浙江省医药卫生科学研究基金(2004A086)
- 作品数：6 被引量：5H指数：1
- 相关作者：董学君郑专陈建军黄黎明王贵珍更多>>
- 相关机构：绍兴市人民医院温州医学院生物技术公司更多>>
- 发文基金：浙江省医药卫生科学研究基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 外周血TSGF及hMAM表达指标监测乳腺癌微转移价值初探被引量：1
- 2005年
- 目的探索TSGF和hMAM表达指标对乳腺癌细胞外周血微转移诊断的应用价值。方法分离受检者外周血单个核细胞,TRIZOL液提取总RNA,作RT-PCR并用-βactin监控;确认的cDNA先作普通PCR扩增,再作荧光定量PCR扩增。血清作TSGF检测。结果64例标本有63例确认转录为cDNA,其中乳腺癌43例、良性乳腺肿瘤和正常对照各10例。经普通PCR后再作荧光定量PCR,乳腺癌hMAM表达阳性率为53.3%、良性乳腺肿瘤和正常对照均无阳性,乳腺癌组与良性乳腺肿瘤或正常对照组间hMAM表达有显著差异;淋巴结转移组与未转移组,hMAM表达有显著差异。TSGF阳性率为1.6%,乳腺癌组与良性乳腺肿瘤组及正常对照组间无显著差异。结论二次PCR的灵敏度可成功检出外周血hMAM的表达,而单次PCR法的灵敏度不够;外周血hMAM表达指标可用于监测乳腺癌细胞微转移,但未见TSGF指标对乳腺癌微转移的监测价值。
- 董学君郑专茹金城黄黎明赵雅清陈建军王贵珍
- 关键词：乳腺癌RT-PCRTSGF外周血
- 外周血中乳腺癌细胞hMAM表达检测方法的建立及初步应用
- 2007年
- 目的建立反转录结合荧光定量PCR(FQ-PCR)检测外周血乳腺癌细胞hMAM基因表达方法,了解其监测乳腺癌细胞微转移的应用价值。方法克隆目的片段,制备标准品并做测序验证。培养乳腺癌MDA-MB453、MCF7细胞株,制成血液标本模型,GAPDH基因为内对照,反转录结合FQ-PCR检测乳腺癌细胞株血标本模型和10例乳腺癌患者外周血的hMAM表达。结果电泳和测序证实,克隆产物系预期的目的片段。FQ-PCR标准曲线的相关系数为-1.0;用103拷贝/微升标准品重复检测5次,x±s:718.9±120.5,CV值:16.7%;MDA-MB453细胞的血标本做灵敏度试验,相当于104个血细胞中含1个乳腺癌细胞可检出阳性。未检测到MCF7细胞的hMAM表达。10例乳腺癌患者,淋巴结转移的5例中,3例hMAM表达阳性、2例阴性;无淋巴结转移的5例中,1例hMAM表达阳性、4例阴性。结论本方法可有效监测外周血中微转移的乳腺癌细胞,发现不同乳腺癌细胞系hMAM表达程度差异大。
- 董学君郑专陈建军
- 关键词：乳腺癌荧光定量聚合酶链反应微转移
- 人乳房珠蛋白外周血表达RT-PCR检测及乳腺癌诊治应用被引量：1
- 2005年
- 目的建立灵敏外周血人乳房珠蛋白(hMAM)表达 RT-PCR 检测方法,探索 hMAM 在乳腺癌诊治中的应用价值。方法分离受检者外周血单个核细胞,TRIZOL 液提取总 RNA,作 RT-PCR,并查β-actin 监控;确认的 cDNA 先作普通PCR 扩增,再作荧光定量 PCR 扩增。结果 64例标本有63例确认转录为 cDNA,其中乳腺癌43例、良性乳腺肿瘤和正常对照各10例。经普通 PCR 后再作荧光定量 PCR,乳腺癌 hMAM 表达阳性率为53.3%,与良性乳腺肿瘤和正常对照间阳性率有显著差异(P<0.05);而不作普通 PCR 的 cDNA 直接行荧光定量 PCR,结果无阳性。淋巴结转移较未转移,hMAM 表达阳性率有极显著差异(P<0.01)。结论外周血 hMAM 表达是乳腺癌细胞微转移的特异指标;单次 PCR 法的灵敏度不够,二次 PCR 可明显提高灵敏度,并一次普通 PCR 加一次荧光定量 PCR 的组合效果更理想。外周血 hMAM 表达可能是监测淋巴结转移较好指标。
- 董学君黄黎明施长根郑专赵雅清陈建军王贵珍
- 关键词：乳腺癌RT-PCR外周血
- 乳腺癌患者外周血CK19基因表达的检测及临床价值分析被引量：3
- 2007年
- 目的探索外周血CK19基因表达的检测及在乳腺癌诊断中的应用价值。方法应用逆转录结合荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)检测乳腺癌MDA-MB453细胞株血液标本模型和280例临床标本的CK19表达,同时检测三磷酸甘油醛脱氢酶(GAPDH)表达作为PCR方法的监控指标。结果逆转录结合FQ-PCR检测MDA-MB453细胞株血液标本模型的灵敏度为107个血细胞中含1个乳腺癌细胞的水平。280例外周血临床标本的CK19表达,乳腺癌组(38/120)与非乳腺癌组(20/80)比较,差异无统计学意义(P>0.05);乳腺癌组(38/120)与正常对照组(2/80)比较,差异有统计学意义(P<0.01);乳腺癌淋巴结转移组(21/53)与未见淋巴结转移组(17/67)比较,差异无统计学意义(P>0.05);乳腺癌术后2年以上者,复发组(3/9)与未复发组(6/31)比较,差异也无统计学意义(P>0.05)。GAPDH表达均阳性。结论CK19是上皮细胞性癌细胞的较特异指标,诊断乳腺癌的特异性不强,但可用作病理学检查的补充,或结合其他特异性指标共同诊断乳腺癌微转移和复发,具有一定的价值。
- 董学君郑专黄黎明赵霞清
- 关键词：乳腺癌荧光定量聚合酶链反应微转移细胞角蛋白19
- 人乳房珠蛋白外周血表达RT-PCR检测及乳腺癌诊治的应用
- 目的:建立灵敏的外周血人乳房珠蛋白(hMAM)表达RT-PCR检测方法,探索hMAM 在乳腺癌诊治中的应用价值．方法:分离受检者外周血单个核细胞,TRIZOL液提取总RNA,作 RT-PCR,并查-actin监控;确认的...
- 董学君黄黎明施长根郑专赵雅清陈建军王贵珍
- 关键词：乳腺癌RT-PCR外周血
- 文献传递
- 外周血TSGF及hMAM表达指标监测乳腺癌微转移价值初探
- 2005年
- 目的探索TSGF和hMAM表达指标对乳腺癌细胞外周血微转移诊断的应用价值。方法分离受检者外周血单个核细胞,TRIZOL液提取总RNA,作RT-PCR并用β-actin监控;确认的cDNA先作普通PCR扩增,再作荧光定量PCR扩增。血清作 TSGF检测。结果 64例标本有63例确认转录为cDNA,其中乳腺癌43例、良性乳腺肿瘤和正常对照各10例。经普通PCR 后再作荧光定量PCR,乳腺癌hMAM表达阳性率为53.3%、良性乳腺肿瘤和正常对照均无阳性,乳腺癌组与良性乳腺肿瘤或正常对照组间hMAM表达有显著差异;淋巴结转移组与未转移组,hMAM表达有显著差异。TSGF阳性率为1.6%,乳腺癌组与良性乳腺肿瘤组及正常对照组间无显著差异。结论二次PCR的灵敏度可成功检出外周血hMAM的表达,而单次PCR法的灵敏度不够;外周血hMAM表达指标可用于监测乳腺癌细胞微转移,但未见TSGF指标对乳腺癌微转移的监测价值。
- 董学君郑专茹金城黄黎明赵雅清陈建军王贵珍
- 关键词：乳腺癌RT-PCRTSGF外周血
- 外周血中检测乳腺癌细胞株hMAM表达的方法探讨
- 2007年
- 目的建立逆转录结合荧光定量PCR(FQ-PCR)检测外周血乳腺癌细胞hMAM基因表达方法,了解其监测乳腺癌细胞微转移的应用价值。方法克隆目的片段,制备标准品并作测序验证。培养乳腺癌MDA-MB453、MCF7细胞株,制成血液标本模型,GAPDH基因为内对照,逆转录结合FQ-PCR检测乳腺癌细胞株血标本模型和10例乳腺癌患者外周血的hMAM表达。结果电泳和测序证实,克隆产物系预期的目的片段。FQ-PCR标准曲线的相关系数为-1.0;用103copies/μl标准品重复检测5次,x±s:718.9±120.5,CV16.7%;MDA-MB453细胞的血标本作灵敏度试验,相当于104个血细胞中含1个乳腺癌细胞可检出阳性。未检测到MCF7细胞的hMAM表达。10例乳腺癌患者,淋巴结转移的5例中,3例hMAM表达阳性、2例阴性;无淋巴结转移的5例中,1例hMAM表达阳性、4例阴性。结论本方法可有效监测外周血中微转移的乳腺癌细胞,发现不同乳腺癌细胞系hMAM表达程度差异大。
- 董学君郑专陈建军
- 关键词：乳腺癌荧光定量聚合酶链反应微转移
