml的ACR对NB-1细胞开始表现出明显的抑制作用,浓度越大,抑制作用越强。LDH结果表明,24 h、72 h时间点,ACR浓度>60μg/ml,LDH释放率明显增高;而48 h则在ACR浓度>40μg/ml,LDH释放率明显增高,且均随浓度的加大,LDH释放率逐渐升高。时间上,LDH结果与MTT一致,均以48 h表现最为显著。提示在一定浓度范围内,ACR显示出对NB-1细胞的毒性作用。
- 韩伟王茜曹燕花刘楠关维俊王学生肖经纬李斌李忠生
- 关键词：丙烯酰胺MTTLDH
- 丙烯酰胺对施万细胞源性神经生长因子及受体的影响被引量：1
- 2012年
- 目的探讨施万细胞(Schwann cells,Scs)源性神经生长因子(nerve growth factor,NGF)及其受体(TrkA、P75)在丙烯酰胺(acrylamide,ACR)所致运动神经元损伤及损伤后自然修复过程中的变化。方法原代培养大鼠Scs,插入式混合培养Scs与运动神经元VSC4.1,ACR(终浓度为40μg/ml)染毒24 h,染毒后去除毒物暴露24 h,建立ACR损伤及损伤后自然修复的细胞模型;Western-blot和RT-PCR分别检测混合培养体系中Scs所分泌的NGF及其受体TrkA、P75的蛋白和mRNA水平变化。结果 ACR对混合培养体系内的运动神经元VSC4.1具有明显细胞毒性,细胞形态损伤显著,去除ACR暴露后损伤减轻;与对照组相比,ACR染毒24 h及自然修复24 h,NGF蛋白含量显著增加(P<0.05),ACR染毒24 h后P75含量减少(P<0.05),修复24 h,P75的含量变化不显著(P>0.05),未检出TrkA蛋白表达;与对照组相比,ACR染毒24 h,NGF mRNA、TrkA mRNA、P75 mRNA表达水平显著升高(P<0.05);修复24 h,NGF mRNA表达水平无明显改变(P>0.05),TrkA mRNA、P75 mRNA水平显著降低(P<0.05)。结论施万细胞源性NGF在ACR对运动神经元VSC4.1损伤及修复过程中与其受体结合,通过正负反馈调节发挥一定的神经元保护作用。
- 肖经纬郭灿烂牛凯龙李忠生孟会林李斌
- 关键词：施万细胞丙烯酰胺神经生长因子及其受体
- 新型强阳离子交换在线净化固相萃取整体柱与液相色谱串联质谱联用测定猪肉中的克伦特罗被引量：12
- 2013年
- 以甲基丙烯磺酸钠(SMAS)为单体,乙二醇二甲基丙烯酸酯(EDMA)为交联剂,在内径为4.6mm的不锈钢柱管中聚合得到一种新型强阳离子交换在线净化整体柱。扫描电镜图显示该整体柱结构均匀、连续、多孔。将其用作萃取介质,结合高效液相色谱-串联质谱检测猪肉中残留的克伦特罗。结果表明,该整体柱能够有效地对猪肉中的克伦特罗富集净化,方法的线性范围为0.05～10.0μg/L,相关系数(r)为0.9988,定量下限为0.5μg/kg,完全满足我国对该类药物残留的限量要求。方法在0.5、1.0、5.0μg/kg 3个加标水平下的平均回收率分别为91%、94%、96%,相对标准偏差分别为4.9%、4.5%、3.4%。该在线净化液相色谱串联质谱法简单、高效、准确,可用于日常检测。
- 刘珊王曼曼艾连峰邢涛郝玉兰王学生
- 关键词：整体柱强阳离子交换克伦特罗
- 丙烯酰胺对大鼠神经元突触可塑性的影响被引量：6
- 2011年
- 目的探讨丙烯酰胺（ACR）对大鼠神经元突触可塑性的影响及机制。方法24只Wistar大鼠按随机数字表完全随机分为对照组（腹腔注射5g/kg生理盐水）和染毒组（腹腔注射30mg／kgACR），每组12只，雌雄各半；采用神经行为学方法评价神经损伤状态，组织病理学法检测心、肝、脾、肺、肾等的超微结构改变，电镜观察脊髓背角突触结构参数的变化，免疫组化法检测大鼠突触特异位点突触素I（SynapsinI）的变化。结果与对照组（雄性：1．00±0．00；雌性：1．00±0．00）比较，染毒组大鼠的步态评分明显增加（雄性：2．50±0．55，t=-7．24，P〈0．01；雌性：3．17±0．41，t=-12．19，P〈0．01）。两组大鼠心、肝、脾、肺、肾等脏器未见病理改变。与对照组[雄性：（0．41±0．09）um；雌性：（0．40±0．06）um]比较，染毒组大鼠的突触活性带长度缩短[雄性：（0．15±0．05）um，t=6．59，P〈0．05；雌性：（0．14±0．07）um，t=7．26，P〈0．05]。对照组和染毒组SynapsinI的定位一致，均位于脊髓背角灰质。对照组SynapsinI呈强阳性反应，而染毒组阳性信号减弱。半定量结果显示，与对照组（雄性：195．40±12．30；雌性：195．19±6．71）比较，染毒组SynapsinI的含量降低（雄性：60．90±29．19，t=10．40，P〈0．05；雌性：67．56±20．23，t=15．65，P〈0．05）。结论ACR神经损伤过程中，大鼠突触结构发生了可塑性改变，并与SynapsinI的表达可能关联。
- 肖经纬孟会林段化伟张志荣王健鱼涛郑敏李斌郑玉新
- 关键词：丙烯酰胺突触神经元可塑性突触素I
- 突触素Ⅰ与神经递质释放局部调节环路关联的研究进展被引量：2
- 2011年
- 神经递质释放是神经系统后续级联调控的基础,涉及整体和局部性的调节机制,其中局部调节环路的作用较为直接,物质基础更为明确。
- 肖经纬郑玉新
- 关键词：神经递质释放
